两株对花生促生的芽孢杆菌的鉴定及溶磷特性研究

土壤中绝大多数的磷以难溶态存在而不能被利用,溶磷微生物可以溶解难溶性磷,提高土壤的速效磷水平,从而促进植物生长。本研究利用盆栽实验测定从茶树根际分离的2株溶磷细菌对花生生长的影响,发现均具有显著促生效应,尤以HP9菌株表现更为明显。通过形态、生理生化试验及分子生物学方法进行鉴定,将HP9、HP10菌株分别鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)和坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)。研究2个菌株在不同碳氮源条件下的溶磷性,结果显示HP9菌株具有更强的溶磷能力,2个菌株溶磷的最优碳源均为葡萄糖,最优氮源则有明显差异,HP9菌株优先利用硝酸钾,而HP10菌株则以硫酸铵为氮源时溶磷量更高;进一步研究菌株的溶磷机制,相关性分析显示2个菌株培养液中的可溶磷含量与pH值呈显著负相关,GC-TOF-MS测定表明2个菌株代谢产物中产生的有机酸是其溶磷的重要原因,而产生的有机酸类型和含量的明显不同与菌株溶磷水平的差异有关,研究结果解析了芽孢杆菌属不同种菌株在溶磷机制上存在的多样性。     

禽流感病毒H5N1血凝素基因适应性进化过程中的关键位点突变规律研究

目的:寻找导致禽流感病毒H5N1血凝素(HA)适应性进化的关键突变,建立氨基酸突变评价体系,对突变作用进行评估,印证它们与病毒适应性进化的关联性。方法:计算株频率和枝频率,寻找标记分枝,向根结点回溯寻找HA进化路径上的氨基酸突变。计算各突变位点氨基酸的频率变化、有效变换及高频次突变,基于以上几个因素建立突变评价体系。结果:建立了大规模自动化寻找突变的方法,计算得到HA进化过程中的氨基酸突变435个,通过氨基酸频率图表分析这些突变可以很好地反映病毒适应性进化过程,其中79个突变是有效变换,发生的位点为正选择位点,且多数位点落在HA抗原表位上;29个突变是高频次突变,其中多数也为有效变换,因而与病毒适应性进化密切相关。结论:大规模自动化寻找突变的方法可靠,建立的突变评价体系准确性高,找到的关键突变及位点对实验有很好的指导意义。     

40例慢性脑型血吸虫病的脑电图分析

目的:了解脑型血吸虫病脑电图(EEG)的脑电活动状况,为临床诊断与治疗提供参考。方法:收集1997~2004年临床诊断为脑型血吸虫病的40例EEG资料,主要分析异常EEG的脑电活动状况与异常程度、临床分型及预后的关系。结果:31例出现不同程度的EEG异常改变,异常率为77.5%,其中癫痫性为70%;脑瘤型为100%。绝大部分EEG检查是患者经治疗后作的。治疗前后均作了EEG检查的仅9例。治疗前,9例均有不同程度异常,治疗后7例有不同程度改善,2例恢复正常。结论:EEG对脑型血吸虫病的诊断及预后的评价有参考价值。     

糖脉康颗粒联合氯沙坦治疗2型糖尿病并发高血压的临床观察

目的：观察糖脉康颗粒联合氯沙坦治疗2型糖尿病并发高血压的临床疗效。方法：将120例2型糖尿病并发高血压患者随机平均分为观察组与对照组,观察两组治疗前后各项相关指标的变化及临床总体疗效。结果：治疗12周后,观察组的总有效率为91.7%,显著优于对照组的60.0%（P〈0.05）,观察组患者的空腹和餐后血糖、糖化血红蛋白与治疗前的差值分别为（1.02±0.99）mmol/L,（2.76±1.28）mmol/L,（0.62±0.23）%,收缩压与舒张压分别为（136.58±9.88）mmHg和（82.25±6.66）mmHg,对照组与之相应的值分别为（0.14±1.15）mmol/L,（0.52±1.19）mmol/L,（0.22±0.17）%,（152.20±7.75）mmHg和（92.85±5.68）mmHg,观察组改善程度均优于对照组（P〈0.05）。结论：糖脉康颗粒联合应用氯沙坦,对2型糖尿病并发高血压患者的空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白值的控制效果要优于单纯应用氯沙坦,治疗后患者的临床症状显著改善,总体疗效显著优于单纯应用氯沙坦。     

鸢尾苷元磺酸钠对柯萨奇B3型病毒诱导细胞固有免疫的初步研究

柯萨奇B组3型（Coxsackievirus B3,CVB3）病毒目前仍严重危害人类健康,目前没有批准的用于CVB3治疗的特效药,亟需开发新的抗CVB3药物。鸢尾苷元磺酸钠（Tectorigenin sodium sulfonate,TSS）是中药川射干化学成分鸢尾苷元的修饰物,本研究应用细胞感染模型评估了TSS体外抗CVB3作用。实验中,以CVB3感染的HT-29细胞为体外模型,在最大无毒浓度（TC0）情况下观察不同浓度药物作用于HT-29细胞后,在72h收集细胞,采用相对荧光定量RT-PCR法检测细胞中CVB3病毒核酸量,TLR3、TRIF mRNA表达水平;收集上清液,采用ELISA法测定上清液NF-κB,TNF-α、IL-6、IFN-β含量。结果显示TSS对HT-29细胞的TC0为15.625μg/mL。与模型组比较,15.625μg/mL剂量的鸢尾苷元磺酸钠能有效增加HT-29细胞活性,降低CVB3病毒滴度（P<0.001）,能明显降低细胞内转导和转录活化因子TLR3、TRIF、NF-κB的表达水平（P<0.05）,降低炎症因子TNF-α、IL-6、IFN-β的含...     

参附注射液联合奥西替尼治疗晚期EGFR阳性非小细胞肺癌患者疗效及对患者免疫功能的影响

摘要 目的：探讨分析参附注射液联合奥西替尼治疗晚期EGFR阳性非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）患者疗效及对患者免疫功能的影响。方法：选择2018年6月~2020年12月我院收治的EGFR突变阳性晚期NSCLC患者96例,随机分为观察组50例、对照组46例,对照组给予奥西替尼口服治疗,观察组在对照组基础上给予参附注射液,两组均治疗16周。比较两组治疗临床疗效、免疫功能指标及患者生活质量评分结果。结果：治疗前,两组T淋巴细胞亚群水平和EORCT-QLQ-C30评分差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗后,与对照组相比,观察组患者治疗有效率、CD4⁺/CD8⁺比值、功能领域及总体健康状况评分均显著增加,而外周血CD8⁺水平、症状领域评分均显著降低（P<0.05）。结论：参附注射液联合奥西替尼治疗晚期EGFR阳性NSCLC患者可有效提高临床治疗效果,改善患者机体免疫功能并提高患者生活质量,值得临床推广。     

超临界流体发泡技术制备BMP-2-PLLAms/FGF-2-nHA/PLGA复合支架及体外成骨诱导效应研究

本研究将左旋聚乳酸微球(PLLAms)与纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙醇酸(nHA/PLGA)多孔支架复合,构建可次第释放不同生长因子的骨组织工程支架.首先,制备载骨形态发生蛋白2的左旋聚乳酸微球(BMP-2-PLLAms),然后将微球与nHA/PLGA及碱性成纤维细胞生长因子2(FGF-2)按照一定的比例混合,通过超临界流体发泡制备BMP-2-PLLAms/FGF-2-nHA/PLGA复合支架.制备的BMP-2-PLLA载药微球呈规则球形,粒径分布在6~10μm之间,BMP-2载药量为1.45×10-3%,包封率为61.9%,制备的BMP-2-PLLAms/FGF-2-nHA/PLGA复合支架孔径为100~200μm,孔隙率为75.8%,抗压强度为6.8 MPa,8周降解率为19.9%.7天时,FGF-2和BMP-2的累计释放率分别为77.1%和44.2%;14天时,FGF-2和BMP-2的累计释放率分别为84.9%和61.5%.大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨诱导实验证明复合支架中释放的BMP-2和FGF-2能够持续有效地刺激BMSCs的增殖和分化,具有良好的生物活性.BMP-2-PLLAms/FGF-2-nHA/PLGA复合支架有效实现了FGF-2和BMP-2的次第释放,且能够显著地促进BMSCs的成骨分化.     

不同镉污染土壤下水稻镉富集与转运效率

选取适合湖南种植的48个水稻品种(系)在中轻度和重度镉污染土壤上进行盆栽试验,通过分析水稻籽粒产量、各器官富集系数、转运系数及植株净化效率,探明不同镉污染土壤对水稻镉富集、转运及净化效率的影响。结果表明:中轻度和重度镉污染土壤下糙米Cd含量、籽粒产量分别为0.010~0.048 mg·kg~(-1)、96.63~152.55 g·盆~(-1)和0.105~0.476mg·kg~(-1)、101.10~165.12 g·盆~(-1),重度镉污染土壤明显促进糙米镉含量增加,但对籽粒产量影响不大;中轻度和重度镉污染土壤下糙米镉富集效率和产量均不存在显著相关性;依据产量和糙米镉富集效率进行聚类分析,将所有品种在中轻度镉污染土壤下分为低镉低产组、低镉高产组;重度镉污染土壤分为高镉低产组、高镉高产组;两种镉污染土壤水稻各器官镉富集大小顺序均为糙米叶茎秆根系,转运效率则为土-根茎-叶茎-糙米根-茎,土壤镉主要转运至根部并富集于根部;水稻镉富集及转运效率受产量因素影响较小,但受土壤镉浓度影响较大;重度镉污染土壤明显增强水稻各器官镉富集和根-糙米各环节镉转运效率,较中轻度镉污染土壤增幅显著;水稻根部的净化效率远高于地上部分。     

表达酿酒酵母ALAS的重组大肠杆菌胞外5-氨基乙酰丙酸的产量和纯化

5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinate,ALA)由5-氨基乙酰丙酸合酶(5-aminolevulinate synthase,ALAS)催化产生。利用重组细菌在大肠杆菌合成ALA已有不少研究。重组真核生物ALAS在大肠杆菌合成ALA的研究没有报道。酿酒酵母ALAS在大肠杆菌重组表达,在摇瓶培养条件下,分析了胞外ALA的产量,重组菌的生长状况和细胞中ALAS的活性,利用两种国产树脂纯化ALA,毛细管电泳分析确定ALA纯度在LB培养基中,初始pH6.5,含有20mmol/L的酮戊酸、20mmol/L琥珀酸和20mmol/L的甘氨酸,37℃下诱导培养12h,胞外ALA的产量为162mg/L培养基。纯化的ALA纯度达到90%。     

75 例儿童葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征的临床表现及发病情况调查分析

目的:探讨75例儿童葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征(SSSS)的临床表现及发病情况。方法:回顾性分析2012年10月至2015年7月我院75例SSSS患儿的病历资料,探讨其临床表现、发病特点及治疗过程。结果:儿童SSSS的发病以婴幼儿为多主,农村的发病率大于城市,诱因以上呼吸道感染和急性化脓性扁桃体炎最为多见,临床分型主要为泛发性。加用头孢霉素组的触痛消失时间、红斑水疱进展停止时间和红斑消失出现脱屑时间与加青霉素组相比较均明显缩短;加用头孢霉素组的治疗时间为6.61±1.01天,与加青霉素组的7.45±1.22天相比明显缩短;病程与加青霉素组相比亦显著缩短,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:SSSS以婴幼儿为多发,但大儿童亦存在发病的可能。SSSS可能有明显诱因,以上呼吸道感染和急性化脓性扁桃体炎最为多见。治疗时,细菌培养和药敏试验至关重要,能够有效提高治疗的效率,改善治疗效果。