研究报告: 组织蛋白酶B介导NLRP3小体在砷致小胶质细胞炎症激活中的作用

目的 探究组织蛋白酶B（CTSB）介导NLRP3小体在砷致小胶质细胞（BV-2）炎症激活中的作用。方法 取处于对数生长期的BV-2细胞，分别暴露于终浓度为0、2、4、8 μmol/L亚砷酸钠（NaAsO₂）溶液培养24 h，检测细胞活性，测定各组细胞内CTSB和细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达水平。流式细胞仪检测胞内溶酶体膜稳定性。基于实验结果，增设CTSB抑制剂组（5 μmol/L CA074-Me +8 μmol/L NaAsO₂、10 μmol/L CA074-Me+8 μmol/L NaAsO₂），检测两组细胞内炎症相关蛋白NLRP3、Caspase-1和IL-1β、IL-18的表达水平。结果 与对照组比较，各染砷组细胞抑制率增高，呈现剂量效应关系，溶酶体膜稳定性下降，差异有统计学意义（P<0.01），胞内CTSB、NLRP3、IL-1β、IL-18、Caspase-1表达增高，差异有统计学意义（P<0.01）；与对照组（8 μmol/L NaAsO₂）比较，抑制剂组BV-2细胞胞内CTSB、NLRP3、IL-1β、IL-18、Caspase-1水平均降低，差异有统计学差异（P<0.01）。结论 NaAsO₂通过诱导小胶质细胞内CTSB水平的上升，介导NLRP3炎症小体激活小胶质细胞，促其释放炎性因子，致神经系统损伤。     

严重急性呼吸综合征冠状病毒2膜蛋白对宿主细胞pre-mRNA 3"UTR加工的影响

目的 研究严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）膜蛋白对宿主细胞mRNA前体（pre-mRNA）3"非翻译区（UTR）加工的影响。方法 本研究以人肺上皮细胞系A549为模型，利用瞬时转染在细胞内过表达SARS-CoV-2膜蛋白；利用RNA-Seq测序技术及生物信息学分析方法，系统性描绘宿主细胞选择性多聚腺苷酸化（alternative polyadenylation，APA）事件；Metascape数据库对发生显著APA变化的基因进行功能富集分析；RT-qPCR验证靶基因3"UTR长度变化；蛋白质免疫印迹（Western blot）检测目的蛋白表达水平。结果 SARS-CoV-2膜蛋白外源表达后宿主细胞内共813个基因发生显著APA变化。GO和KEGG分析显示，差异APA基因广泛参与有丝分裂细胞周期、调节细胞应激等生物过程，涉及病毒感染和蛋白质加工等。从中进一步筛选出AKT1基因，在IGV软件中显示3"UTR延长；RT-qPCR验证AKT1基因的3"UTR长度变化趋势；Western blot结果显示AKT1蛋白磷酸化水平增加。结论 SARS-CoV-2膜蛋白潜在影响宿主pre-mRNA的3"UTR加工，其中参与多种病毒性生物过程的AKT1基因 3"UTR延长，且其编码的蛋白质功能在细胞内被激活。     

《自然》：发现压力促使细胞演变成肿瘤信号途径

来自霍德华休斯医学院。复旦大学生科院复旦一耶鲁生物医学研究中心（Fudan-Yale Center for Biomedical Research）等处的研究人员发现了压力促使细胞演变成肿瘤的信号途径，这项研究描述了癌症控制人体的一种全新的途径，同时也提出了一种治疗这种致命疾病的新方法。这一研究成果公布在《自然》在线版上。     

蚕豆根尖细胞微核试验——Ⅴ.经二甲基肼处理的小鼠粪便诱变效应及抗诱变效应

昆明种小鼠随机分为4组,3组皮下注射二甲基肼(DMH),并分别饮用自来水,嗜酸性乳酸菌Shahani菌株发酵奶及牛奶。第4组为溶剂乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)对照组。在实验第20周,用蚕豆根尖细胞微核试验检测各组小鼠粪便乙醚提取物的诱变及抗诱变性能。结果发现:DMH饮自来水组小鼠粪便提取物有明显诱变性,并有显著的剂量效应关系;发酵奶能明显抑制DMH处理小鼠粪便的诱变性;诱变性和大肠肿瘤发生有关。我们认为Shahani菌株发酵奶可作为抗结肠癌的饮食。蚕豆根尖细胞微核试验可作为一种新的简便及可靠的粪便诱变性检测途径。     

3T3细胞饲养层培养人表皮细胞最适密度研究

本文分别以五种不同浓度的表皮细胞和四种密度的3T3细胞饲养层做了混合培养观察。接种前3T3细胞先行~(60)Co,60Gy放射。培养的表皮膜片均做了大体染色,组织切片和电镜观察。不同培养时间的表皮细胞还分别进行了DNA合成。~3H-TdR掺入标记测定。结果证实表皮细胞与3T3细胞最佳混合接种比例为1:1。最适细胞接种量为5×10~4/cm~2。在此条件下表皮细胞生长最快,15天形成膜片。而且饲养层培养表皮细胞接种量少,表皮面积扩大倍数大。为此我们认为饲养层培养是表皮细胞培养的最好方法之一。     

小胶质细胞在糖尿病中枢神经病变中的作用及机制

糖尿病神经病变在所有糖尿病的并发症之中属于最常见的一种类型。当糖尿病神经病变发生时,就会对生活质量造成严重的影响。其中糖尿病中枢神经病变患者出现不同程度的认知功能障碍甚至痴呆。小胶质细胞是中枢神经系统中的常驻免疫细胞,在中枢神经病变过程中有重要作用。本文就小胶质细胞的特性及其在糖尿病中枢神经病变中的作用及机制予以概述。     

昆虫神经分泌细胞体的快速染色方法

<正> 昆虫神经分泌细胞(NSC)分布于中枢神经系统的各个部份,要观察它们的结构与种类,必须做许多切片。为了在取材之前明确NSC的正确位置,提高超薄切片的准确性,作者采用了整体快速染色法。它仅使NSC着色,从而能     

免疫细胞浸润在非小细胞肺癌诊断与预后中的应用

免疫细胞浸润对癌症的诊断与预后有着重要意义。文中收集TCGA数据库已收录的非小细胞肺癌肿瘤与正常组织基因表达数据,利用CIBERSORT工具得到22种免疫细胞占比来评估免疫细胞浸润情况。以22种免疫细胞占比为特征,用机器学习方法构建了非小细胞肺癌肿瘤与正常组织的分类模型,其中随机森林方法构建的模型分类效果AUC=0.987、敏感性0.98及特异性0.84。并且用随机森林方法构建的肺腺癌和肺鳞癌肿瘤组织分类模型效果AUC=0.827、敏感性0.75及特异性0.77。用LASSO回归筛选22种免疫细胞特征,保留8种强相关特征组成的免疫细胞评分结合临床特征构建了非小细胞肺癌预后模型。经评估及验证,预后模型C-index=0.71并且3年和5年的校准曲线拟合良好,可以对预后风险度进行准确预测。本研究基于免疫细胞浸润所构建的分类模型与预后模型,旨在对非小细胞肺癌的诊断与预后研究提供新的策略。