基于真实情境的教学设计——以“动物细胞融合技术与单克隆抗体”为例

以新型冠状病毒感染为背景创设一贯式教学情境，采用项目式学习（PBL）教学法，引导学生通过分析资料及利用动物细胞培养和融合技术，设计制备单克隆抗体的技术路线，在设计过程中，培养学生分析、推理、设计实验等能力，发展学生的生物学学科核心素养。     

45例新型隐球菌脑膜炎死亡原因分析

我科１９９０～１９９７年１２月共收治新型隐球菌脑膜炎１０４例，死亡４５例，现分析如下。１临床资料１．１一般资料４５例中，男２７例、女１８例，年龄９～５８岁，起病呈急性１３例（２９％），亚急性１４例（３１％），慢性１８例（４０％），发病前有慢性或恶性疾...     

基于MS2噬菌体病毒样颗粒的RT-PCR检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)质控品制备*

目的: 制备热稳定性好、耐RNase攻击及可全程监控操作的核酸检测新型冠状病毒阳性质控品。方法: 分别扩增MS2噬菌体外壳蛋白CP(含PAC位点)基因以及成熟酶蛋白A基因序列(含核糖体结合位点),先后插入质粒pET28a多克隆位点不同位置,构建通用重组载体pET28a/CP-A。合成包含ORF1ab基因、N基因和E基因三个靶标的特定核酸序列,插入到重组载体pET28a/CP-A中PAC位点的下游,构建包含靶序列的重组载体pET28a/CP-A/S。通过原核表达系统表达目的蛋白,采用硫酸铵和凝胶过滤层析进行纯化,利用透射电镜和动态光散射对蛋白质进行物理表征。全能核酸酶消化形成的盔甲RNA,通过RT-PCR检测其残余核酸和热稳定性。结果: 成功构建包含MS2噬菌体外壳蛋白CP基因、成熟酶蛋白A基因和外源靶核酸的重组载体,目的蛋白在25℃、IPTG 0.3mmol /L、诱导14h时以可溶性形式得到高效表达,纯化后,得到了大小均一、直径为23~28nm的病毒样颗粒,经核酸酶消化后RT-PCR检测,颗粒溶液中几乎无核酸残余且形成了包封靶基因的盔甲RNA。加速破坏试验表明该盔甲RNA无菌过滤后可在37℃稳定保持10天。结论: 在体外,利用MS2噬菌体外壳蛋白和成熟酶蛋白自组装包封外源靶序列制备的盔甲RNA,其热稳定性好,可全程监控整个检测过程,可作为核酸检测SARS-CoV-2的定性或定量质控品。     

文献辅助教学法在高中生物学专题复习中的应用——以“新型冠状病毒疫苗的研制”为例

以“新型冠状病毒疫苗的研制”专题复习教学为例，分析了文献的教学价值，阐述了文献辅助教学法的组织方式和应用价值等，以期为教师的教学提供参考。     

甘肃口岸输入性新型冠状病毒全基因组测序和基因特征分析

新型冠状病毒（SARS-CoV-2）作为一种单链RNA病毒，可引起人类严重的呼吸道综合征。本研究对2020年3月至2021年1月甘肃口岸入境人员中经RT-PCR检测SARS-CoV-2核酸阳性的8份样本进行全基因组测序，并用MEGA11软件以邻接法构建系统发育树，以揭示甘肃口岸输入性SARS-CoV-2基因组特征和遗传进化关系。全基因组测序获得8条长度为29 252bp～29 833bp的SARS-CoV-2基因组序列，基因组覆盖度97.82%～99.77%。与武汉参考株（GISAID号：EPI＿ISL＿402119）相比，共检测到64个错义突变，31个同义突变，3个移码突变和5个非编码等位基因。按照Pangolin分型法，8株输入性毒株属于B.1和B.4谱系。系统发育树分析显示来自伊朗的2例毒株聚集于同一进化支，其他6例毒株分布于不同的进化支中，与目前全球流行的关注变异株和武汉参考株均位于不同进化分支。值得注意的是，一株2020年10月份从俄罗斯输入的B.1.1.523谱系毒株出现时间早于文献报道的2021年3月份，说明该谱系可能在2020年10月或更早就已在俄罗斯流行。     

重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)腺相关病毒qPCR检测方法的验证

目的 对重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR, qPCR)检测方法进行验证。方法 以基因组两末端的反向末端重复序列(inverted terminal repeat, ITR)为目的基因，对重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)的腺相关病毒进行qPCR检测。对该方法进行线性范围、重复性、准确度、中间精密度、定量限、耐用性和适用性验证。结果 AAV浓度在2×10²～2×10⁷ copies/μL范围内线性良好(R²>0.999);重复性验证CV<10%;准确度验证回收率在91%～114%;中间精密度验证CV<10%;定量限为100 copies/μL;耐用性验证CV<10%;并且3种不同重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)均未检出腺相关病毒。结论 重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)腺相关病毒qPCR检测方法的线性范围、重复性、准确度、中间精密度、定量限和耐用性均符合可接...     

新型冠状病毒肺炎中医辨治探究

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传染性强,病死率较高,目前尚无特效药物,中医在辨治本病方面,取得一定疗效。COVID-19可归属于中医温病中的"温疫"范畴。COVID-19源于感受疫疠之气和四时不正之气,经口、鼻、眼三窍侵入机体。病位主要在肺,可累及膜原,遍及三焦。病机特点可概括为"温-热-湿-毒"。依据临床表现及疾病传变规律,可将COVID-19分为四期进行辨治,即初期(风热袭肺,湿毒郁肺),进展期(热邪壅肺,气血两燔),危重期(内闭外脱),恢复期(邪去正虚)。在临证辨治中,应遵循辨证-辨病-辨体质的原则。同时还应注意药物煎煮、服药方法和服药时长等细节问题。     

新型冠状病毒相关靶点小分子抑制剂虚拟筛选

为确定治疗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染的候选药物,开展了针对SARS-CoV-2的药物虚拟筛选研究。以SARS-CoV-2的刺突蛋白(S蛋白)和3CL蛋白酶(主蛋白酶)作为药物靶点,以美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市的2 726个小分子药物作为候选,通过分子对接方法,筛选出了3种(阿巴瑞克(Abarelix)、西曲瑞克(Cetrorelix)、鞣酸(Tannic acid))与S蛋白具有较强结合能力的小分子药物,1种(戈舍瑞林(Goserelin))与3CL蛋白酶具有较好结合能力的小分子药物,它们理论上都具有抑制新型冠状病毒复制的效果。将靶向3CL蛋白酶的候选药物与辉瑞公司开发的药物Paxlovid进行比较,发现其作用位点均集中于3CL蛋白酶的第130-200位的残基周围,具有相似的结合位点与相互作用。此外也对候选药物的物理与化学性质及与基因相互作用进行了分析。本研究可为开发新型冠状病毒感染的治疗药物提供参考。     

一种新型疱疹病毒：卡波济肉瘤相关性疱疹病毒或人类疱疹病毒8型

１９９４年从艾滋病相关的卡波济肉瘤（ＫＳ）病灶中发现了特异的疱疹病毒样ＤＮＡ序列，与γ疱疹病毒亚科核壳和包膜蛋白编码基因有相当程度的同源性。随后建立了检测该基因的多聚酶链反应（ＰＣＲ）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法，从各种类型的ＫＳ组织中检荻该基因，故认为是ＫＳ致病的相关因子。但从无ＫＳ的艾滋病、非艾滋病的免疫缺陷病人的Ｂ细胞淋巴瘤、淋巴结及外周血单个核细胞中也检测到该病毒基因的存在，因此称之为人类疱疹