高致病性2型猪链球菌毒素-抗毒素系统SezAT的鉴定与活性研究

【目的】对我国高致病性2型猪链球菌05Z33基因组的89K毒力岛序列进行生物信息学分析,发现存在一对与化脓链球菌Epsilon-zeta(ε-ζ)同源的Ⅱ型毒素-抗毒素系统(Toxin-antitoxin system,TA)——SezAT,推测该系统具有稳定89K毒力岛使其不易丢失的作用。验证SezAT为有活性的TA系统。【方法】对SezAT进行了生物信息学分析;RT-PCR验证SezAT共转录特性;在大肠杆菌中选择性地诱导表达毒素蛋白SezT和抗毒素蛋白SezA;最后通过同源重组技术敲除SezAT系统。【结果】sezAT由同一操纵子控制,SezT可抑制细菌生长,SezA可中和SezT的毒性作用,同源重组成功获得sezT敲除突变株。【结论】证实SezAT为一对有活性的毒素-抗毒素(TA)系统,为进一步研究SezAT可能发挥稳定89K毒力岛的功能,同时获得89K毒力岛缺失突变株并深入认识89K在我国高致病性SS2中的作用奠定了基础。     

酮古龙酸菌细胞色素c基因的克隆及表达

目的:从酮古龙酸菌SCB329中分离细胞色素c(Cytc)相关基因,在大肠杆菌中进行表达并验证。方法:根据酮古龙酸菌SCB329基因组序列设计引物,通过PCR从SCB329基因组中扩增cytc基因,酶切后连接pET22b表达载体,转化至大肠杆菌DH5α后提取质粒,经PCR、质粒双酶切及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3),并对表达条件进行考察;用Chelating Sepharose珠粒对可溶性的Cytc-His融合蛋白进行纯化;经光谱扫描和血红素染色等方法对表达蛋白定性分析。结果:PCR扩增的cytc基因长513 bp;重组菌在IPTG浓度为0.025 mmol/L的条件下,于28℃诱导10 h后,SDS-PAGE分析可见表达条带,相对分子质量约为18×103;Ni柱亲和层析纯化得到目的蛋白,纯化蛋白经光谱扫描呈现Cytc特征峰,血红素染色呈现阳性结果。结论:从酮古龙酸菌SCB329中分离得到一种cytc基因,并表达纯化了融合蛋白Cytc-His,纯化蛋白呈现Cytc特性,为研究酮古龙酸菌中产酸关键酶的电子传递机制奠定了基础。     

云芝和假丝酵母对煤的溶(降)解

过云芝和假丝酵母固体培养溶煤试验筛选了易于为它们溶解的煤样;测定了这两种菌在固体和液体培养条件下对扎赉诺尔及平庄硝酸氧化煤的溶煤率,一般可达60—80％;对煤溶物进行了元素分析、红外光谱和核磁共振分析。分析结果初步表明,生物溶解过程中煤的组成和结构发生了一定的变化。     

三种中药提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

分别用水、60%乙醇和95%乙醇为提取溶剂,对泽泻、青风藤和白芷进行提取,通过测定黄嘌呤氧化酶(XOD)-黄嘌呤反应体系终产物尿酸的吸光度,得出各提取物对XOD的抑制率,并判断其抑制机制。实验结果显示,在一定浓度范围内,泽泻和青风藤两种醇提物对XOD的抑制率较高,泽泻60%乙醇提取物抑制率最高达86%,青风藤95%乙醇提取物抑制率最高为71.2%,白芷水提取物对XOD抑制率较高,最高为72.7%。结果表明,三种中药的提取物均具有较强的体外抑制XOD活性的作用。     

胃癌根治术后合并淋巴漏43例临床分析

目的：回顾性分析根治性胃癌手术后合并腹腔淋巴漏的相关因素并就其临床经过及处理方法予以初探。方法-对我科室2009年1月至2010年7月间408例胃癌根治术后43例（10．5％）发生淋巴漏患者的临床资料进行回顾性分析。结果：单因素分析提示,T分期,N分期,TNM分期与淋巴漏发生相关。多因素分析提示与淋巴漏发生相关的独立因素有术式、淋巴结廓清程度、淋巴结清扫数目。淋巴漏的发生与性别、年龄、营养风险评估无关。使用超声刀、生物胶的病例淋巴漏发生率较低,但差异无统计学显著性意义。43例中38例经非手术治疗治愈,5例因非手术治疗无效行手术探查引流区结扎,其中4例术后痊愈,1例术后死亡。结论：腹腔淋巴漏是胃癌根治术后重要并发症之一,其发生与手术方式、淋巴结清扫程度及淋巴结清扫数目有关。多数淋巴漏通过肠外营养支持,生长抑素治疗后可自愈。保守治疗无效时手术治疗可能有益。     

共振喇曼光谱技术在恶性肿瘤诊断中的应用

目的:探讨共振喇曼光谱技术用于早期恶性肿瘤诊断的研究。方法:利用氩离子激光作为线偏振光的特点,采集偏振荧光光谱,对荧光光谱的偏振态进行分析。利用不同荧光物质的荧光可能具有不同偏振态的特点减少其它荧光物质的荧光对光谱分析的影响。血清样品产生的荧光也具有确定的偏振性。对所检测病人血清经激光分析仪进行喇曼光谱技术分析,光谱数据经计算机软件处理,自动显示图谱和数据,并直接给出各项指标及诊断提示。本结果与细胞病理学结果进行了对照研究。结果:恶性肿瘤样本176例,检测出阳性病例141例,阳性符合率为80.1%;良性肿瘤样本52例,4例阳性,假阳性率为7.7%;正常体检样本248例,检测结果均为阴性。结论:喇曼光谱技术适用于肿瘤初筛、普查及早期诊断,有推广应用前途。     

3个纤维颜色不同的棉花近等基因系主茎功能叶生理特性变化与产量因素的相关性分析

本研究选用3个纤维颜色不同的棉花近等基因系—绿色棉、棕色棉和白色棉为材料,研究参试材料的主茎功能叶片在整个生育期的生理特性变化,并对生理指标与产量因素进行相关性分析。结果表明:整个生育期2种彩色棉的净光合速率均低于白色棉;除吐絮期外,彩色棉总叶绿素含量、蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶活性均低于白色棉;净光合速率与单株铃数、单铃重及单株产量呈显著正相关;总叶绿素含量与单铃重、单株产量呈极显著正相关;蔗糖磷酸合成酶活性与单铃重呈极显著正相关,与单株产量呈显著正相关。本研究结果将为彩色棉高产品种选育提供理论依据。     

锁阳化学成分和药理作用研究进展及质量标志物（Q-Marker）的预测分析

锁阳是一种传统名贵的补益类中药，广泛分布于新疆、甘肃、内蒙古等地，具有补肾阳、益精血等功效。本文总结了从锁阳中分离的102种化学成分。基于锁阳化学成分和药理作用，结合质量标志物（Q-marker）的核心概念，从锁阳的化学成分与亲缘关系、传统功效、传统药性、临床疗效和化学可测成分方面，对锁阳质量标志物进行预测分析，筛选锁阳质量标志物，为锁阳质量控制和质量标准的建立提供一定的科学依据。