噬菌体gp17基因2种重组产物的抗菌效应比较

通过重组技术获得大肠埃希菌噬菌体内溶素纯化蛋白和表面展示噬菌体,并观察产物的生物效应。将肠侵袭性大肠埃希菌EIEC 8401噬菌体LSB-1内溶素基因gp17构建到质粒pET300中,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达,通过Ni柱纯化系统纯化产物;利用噬菌体展示技术构建T7-LSB-gp17重组噬菌体,通过双层琼脂法纯化噬菌体,并观察2种产物的抗菌效应。2 139 bp的gp17基因通过重组技术表达出78.3 ku的可溶性蛋白,纯化后浓度为2.38 mg/mL,其对EIEC8401有良好的抑菌活性,但对其他试验菌无抗性;通过噬菌体展示技术构建的重组噬菌体T7-LSB-gp17通过SDS-PAGE电泳显示在78 ku处有表达增强,对EIEC8401无感染、裂解作用,但对EIEC8401及其他试验菌有明显溶菌作用,宿主谱增加。通过重组技术获得的噬菌体LSB-1内溶素基因gp17的产物对LSB-1噬菌体原宿主具有明显的抑制效应。其中gp17表达的纯化蛋白具有明显的宿主专一性,重组噬菌体悬液有较宽种类的抗菌作用。这可能是因为gp17蛋白与噬菌体表面复杂空间结构的相互作用产生的生物效应。     

骨细胞微环境仿生模拟技术

骨细胞是生长于骨组织中的重要功能性细胞,承载着力学感知、骨重建平衡、机体矿物质代谢和内稳态调节等多种重要功能.骨陷窝-骨小管网络系统为骨细胞生长和功能发挥提供了稳定的结构微环境,骨基质的主要成分Ⅰ型胶原蛋白和羟基磷灰石是骨细胞黏附、细胞与细胞以及细胞与细胞外基质相互作用的生化微环境基础.而骨细胞多种生理功能的发挥离不开其对周围力学微环境变化的感知与响应.此外,骨细胞对周围环境非常敏感,微环境结构、生化组成和力学刺激的变化会对骨细胞结构和功能产生较大影响.因此,在微环境基础上研究骨细胞的结构和功能,是阐明骨细胞力学感知机制、发现骨细胞新的生物学功能的前提.然而,骨陷窝-骨小管网络系统复杂的结构和坚硬的质地,给在体研究带来了很大的困难.体外构建骨细胞仿生微环境成为骨细胞结构功能研究的必经之路.本文系统介绍了骨细胞的结构、生化和力学微环境,回顾了体外骨细胞微环境仿生模拟技术的最新进展,旨在为骨基础生物学、组织工程和再生医学的发展提供参考.     

采用三次样条拟合胎儿体格发育指标百分位数参考值

目的:生长发育评价标准的最佳形式是年龄别百分位数,然而,目前我国缺乏胎儿的孕周别体格发育指标百分位数评价标准,影响了胎儿宫内生长发育水平的准确评价,本研究拟建立陕西省正常单胎妊娠孕妇胎儿体格发育指标百分位数参考标准。方法:以陕西省西安、汉中、延安5所大型综合医院超声科或妇产科超声室为数据采集点,选择2010-01-01到2010-12-31间进行常规孕期检查的正常单胎妊娠胎儿的超声测量数据,随机抽取一次测量结果,共收集到6832个单胎正常妊娠胎儿的超声测量数据。采用三次样条法对陕西省孕16-41周正常单胎妊娠胎儿的双顶径、腹围、股骨长百分位数进行拟合。结果:三次样条拟合胎儿的双顶径、腹围、股骨长百分位数,各百分位数的决定系数均在0.95以上,均方差均在各指标重复测量的容许误差内,拟合结果满意。计算出了胎儿的孕周别双顶径、腹围、股骨长的P3、P10、P25、P50、P75、P90、P97百分位数。结论:三次样条兼顾了曲线拟合中的拟合优度和光滑度,能更好的实现曲线拟合的目的。所建立的孕周别胎儿体格发育指标百分位数符合胎儿宫内生长发育规律,为胎儿宫内生长发育的准确评价提供了科学、准确的评价工具,可用于产科临床和研究工作中。     

糖尿病合并肺结核患者诱导耐药性危险因素的回归分析

目的:研究2型糖尿病(Type 2 Diabetes,T2DM)合并肺结核(Tuberculosis,TB)患者诱导耐药性危险因素的回归分析。方法:从2012年3月到2013年3月,于我院共计有124例患者被确诊为肺结核,将其作为研究对象。根据患者是否合并有2型糖尿病,将其分成观察组(49例)及对照组(75例)。对全部患者进行耐药性实验,分别经单因素分析及Logistic回归性分析寻找诱导耐药性的危险因素。结果:观察组在治疗过程中断、有吸烟习惯、依从性差、病程≥1年、HbAlc值≥6.5%等方面所占比例显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。由多因素分析可知,治疗过程中断、有吸烟习惯、依从性差、病程≥1年、HbAlc值≥6.5%等均为糖尿病合并肺结核患者的危险因素。结论:T2DM合并TB患者诱导耐药性的危险因素较多,临床应重点关注,并采取相应措施,从而为临床治疗提供更为有利的条件。     

木姜子油细胞发育的超微结构研究

利用超薄切片法和透射电镜研究了木姜子（Litsea pungens Hemsl.）油细胞的发育过程。油细胞3层细胞壁的发育可分为4个阶段,阶段1：油细胞仅有初生纤维素壁层,又可分为原始细胞和细胞 泡化两个时期。此阶段质体具透明小泡和黑色嗜锇物质,并与液泡融合。阶段2：木栓质化壁层的形成,片层状木栓质不断叠加在初生纤维素壁内侧,其细胞结构与前期相似,阶段3：内纤维素壁层的形成,较厚而松散的内纤维素壁层叠加在木栓质化壁层的内侧,在内纤维素壁层中可见黑色嗜锇物质,胞间连丝成为被阻塞的特化结构,此时大液泡被嗜锇油脂充满,成为油囊。阶段4：油细胞成熟及细胞质解体,杯形构造由内纤维素壁层向细胞腔内突起形成,油囊由液泡膜包被连接到杯形构造上,油呈浅灰色嗜锇状态,其细胞质和细胞器解体,变得电子不透明或呈杂乱状态。     

虎杖根茎蒽醌类化合物细胞化学定位和含量测定(简报)

虎杖(Polygonum cuspidatum Sidb.et Zucc.)为蓼科多年生灌木状草本。其根茎入药。主要化学成分有蒽醌、萘醌、酚类和多糖化合物;其中蒽醌类化合物是虎杖的主要药用有效成分,包括大黄素、大黄酚,大黄素甲醚和大黄酸等。虎杖的蒽醌类化合物具显著的抗病毒、抗菌和消炎作用;并可保护心肌,防止血栓形成,改善微循环,提高细胞免疫力,也是致癌基因转导信号的抑制因子。关于虎杖蒽醌类化合物细胞化学研究尚未见报道。刘文哲等曾对贯叶连翘分泌结构中金丝桃素和大黄中蒽醌类同化合物进行了组织化学研究。本文对不同生长期虎杖的根茎以及同     

串珠镰孢霉硝酸盐还原途径酶的遗传研究

通过对菌株突变体有性杂交后代的检测方法,对串珠镰孢霉Fusarium moniliforme氮代谢过程中硝酸盐还原途径相关酶基因间关系进行研究。串珠镰孢霉含钼协同因子突变体缺陷型(nitB)与亚硝酸盐还原酶缺陷型突变体(nitC)间的杂交结果显示,在不同的交配群以及在相同交配群不同寄主上的分离菌株中,控制这两种酶的基因有两种类型,并据此提出细胞核基因和细胞质基因共同调控硝酸盐还原途径酶的假说。当杂交后代出现四种表型(nitD：nitB：nitC：wt=1：1：1：1)时,表明这两种酶的遗传受核基因调控,分离时两种基因自由组合：当杂交后代仅有两种表型时,表现为父本表型隐藏,双基因缺陷型(表型同主氮调节基因缺陷型nitD)表型不出现,即母本表现型：野生型为1：1,表明这种遗传类型除受核基因的控制外,还存在细胞质基因的影响。     

MUC1/Y特异表位肽在大肠杆菌中的可溶性表达及其抗体的制备

为获得MUC1/Y的特异表位肽,制备抗体,用PCR扩增其编码序列,克隆到pGEX-2T中,转化DH5α感受态,0.2mmol/L IPTG诱导表达,超声破碎或BPER-TMⅡ试剂处理诱导菌,亲和层析和阴离子交换纯化目的蛋白,SDSPAGE及Western blotting鉴定;免疫家兔制备多抗,初步用于免疫组化分析。结果表明,转化菌经诱导后表达融合蛋白GSTY30,约占菌体总蛋白的20%,大多以可溶形式存在,与诱导温度无关。免疫家兔获得多抗,效价为1∶320 000,纯化的抗体具有特异性,可识别肿瘤细胞表面的MUC1/Y蛋白。所得蛋白和抗体可用于MUC1/Y的表达特征及其生物学功能研究。     

家蚕产卵数的遗传及育种学研究 11。产卵数的配合力及育种学研究

本试验采用Griffing方法对家蚕产卵数的配合力进行了沾算,并分析了一般配合力、特殊f 力 在育种工作中所起的作用,同时从产卯数的选择方向、选择强度来研究选择效果的表现。结果,特殊配 合力效应大于一般配合力效应而起主要作用;选择方向对选择效果有显著的差异;选择强度的不同则遗 传进展、现实遗传力等效应也表现出明显的倾向性。     

两种柳珊瑚Anthogorgia caerulea和Menella kanisa的化学成分及其抗海洋污损生物附着活性研究北大核心CSCD

采用多种色谱分离技术,从北部湾的两种柳珊瑚Anthogorgia caerulea和Menella kanisa分离出7种次级代谢产物,运用MS、1H NMR和13C NMR等波谱方法并结合文献对照分别鉴定为N-(1-羟甲基-2-羟基)3,6-二烯-十七烷基-十六脂肪酸酰胺(1),邻苯二甲酸二丙酯(2),3-(2-苯乙基)苯酚(3),对甲氧基苯甲酸甲酯(4),邻苯二甲酸二己酯(5),梾木甙(6),次黄嘌呤核苷(7),其中化合物1为新化合物,其他化合物均首次从小月柳珊瑚(Menella kanisa)和花柳珊瑚(Anthogorgia caerulea)中分别分离得到。除化合物3,7外均显示出抗海洋污损生物藤壶幼虫附着能力,其中以化合物6的活性最好,化合物1的活性次之,其抗藤壶幼虫附着EC50分别为6. 89,8. 72μg/m L。