cTnT^R92Q转基因小鼠肥厚型心肌病模型的建立

目的建立cTnT^R92Q肥厚型心肌病的转基因小鼠模型。方法把cTnT^R92Q基因插入-αMHC启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立cTnT^R92Q转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定cTnT^R92Q转基因小鼠的基因表型,RT-PCR检测基因表达,光学显微镜和超声检测cTnT^R92Q转基因小鼠心脏的病理改变。结果建立了3个不同表达水平的cTnT^R92Q转基因小鼠品系。转入的cTnT^R92Q基因在心脏组织的表达水平高于内源性cTnT。组织学分析显示cTnT^R92Q转基因小鼠心脏变大,心室壁肥厚,心腔变小,心肌细胞排列紊乱,心肌间质纤维增多。超声检查显示心室壁变厚,收缩期容积和舒张期容积显著缩小,射血分数、短轴缩短率明显增加。结论cTnT^R92Q转基因小鼠心脏变大,室壁变厚,心腔变小,心肌细胞排列紊乱,间质纤维化以及心肌舒张功能失调,说明成功建立了cTnT^R92Q转基因小鼠肥厚型心肌病模型,为研究肥厚型心肌病发病机制和药物研发提供了有价值的动物模型。     

斑马鱼干扰素γ的克隆表达研究

目的：通过人工诱导斑马鱼干扰素的产生,证实两种斑马鱼干扰素γ基因ifng1-1和ifng1-2的存在,并克隆这两种干扰素基因,构建高效表达载体并做原核表达。方法：通过conA药浴,诱导斑马鱼干扰素γ的表达,即刻提取组织总RNA,并通过RT-PCR方法扩增两种干扰素γ基因。将目的基因连入表达载体pET24a,构建重组载体pET24a-ifng1-1和pET24a-ifng1-2。将载体转化BL21,并用IPTG诱导融合蛋白的表达。产物经SDS-PAGE检测,分析蛋白表达情况。结果：成功克隆了两种斑马鱼干扰素γ基因,构建了pET24a-ifng1-1和pET24a-ifng1-2重组载体,并实现了原核融合表达。结论：两种干扰素γ基因都能够被conA所诱生,且具有相似特性,表明两种干扰素γ都不是假基因,都有可能在免疫系统中发挥作用,本实验为进一步研究两种干扰素γ的功能奠定了基础。     

近三年鲍曼不动杆菌耐药性变迁及外排泵基因研究

目的研究鲍曼不动杆菌的耐药性变迁及外排泵基因携带情况,为控制医院感染提供依据。方法运用纸片扩散法检测我院2015-2017年临床分离的鲍曼不动杆菌对18种抗菌药物的耐药性,并对耐药性变化趋势进行分析。PCR技术检测多重耐药菌adeB、adeJ、adeE、abeM四种外排泵基因的携带情况。结果三年时间共分离出鲍曼不动杆菌385株,检出数量逐年升高,以呼吸科和重症医学科为主,分别占32.7%和28.3%。药敏结果显示鲍曼不动杆菌对多黏菌素B (0.0%)、替加环素(0.0%～1.6%)耐药率最低,其次为头孢哌酮舒巴坦(22.9%～32.0%)。三年来鲍曼不动杆菌对左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南耐药率有显著升高,超过20%,对庆大霉素、阿米卡星耐药率下降超过10%。172株多重耐药菌(44.7%)中,PCR扩增结果显示adeB和adeJ阳性率分别为76.7%和51.2%,并有5株(2.91%)检出adeE基因。结论近三年鲍曼不动杆菌耐药性呈上升趋势,外排泵是导致其耐药的机制之一。     

藏药香芸火绒草化学成分及抗菌活性研究

为对香芸火绒草(Leontopodium haplophylloides)的化学成分进行分离纯化及抗炎活性研究,本实验通过正、反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱,从香芸火绒草的中分离得到17个化合物,并运用现代波谱技术(1H NMR、13C NMR)分别鉴定为:咖啡酸(1)、咖啡酸-β-苯乙醇酯(2)、原儿茶酸(3)、tyrosol(4)、对羟基苯甲酸(5)、邻苯二甲酸二丁酯(6)、异莨菪亭(7)、7-(2,3-epoxy-3-methyl-3-butyloxy)-6-methoxycoumarin(8)、洋芹素(9)、牡荆素(10)、5-羟基-4',7-二甲氧基-6,8-二甲基黄酮(11)、5,7-二羟基-8-甲氧基黄酮(12)、百蕊草素Ⅲ(13)、methyl flavogallonate(14)、3,5,7,3',4'-pentahydroxyflavone (15)、木犀草素(16)、高良姜素(17),其中化合物1～16为首次从该植物中分离得到;经抗菌筛选发现发化合1、2、4～6、9、10、13～17对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及蜡状芽孢菌有抑制作用。     

抗-SLA/LP在自身免疫性肝炎的诊断、分型及病情评估中的应用价值

目的:探讨抗-SLA/LP在自身免疫性肝炎的诊断、分型及病情评估中的应用价值。方法:选择2014年1月～2018年1月在我院诊治的自身免疫性肝炎患者82例进行回顾性分析,所有患者经组织学检查、临床症状及生化指标等综合诊断为自身免疫性肝炎,抗-SLA/LP阳性16例、抗-SLA/LP阴性66例,AIH-Ⅰ型51例、AIH-Ⅱ型15例、AIH-Ⅲ型16例。分析和比较抗-SLA/LP阴性和阳性患者的一般临床资料,抗-SLA/LP诊断AIH-Ⅲ型的灵敏度,比较抗-SLA/LP不同强度患者的临床和免疫功能相关指标。结果:抗-SLA/LP阴性和阳性患者的年龄、病程、ANA和AMA检出率无显著性差异,但抗-SLA/LP阳性患者的SMA检出率为0.00%,与抗-SLA/LP阴性患者相比具有统计学差异(P0.05);抗-SLA/LP诊断AIH-Ⅲ型的灵敏度为100%,准确度为100%;抗-SLA/LP中高强度组患者的PTA和β2-微球蛋白水平均显著高于低强度阳性组(P0.05),两组患者的免疫指标比较均无显著性差异(P0.05)。结论:抗-SLA/LP对AIH-Ⅲ型患者的诊断具有高度的灵敏度和准确性,且抗-SLA/LP阳性强度可在一定程度上反映患者肝脏功能,对患者病情的评估具有一定的意义。     

南极磷虾油辅助降血脂预防作用与治疗作用的比较

目的研究比较南极磷虾油对实验性高血脂大鼠预防和治疗给药辅助降血脂作用效果。方法喂养高脂肪高胆固醇饲料建立SD大鼠高脂血症模型。预防组于造模前给予磷虾油14 d及造模期间继续给予磷虾油12 d。治疗组则于造模期间给予高脂肪胆固醇饲料和磷虾油12 d。造模结束后采血检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),病理学检查观察各组肝组织的病变。分析比较磷虾油对于高血脂大鼠辅助降血脂的预防和治疗的功效。结果南极磷虾油预防给药组大鼠的血清TC和LDL-C显著降低(P0.05),肝组织的脂肪变性程度较轻,但对血清TG、HDL-C的影响不明显(P0.05)。虾油治疗给药未见大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C明显下降(P0.05),辅助降血脂作用效果不明显。结论南极磷虾油辅助降血脂作用预防性给药效果明显,具有显著降低血脂TC的作用。     

菌蜕搭载的埃博霉素促进Caspase-3介导的HeLa细胞凋亡

[目的]初步探讨菌蜕搭载的埃博霉素抑制HeLa细胞增殖的机制。[方法]用半抑制浓度的游离或菌蜕搭载的埃博霉素B分别处理HeLa细胞4~48 h,应用凋亡检测试剂盒分析细胞凋亡情况,应用Caspase-3分析试剂盒检测Caspase-3的活性,并用透射电镜观察细胞的形态变化。[结果]菌蜕搭载的埃博霉素B能更快地诱导HeLa细胞发生时间依赖的凋亡和坏死,处理24 h时早期凋亡细胞及晚期凋亡和坏死细胞的比例分别达32.72%和18.36%,处理48 h时比例分别达23.14%和51.52%。该药物还能诱导更强的Caspase-3激活,处理24 h时其活性约为游离埃博霉素B的1.5倍。Caspase-3活性的升高程度与细胞的早期凋亡程度相平行。该药物处理的HeLa细胞显示典型的凋亡特征。[结论]菌蜕搭载的埃博霉素B能更有效地促进Caspase-3介导的HeLa细胞凋亡。     

古生物在下古生界烃源岩有机质成熟度研究中的重要作用

对江苏下古生界动物化石有机碎屑（笔石、胞石和虫牙）反射率进行系统研究的结果表明,它们与镜质组反射率有着极为相似的光性特征和变化规律,即随埋深的增加而增高,因而它们均可和为有机质成熟度指标;并进而以牙形刺色变指标（ＣＡＩ）为纽带,分别建立它们与镜质组反射率之间的良好对应关系,提出它们的成熟度划分标准,为它们的实际应用奠定基础。     

磷在羊草草地植物——土壤中积累、分布及转移规律

 本文在研究磷素几种形态的动态变化基础上,运用生态系统理论,利用系统分析的方法,分析了磷在植物—土壤系统中的流通、积累和归还的特点,得出如下结果：1．磷素在系统内99%以上分布在土壤中。2．群落内磷的再利用量为3.6755kg·ha-1·yr-1。3．群落每年吸收的磷为3.4063kg·ha-1·yr-1,地上部归还土壤为0.1447kg·ha-1·yr-1,地下部归还土壤为1.8111kg·ha-1·yr-1,输出仅占吸收量的42.24%,磷素在群落中每年净积累为0.35kg·ha-1·yr-1．4．磷在各库内的周转时间是：地上植物活体为1.3364年,立枯体为6.4350年,活根为1.0887年,死根为2.4378年,有机磷为833.3年。