延缓衰老有办法

尽管人类不可避免地会死亡,但是未来人类的衰老过程却有办法变慢,寿命也会明显延长。科学家们对人类衰老的生物、化学过程提出了新的解释,为延年益寿药物的问世敞开了大门。虽然他们的研究方法不是完全相同,但有一个共同的认识:人类的寿命并不是固定不变的。     

内生真菌Preussia sp.液体发酵生产抗肿瘤活性产物Spiropreussione A 的研究

螺光黑壳菌酮A(Spiropreussione A,SP-A)是编号为AS-5的光黑壳属内生真菌Preussia sp.的代谢产物。体外实验表明SP-A对人卵巢癌细胞A2780和人肝癌细胞BEL-7404的半数抑制浓度(IC50)分别为2.4和3.0μmol/L。以SP-A的含量为主要指标,结合AS-5的生物量,通过单因素实验和正交实验,优化确定了适合SP-A积累的AS-5液体发酵培养基和培养条件。研究结果表明:AS-5发酵生产SP-A的最优培养基为葡萄糖2%,麦麸3%,磷酸二氢钾0.3%,硫酸镁0.15%,pH7.0;该菌株最佳摇瓶发酵条件为250mL摇瓶装125mL培养基,接种6片直径9mm的PDA菌片,培养温度25℃,发酵周期16d。在此条件下发酵,SP-A的含量可以达到(25.02±1.02)mg/瓶,比优化前的含量[(17.08±3.24)mg/瓶]提高了46.5%。     

植物树脂半薄切片染色方法的改进

以双子叶植物棉花的幼根、幼茎、叶、胚珠和单子叶植物玉米茎为实验材料,制作树脂半薄切片,对样品染色方法等进行了改进,将蕃红-固绿染色、苏木精-伊红染色、氯化铁-苏木精染色方法系统应用于植物树脂半薄切片制备中,获得了结构完整、染色清晰的棉花各器官和玉米茎半薄切片,建立了一套适合于植物树脂半薄切片制作的染色方法。     

芸香苷对家蚕谷胱甘肽-S-转移酶部分基因的诱导表达

谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferases, GSTs) 是对一种机体的解毒代谢起重要作用并可以被诱导的酶系。为了从分子水平上探究家蚕Bombyx mori GSTs 基因与植物次生物质芸香苷代谢的关系, 本实验采用双跟踪标定定量PCR (dual-spike-in qPCR)方法, 用 5×10^-1, 5×10^-2, 5×10^-3 ng/μL 3 个浓度芸香苷溶液处理家蚕5龄幼虫, 并对各组织中 GSTs Epsilon 家族不同基因的转录水平进行检测。结果显示, 浓度为 5×10^-2 ng/μL 的芸香苷溶液能诱导GSTs 基因的转录水平发生显著变化。在中肠中, BmGSTe1, BmGSTe2 和 BmGSTe6的诱导转录水平较高, 在诱导后24 h达到最大值; 在脂肪体中BmGSTe1, BmGSTe6和BmGSTe7的转录水平相对较高且分别在诱导后 2 h, 2 h和4 h 达到最大值; 而GSTs基因在马氏管中表达量均很低或者检测不到表达。与 5×10^-2 ng/μL 浓度相比, 5×10^-1 ng/μL 的芸香苷溶液诱导后各基因的转录水平上升的幅度较小并且达到峰值的时间不同, 而 5×10^-3 ng/μL 浓度的芸香苷溶液并不能使GSTs基因的诱导转录水平发生变化。结果提示, 家蚕 GSTs Epsilon 家族基因对芸香苷的代谢具有重要作用。     

湖北省爬行类新记录——棕黑腹链蛇

笔者于2006年7月在湖北省广水市大贵寺林场进行动物资源考察时,采集到一批蛇类标本,经鉴定其中4条为棕黑腹链蛇Amphiesma sauteri,为湖北省爬行类新纪录.棕黑腹链蛇在分类上隶属爬行纲、有鳞目、蛇亚目、游蛇科、腹链蛇属.标本保存于华中师范大学动物学研究室.     

黑曲霉阿魏酸酯酶基因密码子优化及在毕赤酵母中的高效表达

【目的】对黑曲霉(Aspergillus niger)阿魏酸酯酶基因进行克隆和密码子优化,使其在毕赤酵母(Pichia pastoris X-33)中高效表达。【方法】以黑曲霉基因组为模板,经重叠延伸PCR扩增得到阿魏酸酯酶基因(Anfae A),并对Anfae A基因进行毕赤酵母密码子偏好性"随机优化"和"一对一优化",全基因合成后分别与表达载体pPICZαA连接,构建表达载体pPICZαA-Anfae A、pPICZαA-op Anfae A I和pPICZαA-op Anfae A II。经Sac I线性化后电转化至P.pastoris X-33中,筛选阳性转化子。摇瓶发酵4.5 d后,测定并比较重组阿魏酸酯酶(re Anfae A)酶活。【结果】密码子优化前阿魏酸酯酶酶活为6.8±0.1 U/m L,基因"一对一优化"和"随机优化"后的重组酶酶活分别为5.2±0.1 U/m L和39.9±0.1 U/m L,"随机优化"后酶活比优化前提高了近6倍,而"一对一优化"后酶活仅为优化前酶活的76.5%。重组阿魏酸酯酶的最适p H为5.5,且在pH 4.5-7.0稳定性较好;最适反应温度50°C,在45-50°C较稳定。【结论】阿魏酸酯酶基因经密码子"随机优化"后进行重组表达,酶活显著提高,对研究阿魏酸酯酶在毕赤酵母及其它宿主中的高效表达具有一定的借鉴意义,也为大规模工业化应用奠定了基础。     

磁共振三维稳态进动快速成像序列诊断脑积水的临床价值

摘要 目的：分析磁共振三维稳态进动快速成像(3D-FIESTA)序列诊断脑积水的临床价值。方法：选择我院2015年3月~2016年3月收治的手术病理确诊的120例脑积水患者,术前均行磁共振常规序列及3D-FIESYA序列扫描,比较其检查结果。结果：磁共振常规序列提示有23例交通性脑积水,有73例梗阻性脑积水,其中有24例中脑导水管完全梗阻,有20例中脑导水管狭窄,有16例四脑室流出道梗阻,有13例桥前池囊肿阻塞双侧室间孔,有24例未检出。3D-FIESTA序列提示有34例交通性脑积水,有83例梗阻性脑积水,其中有34例中脑导水管完全梗阻,有19例中脑导水管狭窄,有18例四脑室流出道梗阻,有12例桥前池囊肿阻塞双侧室间孔,有3例未检出。3D-FIESTA序列对脑积水的检出率高于磁共振常规序列,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：3D-FIESTA序列能够客观反映脑脊液循环通路的状态,利于脑积水类型的鉴别,为临床治疗提供更全面、确切的影像学参考。     

野桑蚕GST-Omega1基因在草地贪夜蛾Sf9细胞中的表达

谷胱甘肽 S-转移酶（glutathione S-transferases,GSTs）是昆虫的重要解毒酶之一。为了研究野桑蚕Bombyx mandarina中谷胱甘肽S-转移酶在真核表达系统中的表达情况。本研究通过RT-PCR从野桑蚕中肠中获得GST-Omega1基因的cDNA序列,该基因的开放读码框为771 bp,编码256 个氨基酸。对推导的氨基酸序列用NCBI的蛋白质Conserved Domains工具进行在线分析,结果显示GST-Omega1的氨基酸序列中具有Cys38和8个GSH结合位点的Omega类基因保守序列。对所获得的基因克隆进表达载体pFastBacHT b中获得pFast-GST-Omega1,将其转化DH10Bac感受态细胞,获得Bac-GST-Omega1重组病毒DNA,用脂质体法转染草地贪夜蛾Sf9细胞,获得重组病毒。对表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析,能检测到一条分子量约为33 kD的特异性条带,与推导的融合蛋白大小相符,该目的蛋白的表达量占总蛋白的14.4%。目的蛋白经His·Bind树脂纯化,用Lineweaver Burk作图法测定其K_m和V_max,结果显示其K_m为2.81 µmol/L,V_max为2.70 µmol/(mg·min）。     

肺腺癌转移相关的免疫特征开发及潜在中药预测

本研究旨在确定具有免疫相关基因的可靠预后特征,该特征可以预测预后并对肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)患者的个体化管理提供帮助。从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库下载LUAD患者的mRNA表达谱和相应的临床数据;使用单因素COX和LASSO模型来构建预后模型;使用基于风险评分的方法开发预后特征;通过Kaplan-Meier分析比较高风险患者和低风险患者之间的总生存期(overall survival, OS), OS的独立预测因子通过单变量和多变量COX分析确定;单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis, ssGSEA)用于评估免疫细胞浸润程度;通过LASSO和COX回归分析构建生存预后特征。根据预后特征,在OS方面将患者显著分层为高风险组和低风险组,与低风险组相比,高风险组的LUAD患者OS显著降低。通过ROC曲线分析证实了预后基因标记的预测能力。多因素COX分析显示,风险评分是OS的独立预测因子。通过免疫分析,发现了肺腺癌转移组与未转移组的不...     

单核细胞增生李斯特菌PrfA蛋白转录调控毒力基因表达的分子机制

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes LM)属于典型的细胞内寄生革兰氏阳性菌,是WHO公布的四大食源性致病菌之一.LM不仅是人畜共患传染病李斯特菌病(listeriosis)的主要病原菌,也是研究胞内感染和细胞介导的免疫应答的模式细菌.绝大多数LM毒力基因的转录表达受到PrfA蛋白的调控.本文简单介绍了LM侵染宿主细胞必需的毒力基因及其产物;重点对毒力基因调节蛋白PrfA的结构和功能,PrfA调节毒力基因表达的主要方式最新进展进行了综述和讨论.