用DREAM技术纠正人工合成基因中的突变

目的：介绍一种简便、有效的定点突变技术。方法：根据突变位点附近的DNA序列推导出氨基酸序列,再以此氨基酸序列进行逆翻译,这样在不改变氨基酸序列的前提下可以得到数目巨大的隐性突变体（silent mutants）,这些突变体中包含大量的限制性内切酶位点,选择合适的酶切位点设计引物用PCR技术扩增两侧DNA片段,然后以相应酶切融合这两个片段即可完成定点突变。结果：用该方法成功地在人工合成的含有缺失的可溶性组织因子基因的472位插入C,T两个碱基,校正了阅读框架,获得了预期的目的基因。结论：该方法简便、有效, 避免了多轮PCR和合成长引物导致突变的可能性,这种改进的PCR 定点诱变技术我们称之为“设计限制酶辅助突变”（Designed Restriction Enzyme Assisted Mutagenesis, DREAM）。此技术简单方便, 诱变的成功率高, 适于实验室常规应用。     

七氟醚复合瑞芬太尼静吸麻醉对急性胆囊炎腹腔镜手术患者麻醉效果、血流动力学及炎性因子的影响

摘要 目的：探讨七氟醚复合瑞芬太尼静吸麻醉对急性胆囊炎腹腔镜手术患者麻醉效果、血流动力学及炎性因子的影响。方法：选取2018年1月到2019年12月期间我院收治的120例急性胆囊炎腹腔镜手术患者,根据信封抽签法分为对照组60例（丙泊酚复合瑞芬太尼）和观察组60例（七氟醚复合瑞芬太尼）,对比两组麻醉效果、血流动力学、炎性因子及不良反应。结果：观察组术毕（T5）时间点心率（HR）、平均动脉压（MAP）与麻醉前（T1）比较未见显著性差异（P>0.05）,观察组插管后1 min（T2）~T5时间点HR、MAP高于对照组（P<0.05）。两组术后1 d、术后3 d 肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白水平（CRP）、白介素-6（IL-6）均高于术前,观察组术后1 d、术后3 d CRP、IL-6、TNF-α低于对照组（P<0.05）。观察组自主呼吸恢复时间、定向力恢复时间、睁眼时间、言语应答时间均短于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间比较无显著性差异（P>0.05）。结论：急性胆囊炎腹腔镜手术患者采用七氟醚复合瑞芬太尼静吸麻醉,麻醉效果较好,可平稳患者血流动力学,减轻炎症应激且安全性较好。     

腹腔镜与经腹子宫肌瘤剔除术对有生育要求子宫肌瘤患者妊娠结局的影响及术后妊娠率的影响因素分析

摘要 目的：研究腹腔镜与经腹子宫肌瘤剔除术对有生育要求子宫肌瘤患者妊娠结局的影响及术后妊娠率的影响因素。方法：选取我院2018年4月至2021年4月收治的80例有生育要求的子宫肌瘤患者,其中接受经腹子宫肌瘤剔除术治疗的40例归为经腹组,接受腹腔镜子宫肌瘤剔除术治疗的40例归为腹腔镜组。比较两组手术疗效指标,术后并发症发生率以及术后妊娠率。此外,80例患者根据出院后1年是否妊娠分为妊娠组和未妊娠组,以多因素Logistic回归分析术后妊娠率的影响因素。结果：在术后失血量、肛门恢复排气时间以及住院时间方面比较,腹腔镜组均优于经腹组（P＜0.05）。腹腔镜组术后并发症发生率低于经腹组（P＜0.05）,两组术后妊娠率对比无统计学差异（P＞0.05）。单因素分析结果显示：年龄、肌瘤数目和子宫肌瘤剔除术患者术后是否妊娠有关（P＜0.05）,而孕次、肌瘤类型、肌瘤最大直径以及穿透宫腔与否和子宫肌瘤剔除术患者术后是否妊娠无关（P＞0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：年龄≥35岁以及肌瘤多发是子宫肌瘤剔除术患者术后未妊娠的危险因素（P＜0.05）。结论：腹腔镜与经腹子宫肌瘤剔除术对有生育要求子宫肌瘤患者妊娠结局的影响程度相当,但腹腔镜术式有助于患者术后康复,同时降低并发症发生风险。此外,年龄较大和肌瘤数目较多会使子宫肌瘤剔除术患者术后妊娠难度增加。     

腹腔镜下子宫血管阻断术联合子宫肌瘤剜除术治疗子宫肌瘤的回顾性研究

摘要 目的：回顾性分析子宫肌瘤剜除术联合腹腔镜下子宫血管阻断术治疗子宫肌瘤的临床疗效。方法：分析2017年6月~2019年7月期间我院收治的子宫肌瘤患者的临床资料（n=150）。根据手术方法的不同将患者分为A组（腹腔镜下子宫肌瘤剜除术治疗,73例）和B组（腹腔镜下子宫血管阻断术联合子宫肌瘤剜除术治疗,77例）,对比两组术中、内分泌激素、术后恢复指标、妊娠情况、并发症发生率及复发率。结果：两组患者手术时间对比无统计学差异（P>0.05）,B组的术中出血量少于A组,术后排气时间、住院天数、下床活动时间短于A组（P<0.05）。A组术前、术后3个月、术后6个月黄体生成素(LH) 、卵泡刺激素(FSH) 、雌二醇(E₂) 水平组内对比无统计学差异（P>0.05）。B组术前、术后3个月、术后6个月E₂水平呈降低后升高趋势,LH、FSH水平呈升高后降低趋势（P<0.05）。B组术后3个月LH、FSH水平高于A组,E2水平低于A组（P<0.05）。与A组相比,B组的并发症发生率明显下降,组间对比有差异（P<0.05）。B组的妊娠率高于A组,子宫肌瘤复发率低于A组（P<0.05）。两组流产率组间对比无统计学差异（P>0.05）。结论：与单纯子宫肌瘤剜除术相比,结合腹腔镜下子宫血管阻断术治疗子宫肌瘤患者可减少术中出血量,促进患者术后恢复,降低并发症发生率及复发率,虽然其对卵巢功能有轻微、短暂性影响,但可逐步恢复,且有利于提高妊娠率。     

树鼩原代小胶质细胞的分离培养、纯化与鉴定

本文旨在建立树鼩(Tupaia belangeri)小胶质细胞原代培养及纯化的方法,为利用新型实验动物树鼩进行相关研究工作提供实验材料。将新生树鼩大脑皮质机械分离,皮质组织块用胰蛋白酶消化后制成细胞悬液;培养9～10 d后,分别采用直立手拍法、温和胰酶消化法以及恒温振荡法分离纯化树鼩小胶质细胞,通过差速贴壁进一步纯化。荧光显微镜下,利用小胶质细胞的特异性标记物CD11b抗体进行鉴定。结果显示,小胶质细胞分离培养第3天时呈静息状态,表现为梭形、杆状、分支状等不规则形态。细胞免疫荧光CD11b呈阳性。不同纯化方法细胞免疫荧光并计数显示,直立手拍法所获得的细胞产量明显高于恒温振荡法(P 0.05),细胞阳性率( 96%)明显高于温和胰酶消化法( 90%,P 0.05)。直立手拍法可获得产量及纯度高的树鼩原代小胶质细胞。     

Application of proteomics in the study of tumor metastasis

Tumor metastasis is the dominant cause of death in cancer patients. However, the molecular and cellular mechanisms underlying tumor metastasis are still elusive.The identification of protein molecules with their expressions correlated to the metastatic process would help to understand the metastatic mechanisms and thus facilitate the development of strategies for the therapeutic interventions and clinical management of cancer. Proteomics is a systematic research approach aiming to provide the global characterization of protein expression and function under given conditions. Proteomic technology has been widely used in biomarker discovery and pathogenetic studies including tumor metastasis. This article provides a brief review of the application of proteomics in identifying molecular factors in tumor metastasis process. The combination of proteomics with other experimental approaches in biochemistry, cell biology, molecular genetics and chemistry, together with the development of new technologies and improvements in existing methodologies will continue to extend its application in studying cancer metastasis.     

汉、回、蒙古族拇指类型、环食指长、扣手、交叉臂及惯用手的研究

作者于1996年在内蒙古调查了汉、回、蒙古族5项人类遗传学经典指标(拇指类型、环食指长、扣手、交叉臂、惯用手)。研究结果显示:(1)3个民族间拇指类型、扣手出现率存在显著性差异,交叉臂、惯用手出现率则无显著性差异,环食指长出现率蒙-汉、蒙-回间存在显著性差异;(2)拇指类型、扣手、惯用手出现率无性别间差异,环食指长出现率男女间存在显著性差异;(3)惯用手与扣手、惯用手与交叉臂间存在明显的相互关系,交叉臂与扣手之间则无关;(4)与国外人群比较,3个民族环指长出现率高,交叉臂R型出现率较高,扣手R型出现率较低,惯用手L型出现率高于印度的一些群体。 Abstract:Authors in vestigated 5 general indexes of anthrotogical genetics including pollical type,palmar digital formula,hand clasping,arm folding and handedness in Han,Hui and Mongol nationalities in 1996.The results showed as follows:(1)There were significant differences in the frequency of pollical type and hand clasping in 3 nationalities,but those of arm folding and handedness showed nosignificant difference and the frequencies of palmar digital formula between the Mongol and the Hui revealed significant difference.(2)There were no significant sexual difference in the frequency of pollical type,hand clasping and handedness while the long type (R) of ring finger revealed significant sexual difference.(3)There were obvious correlations between handedness and hand clasping,handedness and arm folding but no relation between arm folding and hand clasping.(4)In comparison with foreign ethnic groups,the 3 nationalities showed higher frequencies of long type (R) of ring finger and right-arm folding but the frequence right-hand clasping revealed slightly lower.The findings showed higher frequence of Left-Handedness than that of Indian population.     

脑室镜和腹腔镜辅助脑室腹腔分流术治疗老年脑积水的疗效

目的:探讨脑室镜和腹腔镜辅助脑室腹腔分流术治疗老年脑积水的疗效。方法:选择我院90例老年脑积水患者,按随机数字表法平均分为A、B、C 3组各30例,A组患者给予传统脑室腹腔分流术治疗,B组患者给予腹腔镜辅助下脑室腹腔分流术治疗,C组患者给予脑室镜和腹腔镜综合辅助下脑室腹腔分流术治疗,比较3组患者治疗有效率及术后并发症发生率。结果:C组患者治疗有效率为90.0%,明显高于A组63.3%及B组76.7%,比较差异具有统计学意义(均P0.05);C组患者术后感染及分流管堵塞并发症发生率明显低于A组和B组,比较差异均有统计学意义(均P0.05);B组和C组脑实质内出血发生率均低于A组,与A组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:脑室镜和腹腔镜综合辅助下脑室腹腔分流术治疗老年脑积水的疗效显著,术后并发症少,值得推广。     

腹腔镜监控肠镜下（LMCP）息肉摘除术对比常规肠镜下息肉切除的随机对照临床研究

目的:探讨腹腔镜监控下的肠息肉摘除术(LMCP)治疗效果,比较LMCP肠息肉摘除术对比常规肠镜下息肉切除的临床治疗效果及预后情况。方法:将符合条件的所有手术患者随机分为两组,每组各41例,其中试验组使用腹腔镜监控下结肠镜息肉摘除术,对照组单纯使用肠镜行息肉切除术。所有病人均观察并记录其预后情况。结果:研究共纳入82例病人,男53例,女29例,平均年龄70岁。息肉平均大小为2.0 cm。所有患者术后无并发症。试验组和对照组的第一次通便时间分别为13.2 h和24.5h,统计学具有显著性差异P<0.001,风险比为1.81,95%置信区间为[1.13-3.00]。试验组和对照组的总住院天数分别为4.5天和8.0天,统计学具有显著性差异P<0.001,风险比为4.15,置信区间95%CI为[2.40-7.18]。结论:LMCP术对病人具有显著的获益,可以避免不必要的并发症,手术操作更安全。因此,LMCP是一种安全有效的方法,并且创伤更小,住院周期更短,是息肉切除术首选的方法。     

早期胃癌的治疗现状与进展

胃癌是常见的消化道肿瘤之一,是我国死亡率最高的恶性肿瘤之一。与日本韩国等发达国家相比,我国胃癌患者多数在就诊时已处于进展期,早期胃癌所占比例不足10%。传统的开腹胃癌手术仍是治疗早期胃癌的主要手段。相较于传统开腹手术,腹腔镜手术对于早期胃癌的治疗优势是显而易见的。早期胃癌患者行腹腔镜手术,具有术后恢复快,生活质量好,近期疗效佳等优势。内镜黏膜下剥离术(ESD,endoscopic submucosal dissection)是近年来出现的一项新的治疗早期胃癌的手段。本文就传统开腹手术、腹腔镜手术及ESD分别在早期胃癌治疗中的应用进行了综述。微创手术治疗早期胃癌将逐渐代替开腹手术,成为早期胃癌治疗的主要手段。