农杆菌介导的棉花枯萎病菌转化体系的优化

【背景】海岛棉相对陆地棉更易感枯萎病,一旦发生很难根治,使得枯萎病逐渐成为威胁新疆海岛棉产业发展的主要病害,但其致病机理目前还不是十分明确。【目的】揭示棉花枯萎病菌的遗传变异和致病机理,同时获得带有绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)标记的棉花枯萎病菌转化子用于观察其侵染海岛棉的途径。【方法】采用农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation,ATMT)方法,对棉花枯萎病菌7号生理小种st89进行了遗传转化并对转化条件进行优化。【结果】农杆菌介导的遗传转化法转化棉花枯萎病菌的最佳条件为:150 mg/L的潮霉素浓度能完全抑制棉花枯萎病菌的生长,浓度为200 mg/L的头孢噻肟钠能完全抑制农杆菌LBA4404生长,农杆菌起始浓度OD_(600)为0.2,农杆菌预培养时间为8 h,棉花枯萎病菌分生孢子浓度为10~5个/mL,枯萎病菌孢子悬液和农杆菌LBA4404比例为1:1,乙酰丁香酮浓度为200μmol/mL,共培养时间为4 d,转化后培养温度25℃。利用优化的转化系统将GFP基因转入到棉花枯萎病菌中,转化效率最高可以达到252±7.37个转化子/10~5个孢子。PCR扩增以及荧光观察表明GFP基因能够正常表达。【结论】转GFP基因的枯萎病菌的获得为深入研究棉花枯萎病入侵的机理奠定了基础。     

五子参药汤治疗COPD稳定期肺脾两虚、痰浊内蕴证的临床观察

目的:本文旨在推广高才达主任医师治疗慢性阻塞性肺病稳定期的临床经验,以及观察五子参药汤治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期属肺脾两虚、痰浊内蕴症的临床疗效。方法:随机选取我院慢性阻塞性肺疾病(稳定期)患者90例分为对照组(n=45)和治疗组(n=45),对照组吸入沙美特罗替卡松粉气雾剂进行治疗,治疗组在对照组基础上加服五子参药汤,两组疗程均为12 w。对比两组治疗前后临床症状、肺功能、慢阻肺患者自我评估测试(CAT量表)、改良版英国医学研究委员会呼吸问卷(m MRC)量表及治疗后6个月内因COPD急性加重的再次住院次数。结果:治疗组的有效率优于对照组(91.11%vs 82.45%,P<0.05);治疗后,两组第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1占预计值百分比(FEV1%)和FEV1/FVC较治疗前均有增加,且治疗组高于对照组(P<0.05);两组m MRC量表、CAT量表评分较治疗前均有下降,且治疗组低于对照组(P<0.05)。结论:五子参药汤可有效治疗肺脾两虚、痰浊内蕴型稳定期慢性阻塞性肺疾病,值得临床推广。     

具有自噬抑制作用的卟啉金属有机框架的制备及其光动力癌症治疗的研究*

光动力疗法(PDT)具有微创、可控、低毒、可重复治疗等优点,已成为临床医学中不可缺少的治疗手段。但由于肿瘤细胞的自我保护机制,大大降低了PDT疗效。使用PDT治疗方法的同时实施药理自噬抑制策略,切断因光动力治疗下严重氧化损伤下的保护性自噬。通过油浴加热法合成卟啉金属有机框架PCN-224,并在PCN-224上负载自噬抑制剂硫酸羟氯喹(HCQ),通过扫描电子显微镜(SEM)、粒径测试(DLS)、紫外可见光谱测试等方法检测,结果表明成功地合成了该材料,增强了卟啉光敏剂的水溶性,并且光照后对4T1小鼠乳腺癌细胞毒性明显增强,且装载了HCQ后进一步提高了肿瘤杀伤能力。     

入侵植物加拿大一枝黄花与乡土植物芦苇的相互化感作用

以加拿大一枝黄花和芦苇的共优群落和各自单优群落的种子为化感受体,分析其分别在加拿大一枝黄花和芦苇5个浓度梯度(12.5、25、50、100和200mg·mL-1)浸提液处理下的发芽率和芽长差异,研究2种植物的相互化感作用规律.结果表明:2种植物在共优群落中的千粒重和蒸馏水培养下的发芽率均比单优群落大.加拿大一枝黄花的浸提液对自身种子发芽率在单优和共优群落中均具有在低浓度下(12.5、25 mg·mL-1)轻微促进、中高浓度下(50、100和200mg·mL-1)强烈抑制的作用,其中对共优群落种子的抑制作用尤为显著;而芦苇浸提液对加拿大一枝黄花种子的影响无明显规律.加拿大一枝黄花的种子芽长在单优和共优群落中均随自身浸提液浓度的升高趋于减小,随芦苇浸提液浓度的升高呈波动减小趋势.在芦苇和加拿大一枝黄花浸提液处理下,芦苇种子发芽率在单优群落中均显著大于共优群落(P＜0.05),但2种浸提液处理间无显著差异.     

结核病免疫机制及疫苗研究进展

结核病是一种棘手的重大传染病.虽然存在一些有一定疗效的治疗药物,亦有预防性疫苗--卡介苗(BCG);但结核病仍在世界范围流行,且发病率和病死率居高不下.结核病的免疫病理机制及疫苗研究近年来取得了一定的进展.结核分枝杆菌通过Toll样受体(TLR)等模式识别受体,激活巨噬细胞的天然免疫反应,清除细菌和调节获得性免疫反应....     

酵母产γ- 氨基丁酸发酵条件的研究

目的:研究酵母产γ-氨基丁酸的发酵条件,提高其产γ-氨基丁酸的能力。方法:以高产γ-氨基丁酸的酵母突变株为材料,通过单因素实验研究培养温度、摇床转速、接种量、种龄和培养时间等条件对菌株发酵生产γ-氨基丁酸的影响。结果:最适发酵条件为:培养温度30℃,摇床转速220 rpm,接种量4%,种龄为2d的种子菌,培养时间4d。在此发酵条件下,变异菌发酵液中γ-氨基丁酸含量高达2.588 g.L-1,较优化前提高了53%。结论:发酵条件的优化,提高了菌株产γ-氨基丁酸的能力。     

新冠肺炎疫情下农村家庭食物消费研究 ——基于山东省C村的个案调查

2020年年初,新冠肺炎来袭,随即在全国呈蔓延态势。农村作为疫情重点防控地区,其采取的“硬核”防控措施,对农村家庭食物消费产生了一定影响。文章通过对山东省C村的个案调查,借助风险感知理论,采用问卷调查和描述性统计的方法,对疫情防控背景下农村家庭食物消费情况展开研究。结果表明：（1）疫情防控下,C村家庭多采取以微信跟单等为主的线上消费方式;（2）食物消费方式主要有微信跟单、超市采购、电商平台下单、家人或亲戚帮忙采购以及部分食物自产自销,且多数家庭采取两种及以上的消费方式;（3）大多数家庭三大类食物（粮油类、动物性食物类和水果蔬菜类）消费和食物消费开支较2019年同期基本保持不变,但动物性食物类消费增加和减少的比例均为最高,家庭食物消费开支增加和减少的比例也处于较高水平。据此结论,提出相关政策建议,以保障和稳定农村家庭食物消费。     

孑遗落叶阔叶树种微地形空间分异格局及共存机制研究概述

漫长历史时期的气候条件对生物多样性的现代分布格局产生了深远影响,分析以孑遗植物为优势种群落的分布格局、种群更新类型与适应策略,可揭示气候变化下孑遗植物的残存机制.本文以孑遗植物的群落生态学研究为视角,在综述孑遗落叶阔叶树种的定义、分布与生境特征、种间关系、种群更新与群落维持、植物性状与生境响应的基础上,提出在区域孑遗植物多样性研究中,应从微地形-植被关系入手,应用微地形单元的分类体系与手法,以微地形单元上斑块状植物群落为对象,分析其生境特征、种群结构、群落动态以及植物性状,揭示微地形梯度孑遗植物群落的分异格局,阐明区域内多种孑遗落叶阔叶树种的共存机制;结合植物群落谱系结构分析,进一步阐明孑遗植物群落的残存机制,有助于丰富我国亚热带山地植物多样性研究及保护生态学理论.     

胞外三磷酸腺苷通过一氧化氮调节镉诱导的氧化压力和细胞死亡

采用液体悬浮培养方法,研究胞外三磷酸腺苷(ATP)通过一氧化碳(NO)调节镉诱导对烟草(Nicotiana tabacum L.)悬浮细胞氧化压力和死亡水平的影响。结果显示,镉离子(Cd^2+)可以以剂量依赖的模式引起烟草悬浮细胞氧化压力和死亡水平的上升,而施加外源ATP可有效缓解Cd^2+诱导的氧化压力和细胞死亡。进一步研究发现,和外源ATP的缓解作用相似,NO的供体硝普钠(SNP)同样可以缓解Cd^2+诱导的氧化压力和细胞死亡水平的上升;且NO合成抑制剂(L-NAME)可部分解除外源ATP的缓解作用。研究结果表明外源ATP可通过NO调节镉诱导的氧化压力和细胞死亡。     

胞外三磷酸腺苷对铅胁迫下植物细胞损伤和过氧化氢及其清除酶水平的调节

细胞外三磷酸腺苷（extracellular adenosine-5'-triphosphate）是植物细胞的重要信号分子。以烟草悬浮细胞BY-2（Nicotiana tabacum L.cv.Bright Yellow-2）为材料,探讨了胞外三磷酸腺苷对铅胁迫下细胞损伤、H₂O₂（过氧化氢）含量及H₂O₂清除酶活性的影响。结果显示,随着Pb（NO₃）₂浓度的不断提高（30~400 μmol·L^-1）,细胞外三磷酸腺苷含量呈现出逐渐下降的趋势,但胞内三磷酸腺苷含量及细胞的受损伤程度逐渐增大;同时,H₂O₂含量和过氧化氢酶的活性均有所上升,并在200 μmol·L^-1 Pb（NO₃）₂处理下达到最大值,而过氧化物酶的活性则不断降低。较之Pb（NO₃）₂胁迫下的细胞,对Pb（NO₃）₂胁迫的细胞加入外源三磷酸腺苷使得细胞受损伤程度显著降低,H₂O₂含量减少,过氧化氢酶活性减弱,而过氧化物酶活性增强。实验结果表明,Pb（NO₃）₂胁迫诱导的植物细胞损伤和H₂O₂及其清除酶水平的变化能受到细胞外三磷酸腺苷水平的调节。