大鼠催乳素基因真核细胞可表达性质粒的构建及应用研究

７３５ｂｐ的ＰＲＬｃＤＮＡ片段从质粒ＰＲＬ－ＳＰ６５＃１中回收后,用粘性末端连接法将其重组到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３上,筛选出正向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ和反向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＡＳ。将重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬｓ和空载体ｐｃＤＮＡ３分别转入ＮＩＨ３Ｔ３细胞系,用Ｇ４１８筛选出阳性细胞后与未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２的情况下,用原位杂交的方法,分别用ＰＲＬｃＤＮＡ探针和原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓｃＤＮＡ探针进行检测,未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２时都几乎无催乳素基因的表达,同样,转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞也无ＰＲＬ的表达,而转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ的ＮＩＨ３Ｔ３细胞则有大量的ＰＲＬ基因的表达,与对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。正常和转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞有一定程度的原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓ的表达,当分别加入Ｅ２和转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ后,ＮＩＨ３Ｔ３细胞中的ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因表达水平都显著升高（Ｐ＜０．０５）。     

稻瘿蚊灾变原因及综合治理技术

80年代中后期以来,我省稻瘿蚊年度成灾频率高,发生危害重。造成大发生主要原因是耕作制度改变、气候条件适台、咀及栽培管理、天敌因素影响等。近几年通过组织实施以农业生态防治为基础,加上科学用药等综合治理措施,取得了良好防治效果。     

超声监测胎儿生长发育

目的：给出各孕周胎儿各生理参数的正常值（平均值、百分位数值）,以便临床参考应用。方法：单人测量,前瞻性研究,符合对象共８０１例,超声检查共１７６９次。结果：胎儿各参数均呈正态分布,得出胎儿各生理参数的平均值、标准差、百分数数值。结论：超声监测胎儿生长发育,采用多参数是必要的。     

假单胞菌产脂肪酶条件的初步探索

对假单胞菌（Pseudomonassp）2106菌株产脂肪酶条件的初步探索表明,该菌株脂肪酶为组成型,不受油脂类底物的诱导。碳源的种类（单糖、双糖、多糖）和浓度对产酶影响不大,氮源以豆饼粉和玉米浆混合添加最好。最适发酵温度为32℃,摇瓶转速140r／min。实验中还通过正交试验优化了产酶培养基组成。     

广西西北部拉丁期菊石群

描述产于２西北部中三叠统上部兰木组的菊石化石８属１１种,其中包括１新种。通过与欧洲、北美相应时期菊石序列的讨论和对比,建立该区中三叠世拉丁期晚期的两个菊石层－Ｐｒｏｔｒａｃｈｙｃｅｒａｓ－Ｊｏａｎｎｉｔｅｓ层和Ｆｒａｎｋｉｔｅｓ层。     

大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA)的克隆和表达

利用插入失活及营养缺陷型互补法将大肠杆菌K12 13kb的glyA基因克隆到质粒pBR329中。将重组质粒酶切,亚克隆,确定2.6kb PstI-EcoRI亚克隆片段带有完整的glyA基因。共获得12株glyA基因重组菌,对重组质粒进行了酶切鉴定。不同重组菌丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)活性及其酶表达量均不相同。受体菌未检测到丝氨酸的产生。重组菌株JM109(pSM13)、K12(pSM13)、K12(pSM14)和K12(pSM15)SHMT酶表达量分别占全菌可溶性蛋白的15.7％、15.4％、11.8％和9.48％。     

抗破伤风类毒素单抗可变区基因的克隆及在大肠杆菌中表达的三种工程抗体

The heavy and light chain variable region genes of anti-tetanus toxoid (TT) antibody and the heavy chain Fd genes were amplified and cloned through RT-PCR from mouse hybridoma cells. The sequences of VH and VK were determined. Fd gene fragments were expressed in E. coli. The ELISA results indicated that the expressed Fd showed antigen binding activity but was nonspecific. Furthermore, through SOE and PCR techniques, the VH and VK gene fragments together with ScFv linker were assembled into single chain antibody (ScFv) gene fragment. While together with human heavy chain CH 1 gene fragment and Fab linker, they were assembled into chimeric Fab gene fragment. The two assembled gene fragments were separately inserted into phagemid pHEN 1, which was a fd-based vector containing gene 3 encoding the minor coat protein. In presence of helper phage M 13-VCS the anti-TT phage-ScFv or phage-Fab were displayed on the surface of phage particles respectively. Results from phage-ELISA indicated that both phage antibodies were TT-specific.     

抗原受体与伴随分子

免疫细胞中的抗原受体分子直接影响着细胞的免疫应答过程。抗原受体在内质网中的正确折叠、组装过程是细胞合成有正常功能的抗原受体分子的关键步骤之一。研究表明抗原受体分子在内质网中的折叠、组装以及转运均与内质网中的伴随分子(Molecular Chaperones,或称伴侣分子)有关。因此,阐明内质网中抗原受体与伴随分子的相互作用过程对了解免疫细胞中的抗原受体分子的成熟以及抗原递呈有着重要的意义。     

棒状类细菌电击转化中多种条件对转化效率的影响

以质粒PXZl0145电击转化不同棒状类细菌菌株,研究了影响电击转化效率的诸个因素,在含4%甘氨酸的培养基中生长至对数前期的菌体最适用于电击转化,当以同源DNA进行电击转化时,1．μgDNA中转化效率最高可达到8×1O⁶转化子,但用异源DNA时,转化效率要比前者低10²～10³倍。     

黄淮海地区夏玉米田一年生杂草的生态经济防治阈期研究

 本文通过北京和唐山多年多点田间试验,研究了黄淮海地区夏玉米田苗后放任和免除自生一年生杂草生长的相对时间与夏玉米相对产量的函数关系,并据此导出了该区夏玉米田一年生杂草的生态经济防治阈期计算模型。结果发现,该区夏玉米田一年生杂草的生态经济防治阈期约处在夏玉米苗后总生育期的(天)第11.2—50.9%之间。该区夏玉米生长季节中只要此期田间保持无草,便可望以最小的代价和费用,最大限度地使杂草弃害扬利,从而获得较高的生态经济除草效益。