全文获取类型
收费全文 | 3686篇 |
免费 | 130篇 |
国内免费 | 1580篇 |
出版年
2024年 | 5篇 |
2023年 | 28篇 |
2022年 | 47篇 |
2021年 | 52篇 |
2020年 | 68篇 |
2019年 | 85篇 |
2018年 | 63篇 |
2017年 | 78篇 |
2016年 | 96篇 |
2015年 | 100篇 |
2014年 | 163篇 |
2013年 | 138篇 |
2012年 | 229篇 |
2011年 | 258篇 |
2010年 | 262篇 |
2009年 | 254篇 |
2008年 | 392篇 |
2007年 | 251篇 |
2006年 | 249篇 |
2005年 | 262篇 |
2004年 | 343篇 |
2003年 | 315篇 |
2002年 | 288篇 |
2001年 | 217篇 |
2000年 | 173篇 |
1999年 | 183篇 |
1998年 | 119篇 |
1997年 | 104篇 |
1996年 | 78篇 |
1995年 | 81篇 |
1994年 | 53篇 |
1993年 | 49篇 |
1992年 | 56篇 |
1991年 | 58篇 |
1990年 | 42篇 |
1989年 | 44篇 |
1988年 | 16篇 |
1987年 | 15篇 |
1986年 | 8篇 |
1985年 | 42篇 |
1984年 | 13篇 |
1983年 | 9篇 |
1982年 | 4篇 |
1981年 | 5篇 |
1963年 | 1篇 |
排序方式: 共有5396条查询结果,搜索用时 15 毫秒
61.
分离和鉴定人类遗传病的致病基因是人类基因组计划的一个重要目标,由于克隆基因工作的复杂性和艰巨性,迄今为止只克隆到26种遗传病的致病基因。本文分类综述了克隆基因的几种策略,并对它们的优点和局限性进行了讨论。 相似文献
62.
63.
马铃薯卷叶病毒基因间隔区的克隆及序列分析 总被引:6,自引:0,他引:6
根据已报道的马铃薯卷叶病毒基因组序列.设计合成一对特异性引物,以马铃薯卷叶病毒中国分离株(PLRV-Ch)的RNA为模板,反转录合成cDNA第一条链,经PCR扩增后克隆于pUC19质粒中,进一步用PCR鉴定、限制酶切分析和序列分析,结果表明:PLRV-Ch基因间隔区由197个核苷酸组成,与国外报道的荷兰PLRV-N加拿大PLRV-C,澳大利亚PLRV-A,苏格兰PLRV-S各株系核苷酸序列具有很高的同源性,同源率依次为99%、98%、93%、98%。 相似文献
64.
65.
66.
采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从广东省一例慢性丙型肝炎病人血清中获得丙型肝炎病毒(HCV)5'端非编码区(5'NCR)302bp的cDNA片段,经补齐和提纯后插入pUC19质粒,获得的重组体pUN进行序列测定。将pUN的目的基因亚克隆进体外转录载体pSPORTI多克隆位点的EooRI和PstI切点之间,所得重组体pSN线性化后由T_7RNA多聚酶及SP6RNA多聚酶引导体外转录反应,产物经凝胶电泳及特异引物RT-PCR,证实SP6引导的是正义RNA,T7合成的是反义RNA,其大小分别力429bp和362bp。并证实所得RNA力HCV5'NCRcDNA转录而来。获得的HCV5'NCRcDNA和RNA在常规逆转录和PCR步骤中用于设立有效的模板对照,对消除假用性及评估试剂有重要意义。同时,HCV5'NCR体外转录载体的构建可用于制各RNA探针和反义RNA,改进后还可作为定量PCR的竞争性模板。 相似文献
67.
本文综述了近年来对链霉菌酪氨酸酶基因的研究。由酪氨酸酶合成黑色素是链霉菌属各个种的共同特性,并受到酪氨酸酶基因的控制。链霉菌几个种的酪氨酸酶基因已克隆到,其产黑色素的特性使之作为重要的标记基因得以广泛应用,同时,该基因在链霉菌的不同种及不同属的微生物中得到了高水平的表达。链霉菌酪氨酸酶基因表达调控的分子机制也得到较深入的研究。 相似文献
68.
利用RT-PCR技术分离低密度脂蛋白受体基因cDNA,将长为2605bp的cDNA插入质粒pJN6,并经全序列测定证实,该序列与已报道序列相比,存在两个变异碱基,即第754位C→T,和1654位的G→A,这两个变异碱基并不改变编码的氨基酸,利用LDL受体基因cDNA中的ClaⅠ片段作为探针,检测到LDL受体基因上外显子8的StuⅠ位点是个限制性片段长度多态性位点。所克隆的cDNA含有可译框架的全部密码,因此可作为基因表达材料。 相似文献
69.
食管癌病人运铁蛋白(Tf)和组特异性成份(Gc)亚型分布的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
刘鸿禧 张奎芳 林珏龙 张少英 陆振虞 冯波 陈仁彪LIU Hong-Xi ZHANG Kui-Fang LIN Jue-Ling ZHANG Shao-Ying LU Zhen-Yu FENG Bo CHEN Ren-Biao 《遗传》1995,17(3):9-12
应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法, 分析了潮汕地区216例无血缘关系、临床上诊断为食管癌的病人和216例健康人的运铁蛋白(Tf)亚型分布情况, 结果发现:食管癌病人组TfC1C1纯合子频率为0.2639,Tf*Cl基因频率为0.4745,显著低于正常人组(分别为0.4352和0.6227,均为P<0.0 01);同时,食管癌病人组TfC2C2纯合子频率为0.2278,Tf*C2基因频率为0. 4977,显著高于正常对照组(分别为0.1852,P<0.05,和0.3634,P<0.001)。应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫固定法,分析了潮汕地区21 7例无血缘关系的临床上诊断为食管癌病人和 217例健康人的组特异性成份(Gc)亚型的分布,发现两组间无显著性差异。 相似文献
70.
用PCR方法扩增人微小纤溶酶原(Microplasmingen,mPlg)基因,再与表达载体重组.构造mPlg原核表达质粒并转化大肠杆菌。阳性克隆pSSE-mPlg经温度诱导表达,SDS-PAGE等方法证明表达产物的分子量约为29kDa。占全菌总蛋白的24%左右,并在菌内形成包涵体。经半胱氨酸再氧化法和空气氧化法复性。表达产物r-mPlg经SK作用后显示纤溶活性。同时对蛋白质浓度、复性时间等因素对复性的影响进行了初步探讨。 相似文献