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61.
62.
地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA变位酶和消旋酶的纯化及性质 总被引:1,自引:1,他引:0
采用原生质体裂解方法确定甲基丙二酰CoA变位酶(MCM)和消旋酶(MCR)均是胞浆内酶。各经过四步纯化得到电泳纯酶。纯化MCM酶的比活力为12.84u/mg,纯化倍数为528,酶活回收为60%,纯化的MCM酶服从典型的米氏底物饱和曲线,对琥珀酰CoA和辅酶B_(12)的K_m值分别为9.723#mol/L和0.1277#mol/L。经SephadexG-150测定MCM分子量约为134.000±2000,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两条分子量分别为67000和65000的蛋白带,说明该酶由两个大小不等亚基组成。吸收光谱测定每摩尔纯化全酶含两摩尔辅酶B_(12)。纯化MCR酶比活力为2.305u/mg,纯化倍数96,酶活回收46.7%。MCR酶由两个分子量均为17500的亚基组成。MCR酶活性能被二价金属离子Cu2+、Co2+、Mg2+、Mn2+和Fe2+所促进。两酶的酶学性质和其他生物来源的MCM、MCR酶明显相似。 相似文献
63.
复合诱变原生质体选育耐热碱性蛋白酶高产菌 总被引:14,自引:0,他引:14
以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)53号为原始菌株,在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,对原生质体进行复合诱变,对大量再生突变株进行筛选,最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌53-G38-6,产酶活力由1104U/ml提高到22080U/ml。适宜的发酵条件:培养基(%)胰蛋白胨1,酵母膏0.5,玉米粉5,Na_2HP0_4·12H_20 0.4,KH_2P0_4 0.03,Na_2CO_3 0.1,自然pH。42℃旋转培养44~48h,得到的蛋白酶热稳定性强,60℃处理1h剩余酶活55%。酶反应最适条件:62℃,pH10.0,在pH9~10.5范围内稳定。 相似文献
64.
自养黄杆菌合成羟基丁酸和羟基戊酸共聚体的发酵研究 总被引:14,自引:2,他引:12
采用本实验室从土壤中分离到的一株自养黄杆菌进行了羟基丁酸和羟基戊酸共聚体〔P(HB-co-HV)〕的发酵试验。实验结果表明,该菌株是自养黄杆菌葡萄糖运输突变株,可以葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乙酸盐、乳酸盐和苹果酸盐作为唯一碳源,尤以葡萄糖和果糖效果最佳。硫酸铵、氯化铵和蛋白胨等不同氮源不影响其生长,却影响细胞中P(HB-co-HV)的含量和P(HB-co-HV)中HV/HB的比例。应用两阶段控制方式,经42h的补料分批发酵,细胞浓度达34.9g·L~(-1),P(HB-co-HV)浓度达25.28g·L~(-1)。细胞和P(HB-co-HV)生产速率系数分别为0.83g·L~(-1)”·h~(-1)和0.61g·L~(-1)·h~(-1)。以基质为基准的细胞得率系数(Yx/s)、产物得率系数(Yp/s)和以干细胞为基准的产物得率系数(Yp/x)分别为0.283(g/g)、0.174(g/g)和0.73(g/g)。改变培养基中碳氮源组分可将P(HB-co-HV)中HB的含量调节在24%~78%之间。 相似文献
65.
66.
产肠毒素大肠杆菌(ETEC)肠毒素LT与ST融合是ETEC多价疫苗候选株研制的一项重要工作,LT与ST的化学偶联研究已证明融合后可使小分子的ST获得免疫原性成为完全抗原,而基因融合对构建多价疫苗则是更重要的手段。本文着重介绍了近年来对LT与ST基因融合的研究,特别是一些影响基因融合效果因素的基础性研究。这些都为候选株的研制提供了研究手段和依据,并对广泛的基因融合研究具有理论意义。 相似文献
67.
对951个样品分离鉴定,有747个样品含芽孢杆菌,有菌率为78.55%.共分离得到芽孢杆菌1138株,其中苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,简称B.t)143株,占12.5%;球形芽孢杆菌(Bacillussphaericus,简称B.s)11株,占0.97%;其他芽孢杆菌984株,占86.40%.从芽孢杆菌中选出产生晶体、苏云金素或磷酸酯酶C(PhosphalipaseC,简称PLC)的毒素菌株168株,其中B.t占143株,B.s有5株,其他芽孢杆菌10株.在产毒素菌株中,经测定有120株菌对供试昆虫毒性达标.占77.92%.不同菌株的杀虫毒素、杀虫范围和毒力各异,认为这种差异取决于毒素和虫种两方面的特异性. 相似文献
68.
以芽孢杆菌(Bacillus)为材料,用冷冻真空干燥法和砂管法,在4℃条件下进行了六年的菌种保藏对比试验.结果表明,冷冻真空干燥法比砂管法保藏的菌种存活率高,存活率下降速率小;建立了菌种保藏过程中菌种相对存活率随时间变化规律的数学模型L′_f(t)=e~(-0.1323t)和L′s(t)=e~(-0.2900t).该模型的模拟结果能与试验结果较好地吻合.在室温条件下,砂管法的菌种存活率下降速率比4℃条件下大,三个月时存活率为零或接近零;而冷冻真空干燥法保藏菌种存活率与4℃的效果接近.因此冷冻真空干燥法是芽孢杆菌的比较有效的保藏方法. 相似文献
69.
耐碱性巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)9-A2经紫外线、甲基磺酸乙酯和硫酸二乙酯等多次诱变处理,获得一株产碱性α-淀粉酶能力较高的变异株L-49。L-49菌株比出发株的产酶能力提高近2.5倍,当以酵母膏为氮源,可溶性淀粉为碳源,初始pH9 ̄10,种龄18h,接种量5%(V/V),30℃培养48h,酶活力可达730μ/ml。 相似文献
70.
用生物素化重组质粒探针检测产蛋下降综合症病毒核酸 总被引:7,自引:0,他引:7
用EDS-76标准毒株感染鸭胚后,提取病毒核酸,经PstI酶切后,与质粒pT7/T3α-19重组,并转化到大肠杆菌DH5α中,筛选出一个插入片段为318bp的重组质粒,并命名为pTEZP3。用生物素标记该重组质粒后,分别对正常鸭胚尿囊液、各地分离的EDS毒株和禽类易感的几种病毒进行核酸杂交试验,结果该探针对实验中收到的几种EDS分离毒均产生阳性反应,而不与正常鸭胚尿囊液和其它几种禽类病毒交;该探针 相似文献