厚藤cDNA文库的构建和重金属镉耐受相关基因的筛选

厚藤（Ipomoea pes-caprae（L.） Sweet）是一种具有重要生态、观赏及药用价值的沙滩植物,对重金属镉（Cd）具有一定的富集能力,可作为Cd污染滨海地区的修复植物进行引种栽植和利用。本研究通过Gateway技术构建厚藤的cDNA文库,将该文库质粒转化酵母对Cd敏感的突变株ycf1△,采用全长cDNA过表达基因捕获系统（FOX）筛选厚藤重金属Cd胁迫耐受相关基因,并采用酵母互补实验进行基因的功能验证。本研究获得了2个能够恢复ycf1△对Cd敏感表型的重组质粒,经测序分析,该重组质粒包含的cDNA全长序列分别对应厚藤植物螯合肽合成酶基因（phytochelatin synthase）和金属硫蛋白基因（metallothionein）,分别将其命名为IpPCS和IpMT,通过功能分析,初步认定该基因为编码Cd耐受和解毒相关蛋白的候选基因。     

农产品SPS特别贸易关注分析与应对建议

利用世界贸易组织信息系统数据,在对1995—2016年卫生与植物卫生相关的特别贸易关注分析的基础上,重点研究了与中国农产品贸易相关的特别贸易关注及其特点,就推动中国农产品卫生与植物卫生贸易关注解决提出建议。     

Cry3a杀虫蛋白基因的合成优化及在JK-SH007中高效表达

人工合成优化Cry3a杀虫蛋白基因,并从大肠杆菌BL21(DE3)中克隆T7表达系统,通过同源重组克隆进PHKT2表达载体,将此表达载体导入吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007,通过诱导表达,成功指导合成T7 RNA聚合酶且高效表达分子量为70k Da的Cry3a蛋白。通过粗提液对二龄榆蓝叶甲进行生物毒杀试验,结果表明粗提液具有高毒性,致死中浓度(LC_(50)=0.63(0.48-0.82)g/L)。成功构建的T7表达系统,可高效表达毒性的Cry3Aa蛋白,为进一步开发杀虫生防菌剂,建立外源基因表达技术平台奠定了基础。     

川芎嗪注射液对冠心病心绞痛患者血脂相关指标的影响及其临床疗效分析

目的:探讨川芎嗪注射液治疗冠心病心绞痛的临床疗效。方法:选择2014年5月-2016年5月在我院接受治疗的冠心病心绞痛患者79例,根据治疗方法不同分为对照组(37例)和研究组(42例)。对照组患者给予常规治疗,研究组患者在对照组基础上给予川芎嗪注射液治疗。观察并比较两组患者的临床疗效。结果:治疗前,两组患者总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后,两组患者总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均显著降低,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,研究组患者总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,两组患者高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。研究组患者治疗总有效率(92.86%)高于对照组(81.08%),差异具有统计学意义(P0.05)。结论:川芎嗪注射液治疗冠心病心绞痛的临床疗效显著,能够降低血脂相关指标水平,改善临床症状,值得临床推广应用。     

Proseal与Slipa喉罩在腹腔镜胆囊切除术中的麻醉效果比较

目的:比较proseal与slipa喉罩在腹腔镜胆囊切除术中的麻醉效果。方法:收集我院收治的68例胆囊行腹腔镜胆囊切除术患者,随机分为A组和B组,每组各34例,A组患者应用slipa喉罩,B组患者应用proseal喉罩进行麻醉。观察并比较两组患者各时间点血压、心率水平,患者麻醉时间、苏醒时间、喉罩插入时间与拔除时间以及患者的不良反应发生率。结果:与喉罩置入前相比,两组患者手术中收缩压(SBP)以及舒张压(DBP)水平均下降,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者各时间点的血压以、心率、麻醉时间及苏醒时间比较差异均无统计学意义(P0.05)。与B组相比,A组患者的喉罩插入时间较长,喉罩沾血的发生率较高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:Pro seal与Slipa喉罩在腹腔镜胆囊切除术中的麻醉效果相当,但Slipa喉罩的插入时间以及喉罩沾血的发生率更高。     

芦芽山寒温性针叶林冠层下植被beta多样性格局及其成因

群落构建机制是生态学的中心议题之一。对山地植被beta多样性格局及其成因的探究有助于加深对此问题的认识。以芦芽山寒温性针叶林群落冠层下植被为研究对象,结合野外调查与室内实验获取的详细数据,运用Mantel检验、普通最小二乘回归和典范对应分析(CCA)等统计方法,探讨了林下植被的beta多样性格局及其成因,结果显示:(1)沿海拔梯度相邻群落间草本层物种周转率呈现递减格局,而灌木层变化规律不明显;(2)灌、草层beta多样性与海拔差异、地理距离呈显著正相关关系,而与局地环境异质性关系不显著。控制海拔作用后发现,灌、草层beta多样性与地理距离关系依然显著,而当消除地理距离的线性影响后,beta多样性与海拔关系也变得不显著(3)CCA模型中,环境因子共解释了物种组成变异的74.4%,其中,海拔、坡度、凋落物厚度、乔木密度与总干面积对林下灌、草植被物种组成具有显著影响,但土壤因子的作用未见显著。综上,生境筛滤与扩散限制共同主导了芦芽山寒温性针叶林冠层下群落构建过程,但扩散限制的影响强于生境筛滤作用。     

黑木相思优良无性系叶片数量性状与生长评价

为合理利用种质资源,对5年生黑木相思(Acacia melanoxylon)无性系试验林中9个优良无性系(F1、SR3、SR9、SR14、SR17、SR18、SR25、SR38、SR41)开展叶片和生长性状的遗传变异研究,采用模糊数学隶属函数值法进行综合评价。结果表明,9个无性系叶片在形态、结构、化学性状都存在显著差异,以形态性状变异系数最大,其中叶面积(LA)和叶宽(LW)可作为直观区别无性系的可靠指标。SR18、SR17和SR14号无性系的树高(H)和胸径(DBH)生长具有显著优势。相关性分析表明,LW与H,LW、LA、比叶面积(SLA)与DBH呈显著线性关系,而叶长(LL)、干物质量(LDMC)、C、N、P、C/N和N/P与H和DBH相关性弱。隶属函数综合评价排名前4位的是SR17、SR18、SR41、SR14,可作为直接生产和后续育种工作的有效资源加以应用。     

广西都安地区5 种森林类型土壤机械组成及其肥力比较

研究珠江流域中上游广西都安地区5 种典型森林类型土壤基本理化性质, 为进一步探讨该区域森林生态系统物质循环、森林植被规划提供基础数据。通过分析不同森林类型之间土壤理化性质, 结果表明: 珠江流域都安地区5 种森林类型土壤机械组成砂粒变幅在3.63%-23.15%; 粘粒变幅在11.62%-56.61%; 细粉粒变幅在30.07%-54.34%; 粗粉粒变幅在1.84%-10.90%。不同森林类型土壤有机碳、全氮、全磷含量随着土层深度的增加而逐渐降低。对各森林类型土壤A 层(0-15 cm)减去D 层(45-60 cm)化学性质的比较, 各森林类型土壤有机碳积累大小顺序为马尾松×荷木混交林>青冈栎林>马尾松林>任豆林>桉树林; 土壤全N 积累大小顺序为马尾松×荷木混交林>青冈栎林>任豆林>马尾松林>桉树林。综合来看, 在都安地区不同森林类型对土壤保育功能提高上, 5 种森林类型影响大小顺序为马尾松×荷木混交林>青冈栎林>任豆林>马尾松林>桉树林。     

鸡miR-19a、miR-19b通过靶向抑制LIN9促进前脂肪细胞增殖

miR-17-92基因簇编码包括miR-19a、miR-19b在内的至少6个miRNA,在鸡细胞的增殖、分化、凋亡及发育等多种生物学过程中发挥重要作用,但其作用机制尚不清楚。生物信息学分析显示,细胞周期调控子LIN9是 miR-17-92 基因簇成员miR-19a和miR-19b的潜在靶点。为验证这一预测,构建含野生型LIN9 3′-UTR荧光素酶报告基因载体（psi-CHECK2-LIN9-3′-UTR-WT）及突变型报告基因载体（psi-CHECK2-LIN9-3′-UTR-MUT）,开展靶标LIN9的鉴定。复合转染结合报告基因酶活性测定结果表明,过表达miR-19a和miR-19b能显著抑制含野生型LIN9 3′-UTR的报告基因表达,而过表达miR-19a和miR-19b抑制剂显著提高野生型LIN9 3′-UTR报告基因的表达。实时定量PCR（RT-qPCR）证明,miR-19a和miR-19b 抑制剂对内源性LIN9 mRNA的表达没有影响,提示miR-19a和miR-19b可能不是通过降解mRNA调控LIN9表达。转染结合CCK-8细胞增殖分析显示,在鸡前脂肪细胞过表达LIN9 明显抑制细胞增殖。与此相一致的是,细胞增殖标志分子CyclinD1、c-Myc、PCNA、Ki67 的mRNA表达量明显降低。本研究证实,LIN9是miR-17-92 基因簇成员miR-19a和miR-19b的靶标,同时证实,LIN9抑制鸡前脂肪细胞的增殖。是否miR-17-92基因簇编码的其它mi-RNA成员也以LIN9为靶标尚不得而知,我室正在研究中。     

水稻Qb-SNARE蛋白OsNPSN11多克隆抗体制备、鉴定与应用

在真核生物细胞囊泡运输过程中的膜融合主要是由SNARE蛋白介导的, OsNPSN11是从水稻中克隆的Qb-SNARE家族基因, 文章将OsNPSN11构建到原核表达载体pET-30a中与6个His标签融合, 重组质粒pET-OsNPSN11转化BL21(DE3)0.5 mmol/L IPTG诱导4 h后获得了高效表达。用镍离子亲和树脂(Ni²⁺-NTA His Bind Resin) 纯化融合蛋白, 以纯化后的蛋白为抗原免疫新西兰家兔制备多克隆抗体, Western blotting结果显示, 该抗体能特异识别在原核系统表达的抗原, 以及水稻不同组织质膜组分中的OsNPSN11, 可用于转基因水稻中目标蛋白的表达分析。