Ad-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑癌效应的体内外实验

本研究旨在分析腺病毒携带的IL-24基因在体内外对人骨肉瘤细胞生长抑制效应及其分子机制。将Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法、流式细胞技术和Hoechst染色法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;半定量RT-PCR法检测IL-24基因的表达对MG-63细胞中的bcl-2、bax、caspase-3相关基因表达的影响。用Ad-IL-24重组腺病毒在MG-63骨肉瘤荷瘤裸鼠的瘤体内进行注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重。并通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等与细胞凋亡相关因子的表达。结果表明Ad-IL-24重组腺病毒感染MG-63细胞后,能明显抑制MG-63细胞增殖,并能通过上调细胞中bax、caspase-3和下调bcl-2基因表达,诱导细胞凋亡,呈现出典型细胞凋亡形态学变化。Ad-IL-24重组腺病毒瘤内注射MG-63裸鼠荷瘤骨肉瘤移植瘤后,能显著抑制肿瘤生长,瘤重的抑制率可达52%,免疫组化结果显示Ad-IL-24重组腺病毒能明显上调与细胞...     

温度和光照对朱砂叶螨实验种群的综合效应

长短光照对朱砂叶螨(蜱螨目:叶螨科)的影响有着显著差异。在接近滞育温度(15℃)的20℃时,短光照明显加速叶螨发育,提高种群内禀增长率r_m值;在适温以上则延缓叶螨发育,r_m值相应降低。种群生殖的最适温度长光熙时是25℃,短光照时是30℃。长光照35℃时发育速率最大,r_m(0.3425)最高,种群加倍所需日数最短(1.91天)。各项种群生命参数与温度间的数学关系可分为4类:(1)逻辑斯谛关系:发育时间、5％死亡时间和世代平均时间的倒数值,产卵率(粒/天/♀);(2)直线关系:雌螨寿命,产卵期,r_m和周限增长率(λ);(3)抛物线关系:产卵量(粒/♀),净生殖率(R_0);(4)双曲线关系:种群加倍所需日数。     

人白介素24重组蛋白的表达及其抗肿瘤机理的研究

将人白细胞介素24（hIL-24）的cDNA序列克隆至原核高效表达载体pET-21a（+）上,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中获高效表达,经纯化、复性后的rhIL-24蛋白具有抑制HeLa细胞生长,诱导HeLa细胞凋亡,刺激外周血单核细胞分泌IL6、TNF-α、IFN-r,抑制血管形成的功能。初探了rhIL-24蛋白能通过下调抗凋亡因子bcl-2表达,激活线粒体凋亡途径引起肿瘤细胞凋亡的机理。     

抗生素耐药性的多重风险因子及针对性管控策略

抗生素耐药性已经对人类社会造成了重大影响,需要采取切实有效的管控措施,本文将针对耐药性研究领域的新视角,回顾了亟需重视的抗生素耐药性多重风险因素,包括非致病菌、食源和肠道菌群、粪便菌群、废水处理、用药途径和生物膜等,强调了口服抗生素的危害。通过总结针对性的耐药和疾病防控策略,为有效应对抗生素耐药性危机提供新思路。     

手足口病与肠道病毒71型

2008年3～4月,安徽阜阳暴发了急性传染病手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的疫情.截至5月5日,发病达4496例,已有20个儿童被夺去生命.此外,北京、浙江、广东等省市,以及越南、蒙古等周边国家也先后发现手足口病患者.4月23日,经确诊此次手足口病的元凶是人类肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71).     

一种新的乙酰高丝氨酸内酯水解酶基因的克隆和表达

目的 获得新的降解革兰阴性细菌数量阈值感应信号分子乙酰高丝氨酸内酯类化合物(AHL)的水解酶基因。方法 选择性富集和培养土壤中耐热细菌,抽取细菌总DNA作为模板,特异性聚合酶链反应扩增乙酰高丝氨酸内酯水解酶基因,进行克隆和DNA序列分析及原核表达。结果 得到1个新的AHL水解酶基因,该基因与已知基因的核苷酸序列和对应的氨基酸序列同源性最高分别为87％和94％。该基因在原核表达系统中表达,得到了与预期相对分子质鲢(Mr)一致的蛋白质。结论 证实乙酰高丝氨酸内酯水解酶广泛存在于环境微生物中。为进一步研究提供条件。     

核衣壳蛋白VP39融合TAT转导肽对杆状病毒转导哺乳动物细胞的影响

为了提高昆虫杆状病毒在哺乳动物细胞中转导基因的效率,构建了重组杆状病毒AcRed-tat和AcRed。两者都能在哺乳动物细胞内表达红色荧光蛋白作为报告基因。同时,AcRed-tat带有HIV-1Tat转导肽、病毒主要衣壳蛋白基因vp39及增强型绿色荧光蛋白(egfp)三者的融合基因,并由杆状病毒多角体启动子表达,能够在昆虫细胞中表达该Tat融合蛋白,并掺入子代病毒粒子。而AcRed作为相应的对照病毒,带有多角体启动子表达vp39和egfp的融合基因。2株病毒分别转导哺乳动物细胞后,利用流式细胞仪检测报告基因的表达水平,发现在CHO和Vero细胞中AcRed-Tat介导的报告基因表达水平明显高于AcRed,而在HEK293细胞中2株病毒介导的报告基因表达水平差异不显著。结果表明Tat转导肽可以提高杆状病毒对一部分哺乳动物细胞的转导效率,为改进杆状病毒-哺乳动物细胞转导载体提供了新的思路。     

棉铃虫单粒包埋核型侈角体病毒在细胞系中持续感染的建立和特性

棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ ｓｉｎｇｌｅ ｍｕｃｌｅｏｃａｐｓｉｃｄ ｎｕｃｌｅｏｐｏｌｙｈｅｄｒｏｖｉｒｕｄ,ＨａＳＮＰＶ）能够在棉铃虫肾卵巢细胞素ＳＦＥ－ＨＡ－８２１２中有效复制,引起细胞解体死亡。通过培养ＨａＳＮＰＶ感染后残存的细胞,建立了一株持续感染的细胞。该细胞在传代培养的６个月时间内（约２５次传代）,持续地释放有感染力的病毒粒子,培养液中病毒     

人α干扰素基因在家蚕细胞中的高表达

用家蚕核多角体病毒(NPV)为载体,使人α干扰素基因正确装配到NPV多角体蛋白基因启动子控制下,构成重组质粒,又与NPVDNA共转染家蚕细胞。反复病毒空斑纯化后,得到重组病毒。