血糖波动对2 型糖尿病大鼠心肌组织形态的影响及机制研究

目的:观察血糖波动对2型糖尿病大鼠心肌组织形态的影响并探讨其可能机制。方法:选取45只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,按随机数字法分成正常对照组(CON组)和糖尿病组(DM组)。DM组给予4周高糖高脂饲料喂养后,予小剂量链脲佐菌素35 mg/Kg腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。将成模大鼠按随机数字法分成糖尿病对照组(CDM组)和波动血糖组(FDM组)。FDM组大鼠每天定时皮下注射短效胰岛素并错时给予葡萄糖,建立糖尿病血糖波动模型,CON组、CDM组予等量生理盐水皮下注射。每周测血糖值2天,4次/天,动态观测各组大鼠外形、进食量、饮水量等变化。造模成功12周后取腹主动脉血测定糖化血红蛋白(Hb Alc),取大鼠心脏组织行Masson染色观察心肌纤维化水平,免疫印记法分别检测心肌组织AKT、p-AKT蛋白的表达,免疫组织化学法分析各组大鼠心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达。结果:(1)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠Hb A1c、血糖变异系数(CV)水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组Hb A1c水平差异无统计学意义(P0.05),CV值进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。(2)与CON组相比,CDM组、FDM组大鼠心肌组织形心肌纤维化水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组心肌组织心肌纤维化水平进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。(3)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌p-AKT蛋白表达水平均减少,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组p-AKT蛋白表达水平均进一步减少,差异具有统计学意义(P0.05)。而三组大鼠心肌组织AKT蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05)。(4)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌Caspase-3蛋白表达水平均升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组Caspase-3蛋白表达水平进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:血糖波动可加重2型糖尿病大鼠的心肌纤维化,其机制可能与抑制AKT活化有关。     

驱除侵袭大质粒pINV对福氏2a志贺氏杆菌2457T影响的比较蛋白质组学研究

将福氏志贺氏杆菌2a 2457T及其驱除侵袭大质粒pINV的菌株培养至对数生长中期,制备了全细胞蛋白质。用双向电泳分离两种细胞蛋白质混合物并进行比较,找出差异点,这些点经过胶内酶切后进行MALDI_TOF质谱鉴定。每个蛋白质点的肽指纹图谱都在福氏志贺氏杆菌2a 2457T株的蛋白质数据库用Mascot进行检索,共发现了10个差异表达的蛋白质。结果显示驱除大质粒后几个参与核酸代谢途径的酶表达量有所上升。其中胞啶/脱氧胞啶脱氨酶、嘌呤核苷磷酸化酶和尿嘧啶核苷磷酸化酶表达量的上升可能造成尿嘧啶和尿（嘧啶核）苷合成的增加。     

青虾“软壳综合症”病原及其特性

从患软壳综合症的濒死青虾体内分离到一株细菌QXL0711B, 经人工感染试验, 其对青虾的半数致死浓度(LC50)为1.47×106 CFU/mL, 具有较强毒力。API 32E系统鉴定及16S rRNA序列分析, 该病原菌为维罗纳气单胞菌温和生物变种(Aeromonas veronii biovar sobria, 登录号: FJ808727)。其系统发育分析表明, 菌株QXL0711B与维罗纳气单胞菌(登录号: X71120)和维罗纳气单胞菌温和生物变种(登录号: AY987729)的亲缘关系最近,     

棕点湍蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化、基因克隆及活性分析

通过分离纯化棕点湍蛙(Amolops loloensis)皮肤分泌液中的生物活性物质,得到有促胰岛素释放活性的分离峰,并鉴定其结构.采用葡聚糖Sephadex G-50凝胶层析和反相高效液相(RP-HPLC)等手段对棕点湍蛙皮肤分泌液进行分离纯化,利用胰岛素释放实验进行活性检测,Edman降解法测定活性峰的氨基酸序列,反转录法构建cDNA文库并克隆其基因.得到一个具有显著的促胰岛素释放活性的十六肽,测得其氨基酸序列为:FMPIvGKsMSGLSGKL-NH2,命名为amolopin-1.由cDNA(开放阅读框为192bp)推导的氨基酸一级结构显示,其前体由64个氨基酸残基(aa)组成,包括高度保守的信号肽(22aa),酸性肽以及成熟肽.经过数据库序列比对,从棕点湍蛙皮肤中得到一个新的促胰岛素释放肽,进一步分析其作用机理和药代动力学,极有可能得到一个新的治疗糖尿病的降糖药物.     

pBV220载体中外源基因高效表达的自动化设计

pBV220载体是国内科学家构建的原核系统表达载体,目前仍在广泛应用.但是,实现 外源基因的高效表达需要综合考虑诸如RNA二级结构等多种因素,极其耗时费力．为此,基于我们提出的pBV220载体中外源基因高效表达数学模型,编写了外源基因高效表达的自动化设计软件,并可定性用于原核系统其它载体中外源基因表达水平分析,最终为加快实验进程提供帮助     

四川省部分牛病毒性腹泻/粘膜病血清中和抗体检测

应用细胞中和试验对四川黄牛、水牛、奶牛、牦牛共243份血清进行病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)的中和抗体检测,结果显示,水牛阳性率较高,达50.0%(21/42),其次为牦牛,达37.5%(15/40),奶牛达26.6%(38/143),黄牛最低,为22.2%(4/18).表明该病有蔓延和扩大的趋势,值得高度重视.     

马槟榔甜蛋白基因(MBLⅡ)的拼接与表达载体的构建

从云南植物Capparismasaikai中提取总DNA,设计引物克隆马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ,序列测定后经同源性分析表明与GeneBank中登陆的马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ(cDNA)序列一致,表明MBLⅡ不存在内含子序列。利用重叠区扩增基因拼接法(genesplicingbyoverlapextension,geneSOEing)进行体外基因剪接,剪接片段与植物表达载体pVKH相连,构建pVKH-35S-MBLⅡ-Pa、pVKH-35S-S-A B-pA、pVKH-35S-A B-pA、pVKH-35S-S-A-pA、pVKH-35S-S-B-pA,为寻找mabinlin的活性表达形式和翻译后剪接机制打下基础。     

浑善达克沙地夏冬季浅色型生物土壤结皮中古菌的系统发育多样性

【目的】生物土壤结皮(Biological soil crusts,BSCs)对于遏制土壤荒漠化、恢复荒漠地区生态环境起着重要作用。BSCs形成和发展的关键角色是微生物。但关于BSCs中微生物组成的认识还不够全面和系统,特别是对其中的古菌鲜有研究报道。【方法】通过构建和分析古菌16S rRNA基因克隆文库,揭示浑善达克沙地BSCs中古菌多样性和系统发育类型组成,并比较它们夏季和冬季的变化。【结果】BSCs样品颜色为褐色,厚度较薄,所含氮和磷营养养分不高;8月份和11月份的BSCs古菌16S rRNA基因文库覆盖度均达95%以上,代表性强;两个文库共得到可用的142条古菌16S rRNA基因序列,以0.03为Cutoff值、这些序列分入10个OTUs中,两个季节的最优势种群相同;8月份和11月份的古菌均属于奇古菌门,但群落结构存在很大的不同,即各自所独有的种群分别有1个和4个;BSCs中古菌多样性均不高,但11月份的明显高于8月份的。【结论】温带沙地浅色型BSCs中古菌的主要为奇古菌、多样性低,其群落结构随季节变换而有较大变化。本研究为系统认识BSCs古菌的多样性及其生态作用提供了基础。     

濒危药用植物短柄乌头及其近缘种的核型研究

对短柄乌头及其展毛短柄乌头、铁棒锤核型进行研究,为短柄乌头的细胞地理分布和选育提供理论基础.3个种其染色体基数为 X＝8,短柄乌头6个居群出现5种核型公式,不同居群染色体形态变异较大.其中宁蒗和盐源2个居群核型公式相同.四川木里居群属于 Stebbins 的1A 型,丽江、宁蒗、四川盐源居群属于2B 型,会泽、东川居群属于3B 型;铁棒锤和展毛短柄乌头核型类型都是属于2B 型.短柄乌头各项染色体参数表现出较高的不对称性,核型比较不相近.核型公式变异、核型不对称系数、核型不对称指数没有显示出清晰的、对应的地理分布.6个短柄乌头居群中也没发现三倍体,短柄乌头的选育还需进一步研究.