马槟榔甜蛋白基因(MBLⅡ)的拼接与表达载体的构建 |
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引用本文: | 宋宗应,刘四新,胡新文,郭建春.马槟榔甜蛋白基因(MBLⅡ)的拼接与表达载体的构建[J].生物技术通报,2006(Z1):347-350. |
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作者姓名: | 宋宗应 刘四新 胡新文 郭建春 |
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作者单位: | 中国热带农业科学院,热带生物技术研究所,海口,571101 |
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基金项目: | 教育部科学技术研究项目 |
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摘 要: | 从云南植物Capparismasaikai中提取总DNA,设计引物克隆马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ,序列测定后经同源性分析表明与GeneBank中登陆的马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ(cDNA)序列一致,表明MBLⅡ不存在内含子序列。利用重叠区扩增基因拼接法(genesplicingbyoverlapextension,geneSOEing)进行体外基因剪接,剪接片段与植物表达载体pVKH相连,构建pVKH-35S-MBLⅡ-Pa、pVKH-35S-S-A B-pA、pVKH-35S-A B-pA、pVKH-35S-S-A-pA、pVKH-35S-S-B-pA,为寻找mabinlin的活性表达形式和翻译后剪接机制打下基础。
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关 键 词: | 甜蛋白 MBLⅡ基因 重叠区扩增基因拼接 pVKH植物表达载体 |
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