一种结合SELEX与二代测序技术筛选RNA结合蛋白特异识别序列新方法的建立

RNA结合蛋白通过特异识别RNA底物发挥重要的生物学作用。指数富集的配体系统进化(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术是一种体外筛选核酸底物的基本方法,SELEX技术通过重复多轮筛选从随机核酸序列库中筛选出特异性与靶物质高度亲和的核酸底物,本研究将利用该技术与二代高通量测序(NGS)相结合,体外合成含有20个随机碱基的RNA文库,将所要研究的蛋白构建到带有可被链亲和酶素磁珠捕获的SBP标记的载体上去,显著提高筛选效率,仅需1轮筛选即可获得所需RNA底物motif。通过该方法获得了人的hn RNP A1的UP1结构域特异识别AGG和AG二种RNA序列,并通过EMSA实验证实其可以与获得的RNA motif结合。这一方法的建立对于研究RNA结合蛋白识别底物的序列特异性,并进一步了解其在生物体内的调控机制有重要意义。     

黄酒酵母一个新基因的鉴定及其对酵母抗逆性能的影响

该文鉴定了一个来自黄酒酵母菌株D2的新基因g5170,并研究了其对黄酒酵母环境胁迫耐受性与发酵性能的影响。生物信息学分析发现,此基因编码的蛋白质含有酰胺酶(amidase)保守功能域,并在YPD培养条件下有较高的基因表达量。利用Cre/lox P系统构建了基因g5170的敲除菌株,通过扩增带有g5170基因上下游同源序列和kanr筛选标记的基因敲除组件,并通过醋酸锂法转化到黄酒酵母菌株D2获得阳性克隆子,然后将质粒p SH65转到阳性克隆子中,半乳糖诱导p SH65表达Cre酶切除kanr筛选标记。重复此实验过程,最终获得两个g5170基因拷贝完全缺失菌株D2?g5170。梯度生长实验显示,与原始菌株相比,敲除菌株对高糖浓度、高温耐受性无明显变化,但对乙醇胁迫的耐受性显著降低,而过表达g5170的重组酵母菌株对乙醇的耐受性明显比对照菌株强。模拟黄酒发酵实验结果表明,敲除菌株D2?g5170的生长速率、乙醇产量及理化指标与原始菌株相似。因此,g5170基因可能与黄酒酵母适应乙醇胁迫有关,并有助于提高酵母的黄酒发酵性能。     

降雨对北方城市5种典型城市绿化树种叶面滞尘的影响

城市树木和森林植被净化大气颗粒污染物的功能受到了广泛的重视,但由于受多种植被特征与环境因素的影响,定量评价城市植被净化大气颗粒污染物功能非常困难。研究了不同降雨条件下大叶黄杨、银杏、栾树、五角枫、杜仲5种我国北方城市绿化典型树种叶面滞尘量的变化特征。在选定的样树冠层分上、中、下3层和东、南、西、北4个方向,采集成熟叶片,采用刷洗样本叶表,抽取水样及分级抽滤并烘干称重的方法,测定这5种树种降雨后12d(夏季累积滞尘量)、14mm降雨后(小雨)、29mm降雨后(中雨)以及室内模拟降雨30mm/h(15mm雨量)后叶片表面不同粒径大气颗粒污染物的滞留量。研究结果表明:降雨对不同粒径颗粒物去除能力有较大差异,除银杏以外,PM10以上颗粒物更容易去除;小雨对颗粒物的冲刷能力有限;中雨可以冲刷掉50%以上总颗粒物;室内模拟强降雨可以冲刷掉90%以上颗粒物,随着降雨增大,各粒径颗粒物随之冲刷量增加;同时叶表结构对抗冲刷能力有显著影响,革质叶片更容易滞尘及冲刷,绒毛结构滞尘能力较低,抗冲刷能力较强;北方大叶黄杨具有综合去除空气中颗粒物优势(小雨TSP冲刷量为(775.06±33.99)mg/m~2),银杏具有去除细颗粒物优势(中雨PM_(2.5)冲刷量为(426.55±40.83.99)mg/m~2)。     

珍稀濒危植物紫荆木生态学研究进展

珍稀濒危植物作为生物多样性的重要组成部分,是保护生物学研究的核心内容之一。紫荆木(Madhuca pasquieri)为现状稀有种,IUCN名录中濒危等级为VU易危,在中国被列为国家重点保护野生植物(Ⅱ级)和极小种群野生植物,是稀有的油料树种和珍贵的用材树种,具有极高的药用价值。在全球气候变化和生境破碎化的大背景下,紫荆木的现状研究和保护策略的制定显得尤为重要。该文介绍了紫荆木自然地理分布、群落生态学特征,归纳总结了国内外的保护应用及研究现状。目前针对紫荆木就地保护、迁地保护、化学成分、人工培育技术等方面已开展了一些研究工作,但研究仍处于初级阶段。下一步可完善紫荆木分布信息,并结合野外调查和长期实验,系统研究其生物及生态学特性。同时,将就地保护、迁地保护和回归有机结合,应用分子生物学技术加强紫荆木育种、繁殖和栽培技术的研究,建立繁殖培育基地,并积极开发其经济价值,在园林绿化中推广应用。     

老年白内障患者术前焦虑障碍的影响因素分析及对术后干眼症状和视觉相关生活质量的影响

摘要 目的：探讨老年白内障患者术前焦虑障碍的影响因素,并观察术前焦虑障碍对术后干眼症状和视觉相关生活质量的影响。方法：选择2020年12月~2022年5月期间江苏省人民医院眼科收治的老年白内障患者100例作为研究对象。所有患者入院第1天采用状态-特质焦虑问卷（STAI）评估焦虑状况,采用单因素和多因素Logistic回归分析老年白内障患者发生术前焦虑障碍的影响因素,并观察其对术后干眼症状和视觉相关生活质量的影响。结果：本研究100例老年白内障患者中,有46例患者出现术前焦虑障碍,占比46.00%,平均STAI评分为（59.27±3.16）分;有54例未出现术前焦虑障碍,占比54.00%,平均STAI评分为（35.39±5.28）分。根据是否出现术前焦虑障碍将患者分为焦虑障碍组（n=46）和无焦虑障碍组（n=54）。单因素分析显示,老年白内障患者术前焦虑障碍与年龄、性别、文化程度、家庭人均月收入、外科手术史、合并基础疾病种类、是否双眼白内障、付费方式、家庭关系有关（P<0.05）,而与婚姻状况、居住地无关（P>0.05）。年龄为60~69岁、家庭关系差、性别为女、文化程度为小学及以下、无外科手术史、双眼白内障、合并基础疾病种类为2种及以上是老年白内障患者发生术前焦虑障碍的危险因素（P<0.05）。焦虑障碍组术后干眼症状评分高于无焦虑障碍组（P<0.05）。焦虑障碍组社会角色限制、精神健康状态、社交功能、近距离工作、总体视觉情况、远距离工作、周边视野、独立性、一般健康状态、驾驶、色彩视觉、眼痛分值及总分均低于无焦虑障碍组（P<0.05）。结论：年龄、家庭关系、性别、文化程度、外科手术史、双眼白内障、合并基础疾病种类是老年白内障患者术前焦虑障碍的影响因素。老年白内障患者存在术前焦虑障碍可增加术后发生干眼症状的风险,并降低其视觉相关生活质量。     

长期施肥对作物产量的贡献

以中国科学院沈阳生态试验站16年定位试验为平台,研究了8种施肥制度的增产效应与稳产性能。结果表明:不同施肥处理对作物产量有明显影响,作物平均产量NPK>NP>NK>N>PK>P>K>CK,不施N肥时(即P、K、PK等处理)作物产量低;肥料对作物产量的年际贡献率在N、NP、NK、NPK处理中总体呈上升趋势,而在P、K、PK处理中则表现出下降的趋势;从化肥N、P、K的增产效果上看,总趋势是N>P>K;作物年际间产量的变异系数随化肥的均衡施用呈下降的趋势;玉米在NPK处理时的稳产性能最好,大豆在PK处理的稳产性最好。     

农业系统中磷肥残效及磷循环研究Ⅲ.投料中磷和氮在饲养-堆腐环中的循环率及有机肥料中养分的利用率

5年试验结果表明,农产品中N经由饲养-堆腐环的损失率平均为36％,P为25％。在丰产条件下,一农业系统80％收获产品经由饲养-堆腐环可循环回田的养分量约为80kgN/ha,14kgP/ha,相当于这一系统中每年化肥N用量的一半和化肥P用量的全部。有机肥料中N和P的表观利用率随施肥年限延长而有增长趋势,表明有残效迭加效应存在。5年平均,有机肥料中N和P的当季表观利用率分别约为40％和43％。     

农业系统中磷肥残效及磷循环研究 Ⅳ．农业系统磷循环的一个简单模型及其验证

根据辽西易旱区碳酸盐褐土上进行的６年Ｐ肥试验资料,建立和验证了一个简化的农业系统Ｐ循环模型．对４种施Ｐ对策进行长时间尺度的模拟预测表明,６年三次大剂量施Ｐ并辅以每年有机肥还田的施Ｐ模式固土壤有效Ｐ水平和施Ｐ利用率较高而优于其它模式．     

用T7 RNA聚合酶体外转录合成大鼠肝tRNAIle

采用PCR技术从rec-M13mp18中扩增出120 bp的大鼠肝tRNA^Ile合成基因片段,经限制性内切酶BstNⅠ酶切后作为模板,利用T7 RNA聚合酶在体外无细胞体系转录由T7启动子带动的大鼠肝tRNA^Ile基因,生成不含修饰碱基的tRNA^Ile,并对体外转录反应条件进行了优化,回收的tRNA产量可达DNA模板量的40倍.     

交叉培养法研究养分对作物幼苗释放N2O的影响

为验证土壤中N₂O能否通过植物的输导组织由叶片释放从而干扰植物直接释放N₂O的定量测定,实验采用分室隔离法确证了土壤N₂O对测定某些作物(如玉米、高粱)直接释放N₂O的干扰;采用交叉培养法消除了这种干扰,准确地测定了大豆、玉米幼苗直接释放N₂O的强度;并研究了N、P营养与植物释放N₂O及体内NO₃^--N浓度之间的相关性.