免疫中的学问

药物开发人员用开发好的新免疫试验平台来检测,鉴定蛋白类生物标记.     

头花杜鹃、陇蜀杜鹃及杜鹃属植物叶绿体基因组比较分析

头花杜鹃(Rhododendron capitatum)和陇蜀杜鹃(R. przewalskii)是极具观赏价值的野生花卉和药用植物。为探讨头花杜鹃和陇蜀杜鹃叶绿体基因组的遗传结构及进化特征,该研究利用 Illumina HiSeq 4000 平台对头花杜鹃和陇蜀杜鹃的叶绿体全基因组进行测序,经组装和注释后,结合 7 个已发表的杜鹃属植物叶绿体全基因组进行比较基因组学分析和系统发育分析。结果表明:(1)头花杜鹃和陇蜀杜鹃叶绿体全基因组呈典型的环状四分体结构,均由一个大单拷贝区(105 990、109 191 bp)、一个小单拷贝区(2 617、2 606 bp)和一对反向重复区(45 825、47 516 bp)构成,全长分别为200 257、206 829 bp。(2)头花杜鹃和陇蜀杜鹃叶绿体基因组中共鉴定出 263 个SSR位点,大部分 SSR 偏好使用 A/T 碱基,密码子偏好使用 A/U 结尾。(3)杜鹃属植物叶绿体全基因组中普遍存在基因丢失以及基因组重排等结构变异现象。该研究丰富了杜鹃属植物的基因组资源,为头花杜鹃、陇蜀杜鹃的资源开发、遗传进化、育种及系统发育相关研究提供了理论参考。     

胸三角皮瓣并自体脂肪移植修复颌面部大面积缺损畸形

目的：探讨颌面部皮肤软组织大面积缺损凹陷的理想修复方法。方法：本组6例均为爆炸伤后颌面部皮肤软组织缺损及严重凹陷畸形,采用胸三角皮肤扩张形成带蒂皮瓣修复上述皮肤缺损及自体脂肪移植纠正残存凹陷畸形。手术分五步进行：1．胸三角深筋膜浅层埋植500mL-800mL皮肤扩张器并注水扩张3个月。2井艮据面颈部预计皮肤缺损大小及形状作皮瓣预制并面部局部皮瓣纠正器官移位。3．带蒂皮瓣转移修复颌面部缺损。4．蒂部延迟及断蒂微整形。5．自体脂肪移植。结果：所有皮瓣成活良好,皮瓣色质接近面颈部周围正常皮肤,缺损畸形修复,外观形态好,供区直接缝合无需植皮,取得了较好的面部改观效果。结论：对于面部大面积皮肤软组织缺损,合并面部凹陷、面部器官缺损及移位,采取胸三角扩张延迟预制皮瓣并自体脂肪移植修复可取得良好的整复效果,为颌面部战创伤畸形提供了理想的修复方法。     

五指山不同部位苦丁茶多酚类物质含量的测定

苦丁茶是天然保健绿色食品,有较好的药用价值。将五指山苦丁茶叶分为四个等级,以没食子酸为标准品,酒石酸亚铁比色法,用TU-1901型双光束紫外可见分光光度计在540nm的最佳波长处,测定吸光度A,对四个等级的苦丁茶多酚类物质含量分别进行测定。得到四个等级的五指山苦丁茶中多酚类物质含量分别为9.906%、9.882%、9.801%和9.608。结果表明:不同部位的苦丁茶多酚类物质含量存在着一定的差别,四级品的多酚类物质明显较低,建议在采摘苦丁茶时,同时采摘未脱落的老叶,以免脱落后成分损失而失去利用价值。     

硝酸镧在小鼠肝中的积累及遗传毒理研究

通过在饮水中加入硝酸镧使小鼠摄入稀土,1个月后采用ICP-MS法测试了镧在小鼠肝中的积累,研究了硝酸镧对骨髓细胞微核率的影响,并采用体外试验研究了硝酸镧对小鼠基因组DNA的切割作用,探讨了稀土元素镧的遗传毒理.结果表明,1 000、500、300和50 μg·ml^-1处理组小鼠肝中镧含量分别达1.46、0.558、0.529和0.083 μg·g^-1,与对照组0.028 μg·g^-1的含量相比,各处理组小鼠肝中镧的含量皆有升高且与喂饮硝酸镧溶液的浓度成正比（r＝0.980）.1 000、500和300 μg·ml^-1处理组微核率与对照组之间的t检验结果表明各组微核率显著上升（P<0.05）,且亦与喂饮硝酸镧溶液的浓度成正比（r＝0.853）.体外试验显示,硝酸镧可切断DNA链,说明稀土元素镧可在生物体内积累,其在细胞内可使DNA断裂而导致遗传物质受损.     

基于ND4基因海南竹叶青蛇物种与亚种分类地位

《中国动物志》与文献记载竹叶青蛇属分类存在矛盾,故本研究探讨了产自海南岛的竹叶青蛇的分类地位。为了研究其分类地位,理清国内外分类系统的矛盾。通过原竹叶青蛇属37个物种91个个体的ND_4基因进行测序,计算遗传距离;以瘤鼻蛇为外群,建立分子发育树。结果显示:所有物种在分子树上明显分为7支;产自海南岛的竹叶青蛇属于两个物种,即白唇竹叶青蛇和福建竹叶青蛇。由此得结论为国际上将原竹叶青蛇属细分为8个属的观点比较合理;支持"福建竹叶青蛇海南亚种"的分类地位。本研究丰富了海南基于分子生物学竹叶青蛇分类研究,完善竹叶青蛇生物信息学理论体系提供理论参考。     

脐带间充质干细胞外泌体的分离和鉴定

目的探讨脐带间充质干细胞的外泌体的获取与鉴定方法。方法通过组织块贴壁法从胎儿脐带分离和培养脐带间充质干细胞并通过RiboTMExosome Isolation Kit收集外泌体,采用电镜和流式细胞仪鉴定外泌体。结果第二代脐带间充质干细胞表面CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;在透射电镜下观察到脐带间充质干细胞外泌体呈圆形或椭圆形,大小不均匀,直径30~100 nm,有完整的膜结构,内含低密度物质;流式细胞检测外泌体CD9、CD63、CD81和CD83呈阳性表达。结论在培养脐带间充质干细胞的培养基中可以收集到外泌体,可以通过电镜和流式细胞仪对脐带间充质干细胞的外泌体进行鉴定。     

基于cytb基因的台湾岛竹叶青蛇扩散的初步分析

为研究竹叶青蛇在中国台湾岛的扩散趋势,从Gen Bank上获取竹叶青蛇部分cytb基因序列,长度约655 bp,通过Seqman对序列进行格式转换、剪切与校正,再用MEGA6.0进行序列比对,统计碱基含量和变异位点。从内类群个体共定义了28个单倍型,其中1个来自福建武夷山,27个来自台湾岛。运用Microsoft Visio 2007软件绘制cytb部分序列统计简约网络图。结合生物地理学信息,发现早期竹叶青蛇基本是由北向南的扩散路线,可以初步推断在中国台湾地区竹叶青蛇大体是由北部(台北)向中南部山区扩散的总体趋势。用分子方法推断物种扩散,为新兴的分子生态学研究方法,可以广泛应用于未来系统发育地理学研究。     

GABA/progesterone-induced polyphosphoinositide (PPI) breakdown and its role in the acrosome reaction of guinea pig spermatozoa in vitro

To investigate whether GABA/progesterone (P4) stimulates PPI breakdown and its role in the acrosome reaction (AR), spermatozoa of guinea pig were preincubated in MCM-LCa2+ for 5.5 h and then labeled with [32P]pi for 1 h. Samples were washed through a three-step gradient Percoll, adjusted to 5×107 cells/mL and exposed to 2 mmol/L Ca2+, 5 mmol/L GABA, 10 mmol/L P4 and other agents. Lipids were separated by t.l.c. and radioactivity in spots determined by scintillation counting. The AR was assessed by phase-contrast microscopy. The results showed that (i) when spermato-zoa were treated with GABA, 32P-label diminished rapidly in phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate (PIP2), phosphatidylinositol 4-phosphate (PIP), and increased in phosphatidic acid (PA). The loss of label from PPI was almost completed by 10 min. The time-course of the AR was much slower than PPI when spermatozoa reached a maximal response by 15 min; (ii) the pattern of PPI hydrolysis and stimulation of AR was similar for the three agonists tested；their potency followed the order A23187＞progesterone≥GABA; (iii) GABA-induced PIP2 hydrolysis and rise in PA and the AR were prevented by inclusion of 10 mmol/L neomycin; (iv) the loss of PIP2 labeling and the increase in PA labeling abolished when spermatozoa were exposed to EGTA or Ca2+ channel blocker. These re-sults indicate that GABA or P4-induced PPI breakdown is an important and essential event in the series of changes to membrane fusion during the AR of guinea pig spermatozoa and this effect is mediated via calcium by activation of phosphatidylinositol-specific phospholipase C.