纳米抗体筛选技术研究进展

纳米抗体(nanobody, Nb)是在骆驼科血清中发现的一种新型抗体,具有体积小、特异性强、稳定性高、易于表达和能识别隐藏的抗原表位等优势,在各个领域具有广泛的应用价值。本文介绍了纳米抗体筛选与优化过程,包括纳米抗体文库构建、体外展示和亲和力成熟3个重要技术阶段的分类与特点。其中,简要描述了天然、免疫及半合成/合成文库的制备方法与重要参数,并系统介绍了应用噬菌体、酵母、细菌、核糖体/mRNA和真核细胞等表面展示系统,以及酵母双杂交、高通量测序和质谱鉴定方法,共8种不同体外展示技术进行快速筛选的方法及其优缺点,汇总用于提升纳米抗体功能可靠性的体外及计算机辅助亲和力成熟技术平台,为综合运用各种技术手段快速获得稳定、可靠、特异的纳米抗体类药物或诊断制剂提供了参考。     

五种菊科植物种子萌发对温度的响应及其入侵性

以粤东地区4种菊科入侵植物三叶鬼针草(Bidens pilosa)、微甘菊(Mikania micrantha)、南美蟛蜞菊(Wedelia trilobata)、藿香蓟(Ageratum conyzoides)和1种本土植物醴肠(Eclipta prostrata)为材料,研究了种子扩散时的萌发率以及种子经历低温(15℃、湿润)和常温(25℃和25/15℃、湿润)后的萌发响应特点。结果表明:种子扩散时,三叶鬼针草、醴肠、藿香蓟种子萌发率分别为100%、98%和62%~78%,微甘菊为44%~52%,南美蟛蜞菊为2%(25℃)和86%(25/15℃);5种菊科植物种子在15℃培养期间,平均萌发率由高至低依次是三叶鬼针草(82%~91%)、微甘菊(19%~26%)、醴肠(9%~12%)、南美蟛蜞菊(0~1%)、藿香蓟(0);在25℃和25/15℃下,藿香蓟种子萌发率为35%~49%,醴肠为58%~68%,南美蟛蜞菊为4%(25℃)和55%(25/15℃)。种子快速萌发、高萌发率,以及宽泛的萌发温度需求是1年生草本入侵种的主要入侵特性。     

中药熏蒸联合推拿治疗腰椎间盘突出症的临床效果

目的：探讨中药熏蒸联合推拿治疗腰椎间盘突出症的临床效果。方法：选择2013 年12 月到2015 年1 月我院收治的112 例 腰椎间盘突出症患者为研究对象,根据治疗方法的不同分为研究组和对照组。对照组给予常规推拿治疗措施,研究组给予常规推 拿措施联合中药熏蒸治疗。比较两组患者的住院时间,下肢放射痛、麻木、腰痛的发生率及临床疗效。结果：研究组患者的住院时 间及下肢放射痛、麻木、腰痛的发生率均较对照组明显缩短或降低,其治疗总有效率为92.9%,显著高于对照组,均有统计学差异 (P＜0.05)。结论：中药熏蒸联合推拿方法治疗腰椎间盘突出症的临床效果优于单一推拿治疗措施,可有效改善患者的临床症状,缩 短疗程,提高治疗有效率,值得临床推广使用。     

黄土高原苜蓿-冬小麦轮作系统土壤水分时空动态及产量响应

2 0 0 1～ 2 0 0 3年在甘肃庆阳黄土高原连续 3 a研究了紫花苜蓿 -冬小麦轮作系统中土壤 0～ 3 0 0 cm剖面水分动态特征 ,作物产量及其含 N量。处理包括 4龄苜蓿草地 (L C)、4龄苜蓿草地后茬持续休闲 (L F)、4龄苜蓿草地休闲 4个月后种植冬小麦(L Fl W) ,和 4龄苜蓿草地休闲 1个月后种植冬小麦 (L Fs W)。结果表明 ,种植 4a苜蓿后春季翻挖实施休闲至冬小麦播种(L Fl W)的 4个月期间 ,降雨的入渗深度为 150 cm,而苜蓿秋季翻挖休闲至小麦播种 (L Fs W)的一个月间 ,降雨在土壤内的入渗深度为 90 cm,不同休闲长度对头茬冬小麦土壤 0～ 90 cm水分贮存量无显著影响 ,亦不影响头茬冬小麦的出苗和出苗数。苜蓿后茬完全休闲 (L F)一个生长季后 ,60～ 90 cm土壤水分含量达田间最大重力持水量 (Drainage U pper L imit DU L )的 93 % ,0～ 3 0 0cm剖面土壤贮水量达 670 mm ,是剖面田间最大重力持水量 (DUL )的 78% ;L Fl W和 L Fs W处理下头茬小麦籽粒产量之间差异显著 (P<0 .0 5) ,收获指数和千粒重等指数无显著差异 ;L Fl W和 L Fs W处理中获得的二茬小麦产量无显著差异 ;连续种植苜蓿与种植小麦有接近的生物量 ,但苜蓿地植物总 N的输出量较小麦田高 2～ 3倍。由于黄土高原降雨变率大 ,因此预测土壤含水量动态有     

人轮状病毒感染昆明小鼠乳鼠模型的建立

目的建立人轮状病毒G3型709株感染4d龄昆明小鼠乳鼠模型。方法通过灌胃病毒的方式造模,观察乳鼠被病毒攻击后不同时间其临床表现、小肠组织病理改变、小肠组织上皮细胞超微结构改变。酶联免疫吸附法检测轮状病毒抗原在乳鼠粪便中的表达,免疫荧光法检测轮状病毒在乳鼠小肠组织中的表达。结果4d龄昆明小鼠乳鼠被轮状病毒攻击24h后出现腹泻表现和小肠组织病理改变,72h最严重,之后腹泻率下降,病理改变减轻,第7天腹泻停止,病理改变消失。乳鼠小肠上皮细胞出现糖、脂肪代谢紊乱,其粪便和小肠组织中都可以检测出轮状病毒抗原表达。结论4d龄昆明小鼠乳鼠被人轮状病毒A组G3型709株经口攻击后病毒能够在其体内复制,出现腹泻表现。该病毒感染腹泻过程具有自愈特点。     

床边急诊腹膜透析治疗横纹肌溶解综合征并急性肾衰(附25例报告)

我院1997年3月至2006年7月收治25例横纹肌溶解综合征(rhabdomyolysis,RM)并发急性肾衰(actue renalfailure,ARF)患者,采用内科综合治疗联合床边急诊腹膜透析(PD)治疗,取得较好疗效,现报告如下。1临床资料1·1一般资料本组25例,男19例,女6例,年龄16~75岁,平均(38·10±14·97)岁。其中创伤性RM 12例(48·00%),均为外伤或多发性骨折所致的挤压综合征,有2例并发多脏器功能障碍综合征(MODS);非创伤性RM13例(52·00%),其中药物毒物中毒9例(毒菇中毒、有机磷中毒、一氧化碳中毒、不正确使用降脂药物各2例,鱼胆中毒1例),激烈运动3例,严重感染…     

报春苣苔的生态生物学特征

报春苣苔是苦苣苔科多年生喜Ca草本植物,因分布区极窄而被列为第一批国家I级重点保护野生植物。基于其生态生物学特征探讨报春苣苔的濒危机制及解濒措施。报春苣苔生于海拔约300m的石灰岩山洞口附近的植物群落中,群落主要由一些喜Ca及耐阴湿植物组成。其伴生植物为苔鲜。从洞口向里,植物种类越来越少,报春苣苔的数量却越来越多。植株个体越来越小,开花的比例也越来越少。洞口的报春苣苔种群呈均匀分布。深处则呈集聚分布,洞穴的壁顶的报春苣苔群落为单一种且呈集聚分布。报春苣苔需要偏碱性的硬质水才能生长。其生存土壤太薄且营养贫乏,PH值为7．5,有机质、全N、全P和全K含量分别为1．8％、0．87％、0．16％和0．71％。因而植物的生长极为缓慢,一般一株的年生长量为30g左右。报春苣苔分布点CO2平均浓度为0．09％,高于洞外约2倍。其相对湿度终年保持在97％左右。报春苣苔仅生于相对弱的光环境下,且只在散射光线能到达的地方出现,大约只忍受正常光强的1／4以下。作为洞穴植物,其生态分布的限制因子是光源和特殊的大气环境。生境的特殊性导致其分布狭窄,3a的移栽实验表明迁地保护转术日前环不成功。     

农田栽参土壤改良中肥料对土壤元素及酶活性的影响

为探究农田栽参土壤改良中肥料对土壤元素与土壤酶活性的影响, 于2019年5月21日采集经混合肥、土地乐、腐殖酸、木醋液、益生源处理过的土壤样品, 对其土壤养分与土壤酶活性进行研究。结果表明: 不同肥料在土壤中发挥出不同的作用, 施用混合肥的土壤SOM、ACa含量最高分别为139.51 g·kg-1、848.9 mg·kg-1。施用土地乐生物有机肥后土壤中AP和AMn含量最高分别为36.7 mg·kg-1、126.12 mg·kg-1。施用腐殖酸后土壤中AFe、电导率、AK数值最高分别为737.36 mg·kg-1、59.67 mg·kg-1、794.87 mg·kg-1。施用木醋液与益生源菌剂后各养分均有不同程度增加; 过氧化氢酶活性在混合肥处理后最低, 对照处理最高。漆酶活性在腐殖酸处理后最低, 木醋液处理最高。蔗糖酶活性在腐殖酸处理最低, 混合肥处理最高。脲酶活性在腐殖酸处理最低, 益生源处理后最高; 相关性分析表明, 土壤养分与土壤酶活性有密切关系, 存在不同程度的相关性。五种肥料在土壤改良中都有显著效果     

内蒙古中部地区繁殖鸟类多样性调查

2011年5～6月,采用样线法和固定半径样点法对内蒙古中部地区荒漠草原、典型草原及湿地3种生境中的鸟类进行了调查,共记录到繁殖鸟63种,隶属于11目25科,其中留鸟12种,夏候鸟51种。在动物地理区系成分上,古北界鸟类54种(占85.71%);东洋界鸟类9种(占14.29%)。调查结果表明,3种生境的鸟类群落结构在多样性指数上以湿地为最高,其次为荒漠草原,典型草原最低;均匀度指数最高的为荒漠草原,其次为湿地,典型草原最低。     

嗜水气单胞菌气溶素基因的克隆与序列分析

以嗜水气单胞菌BZ和NK分离株的DNA为模板, 采用PCR技术, 扩增气溶素基因(aerA)的DNA片段, 将其克隆到pMD18-T载体上。通过序列测定, 分析结果表明：所克隆的1393 bp片段为aerA部分序列, 编码产生464个氨基酸。BZ与NK之间aerA核苷酸同源性为97.6%, 氨基酸同源性为98.3%, 与其它分离物核苷酸同源性为71.6%~97.5%, 氨基酸同源性为68.0%~98.9%。利用邻接法构建了aerA分子树状图, 树状图分析表明：气单胞菌属各分离物聚为三支, 其中嗜水气单胞菌各菌株之间关系密切, 被聚类为同一支。