紫皮石斛寡糖的酶法制备及单糖组成分析

从多糖提取后的紫皮石斛（Dendrobium devonianum Paxt.）渣上分离到一株能够水解石斛多糖的菌株,为丰富寡糖食品新原料种类,对该菌株的发酵产酶活性进行分析。利用酶法制备紫皮石斛寡糖,并进行小试和中试,采用硅胶柱色谱对寡糖进行初步分离,PMP衍生化后通过HPLC分析单糖组成。结果表明,水解石斛多糖的菌株为粗糙脉孢菌（Neurospora crassa）。该菌株液态发酵至第4天酶活最高,为0.1 U/μL,最佳酶解时间为24 h,粗酶液能够耐受30%的乙醇。通过粗酶液生物转化石斛多糖的小试和中试成功制备了大量的石斛寡糖,并对各组分进行了初步分离,单糖组成分析表明其主要由甘露糖组成,并含有少量的葡萄糖或果糖。通过粗糙脉孢菌酶法制备得到的紫皮石斛寡糖主要为甘露寡糖。     

BCG对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的从细胞增殖和凋亡两方面观察BCG对乳腺癌细胞MDA—MB-231的抑制作用。方法用MTT法检测BCG作用后MDA—MB-231细胞的增殖能力,采用TUNEL法检测凋亡。结果BCG能明显降低MDA-MB-231细胞的增殖代谢活性而抑制其增殖。TUNEL法染色显示BCG可显著增加凋亡细胞。结论BCG不仅能显著抑制MDA—MB-231细胞增殖,还能有效诱导其凋亡。     

食源性致病菌耐药机制研究进展

食源性致病菌是危害食品安全与人体健康的关键因素,而细菌耐药性的不断出现与传播,更加剧了食源性致病菌的潜在风险,成为全球普遍关注的公共卫生焦点问题。本文中,笔者首先综述4种主要的细菌耐药机制:降低细胞膜通透性机制、外排泵机制、药物靶标位点突变机制以及酶解作用机制。在此基础之上,系统回顾了常见食源性致病菌耐药机制的研究进展,并对食源性致病菌耐药机制进一步的研究方向进行了展望,以期为食源性致病菌耐药机制的深入研究提供基础资料,为食源性致病菌耐药性风险的控制提供科学依据。     

天疱疮患者并发感染的临床分析

目的分析天疱疮患者并发感染的临床特征、常见病原菌及感染对天疱疮治疗方案、预后的影响,为天疱疮并发感染治疗提供依据。方法对中山大学附属第三医院2000年4月-2014年2月收治的67例天疱疮并发感染的患者资料进行回顾性分析。结果67例天疱疮患者,41例(61%)发生感染。其中最常见的感染是皮肤细菌感染,其次为口腔假丝酵母菌感染。病情严重程度与感染的发生存在明显相关性。感染组患者的住院天数、激素用量及联合治疗比率明显高于无感染患者,而两组愈转率比较差异无统计学意义。结论感染是天疱疮常见的并发症,病情严重程度是影响天疱疮感染的重要因素。感染可对患者产生多种不利影响,但不影响预后。     

鲍曼不动杆菌血流感染的研究进展

近年来随着抗生素的广泛应用、免疫抑制剂的使用以及侵入性操作的增加,多重耐药、泛耐药甚至全耐药鲍曼不动杆菌日益增多,鲍曼不动杆菌引起的血流感染也呈不断上升趋势,给临床抗感染治疗带来极大的困难,导致临床预后差、病死率高,大大延长了患者的住院时间,造成医疗资源的浪费。了解鲍曼不动杆菌血流感染的危险因素、研究其耐药机制、尽早采取有效的干预措施、合理的应用抗生素、研究新型的治疗策略对预防和治疗鲍曼不动杆菌血流感染至关重要。本文就鲍曼不动杆菌血流感染的危险因素、耐药性、治疗、预后及预防进行综述,为临床预防和治疗提供一定的参考依据。     

肠道病毒71型疫苗的研究进展

近年来,手足口病(Hand foot mouth disease,HFMD)在中国多次爆发流行,严重威胁公众健康,尤其是5岁以下的婴幼儿。而肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是引起手足口病的主要病原体之一,由于目前还无针对该疾病有效的抗病毒药物,研制疫苗是控制EV71流行最为有效的措施。目前EV71疫苗及相关研究均取得重大突破,本文就近年来关于EV71疫苗研发、动物模型等的研究进展作一综述。     

‘云香’水仙NtWRKYY1基因的分离与功能分析

为明确WRKY转录因子在‘云香’水仙中的功能,该研究以‘云香’水仙为材料,克隆了WRKY基因,命名为NtWRKYY1(GenBank登录号为KX056495)。序列分析显示,NtWRKYY1基因开放阅读框(ORF)长度为510bp,编码169个氨基酸。多序列比对和系统进化树分析显示,NtWRKYY1编码蛋白含1个WRKY结构域和C2H2锌指结构(Cx4Cx23HxH),与AtWRKY57聚在一起,属于第Ⅱc类WRKY转录因子。组织表达和时空表达分析显示,NtWRKYY1基因在花中表达量高于根和叶,且在花瓣及副冠中的表达量随开花过程(花蕾期、始花期、盛花期、衰败期)呈上升趋势。植物激素和非生物胁迫分析显示,NtWRKYY1基因受脱落酸(ABA)、高温、干旱和盐诱导,受茉莉酸甲酯(JA)抑制,表明NtWRKYY1基因可能在‘云香’水仙花朵的衰老过程中起正调节作用,同时参与‘云香’水仙ABA、JA等激素信号转导及高温、干旱、盐碱等非生物胁迫过程的调控。利用In-Fusion克隆技术成功构建过表达载体pMDC140-NtWRKYY1,并采用农杆菌介导叶盘法转化烟草。RT-PCR和GUS染色结果显示,目的基因已成功导入烟草基因组中。     

铁皮石斛钙网蛋白基因DoCRT1的分子克隆与表达研究

该研究采用RACE克隆铁皮石斛钙网蛋白(calreticulin,CRT)基因DoCRT1,进行生物信息学分析,并借助定量PCR检测基因表达模式,为揭示该基因在铁皮石斛生长发育及逆境生理中的分子作用奠定基础。结果表明:(1)DoCRT1基因(GenBank登录号KT957551)cDNA全长1 672bp,ORF长1 275bp,编码一条由424个氨基酸组成的多肽,分子量49.05kD,等电点4.42,具有CRT蛋白保守的钙网蛋白/钙联接蛋白P结构域(205~320)和类伴刀豆球蛋白凝集素/葡聚糖酶结构域A(20~222)以及多个基序;蛋白N端含有一个信号肽(1~23)和一个跨膜区域(8~24),预测结果显示主要定位于细胞液泡、胞外,与多种植物CRT蛋白一致性很高(80%~87%)。(2)DoCRT1蛋白与OsCRT1/2、ZmCRT1亲缘关系近,聚在CRT进化树的CRT1/2分支。(3)qRT-PCR检测结果显示,DoCRT1基因转录本在石斛根中表达量较高,为叶中的2.23倍,且茎与叶中表达量无显著差异。     

2006年春夏期间浙江南麂海域浮游植物群落结构特征

研究了2006年春夏期间(4~6月)浙江省南麂列岛海域的浮游植物群落结构,共观察到68种浮游植物,其中硅藻53种,甲藻13种,金藻和蓝藻各1种。调查期间,该海域浮游植物群落结构变化明显,原甲藻赤潮的形成和持续是最显著的特征,三角棘原甲藻和东海原甲藻分别在5月中、下旬先后引发赤潮。原甲藻赤潮的形成与水温有密切关系,其生消引起海水中营养盐结构的相应变化。     

Lnc-RAP3对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)是一类长度大于200nt、没有长开放阅读框架但往往具有mRNA结构特征的RNA,可以在转录及转录后水平参与基因的表达调控。近年来,有研究证实lncRNA对脂肪生成具有重要作用。Lnc-RAP3位于小鼠(Mus musculus)17号染色体,其表达量在小鼠脂肪细胞分化前后呈现显著差异,但其具体的生物学功能尚不清楚。为探讨lnc-RAP3在小鼠3T3-L1前脂肪细胞成脂分化中的作用,本文首先构建了lnc-RAP3的真核表达载体pcDNA3.1-RAP3,利用脂质体将pcDNA3.1-RAP3和人工合成的lnc-RAP3的siRNAs分别转染3T3-L1前脂肪细胞,并对转染后的细胞进行诱导分化,并通过油红O染色、qRT-PCR检测成脂分化相关基因表达等方法比较过表达和敲降lnc-RAP3对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响。结果显示,过表达lnc-RAP3后,细胞内脂滴聚集显著减少(P<0.05),在诱导分化第0 d、2 d和4 d时C/EBPα、Glut4、PPARγ、LPL和FAS的表达水平均呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下降;敲降lnc-RAP3后,细胞内脂滴聚集显著增多(P<0.05),同时在诱导分化第0 d、2 d时PPARγ、LPL、C/EBPα、FAS和Glut4的表达水平呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)升高。本研究结果表明,lnc-RAP3可能通过影响成脂分化相关基因的表达来抑制3T3-L1前脂肪细胞的成脂分化。