酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能豚鼠精子上的分布与表达

为研究豚鼠精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将豚鼠精子悬浮于改良的TALP获能培养基中,在5% CO2 孵箱37 ℃培养,以精子与金霉素(CTC) 荧光结合类型为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术和Western blot方法检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布以及酪氨酸磷酸化水平的变化。结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前的36％增至获能7h时的92％。酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段。另外,有80,45,40kDa的三种蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中40kDa的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势,45kDa的蛋白酪氨酸磷酸化自培养3h后发现并呈递增趋势,而80kDa的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养3h时最高,后呈递减趋势。     

南极磷虾粉替代鱼粉对雌性黄鳝生长及生殖性能的影响

试验旨在研究南极磷虾粉替代鱼粉对雌性黄鳝(Monopterus albus)生长性能、体组成、抗氧化能力、非特异性免疫能力及生殖力的影响。选取二冬龄雌性黄鳝[初始体重(36.41±3.62) g]900尾,随机分为6组(每组3个重复,每个重复50尾),分别饲喂以南极磷虾粉替代饲料中0(对照)、20%、40%、60%、80%和100%的鱼粉制成的6种等氮等能配合饲料,试验周期12周。结果表明:20%磷虾粉替代鱼粉时,雌性黄鳝的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)与对照组无显著性差异(P>0.05),但随着替代水平的进一步提高其生长性能显著下降(P<0.05)。20%替代组黄鳝肌肉的粗蛋白质含量显著高于其他组(P<0.05),而粗脂肪、粗灰分各组间无显著差异(P>0.05)。对黄鳝卵巢营养成分进行分析表明,当磷虾粉替代鱼粉比例超过60%时,其粗蛋白、粗脂肪含量均显著下降,水分含量逐渐升高(P<0.05)。进一步对黄鳝肝脏的抗氧化能力进行分析显示,当磷虾粉替代鱼粉比例大于40%时,其超氧化物歧化酶(SOD)活性逐渐下降,而丙二醛(MDA)含量逐渐升高; 100...     

巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶基因的克隆和表达

我们分离到了一株产生分泌型青霉素G酰化酶的巨大芽孢杆菌(Bacillus megateriumBM1)。用pBR322作载体,将该菌的青霉索G酰化酶基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coliMcl061)中,得到含有9．9kb插人片段的重组质粒pBmPA4。分析了该质粒的限制酶酶切图谱,并经体外缺失获得含4．9kb插入片段的质粒pBmPA5。pBmPA4和pBmPA5在E·coliMcl061中均能表达,表达受苯乙酸诱导。     

峨参原生质体的体细胞胚同步化发生及植株再生

用峨参茎节来源的胚性愈伤组织,在含1.5%纤维素酶Onozuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+0.5%蜗牛酶+5mmol/L CaCl_2+0.6mol/L甘露醇+0.3%葡聚糖硫酸钾,pH5.8的酶液中游离原生质体,培养在改良MS培养基中,内含激素1mg/L2,4-D+0.5mg/L玉米素,并附加0.3%琼脂糖。第10天分裂频率达40—50%。此后振荡培养1个月,细胞团移至含0.5mg/L 2,4-D及渗透压降低的MS培养基中大量繁殖,然后再移至无激素或含0.1mg/L玉米素的MS培养基中进行分化,得到大量的球形胚,并且同步化达90%,70%的球形胚在10—15天后同步发育为心形胚,以后继续发育为鱼雷胚及子叶胚,最后形成完整植株。并讨论了获得大量同步化发生的体细胞胚的原因。     

蛋白激酶C亚型在HL-60细胞诱导分化中的变化

用全反式维甲酸(ATRA)或佛波酯(PMA)处理人早幼粒白血病细胞(HL-60)3天,用形态学,NBT还原实验,特异性和非特异性酯酶测定,证明细胞分别向粒细胞或单核/巨噬细胞分化。通过免疫组化法观察了蛋白激酶C(PKC)α,βⅠ和βⅡ亚型在分化后的变化。结果显示,ATRA可引起HL-60细胞PKCα,βⅠ和βⅡ的含量升高,分别为对照的5.0,2.8和4.2倍,并存在从胞膜向胞质转位。PMA则使PKCα和βⅡ的表达水平下降,而PKCβⅠ增高,且三种亚型均在核内有不同程度的表达。结果提示HL-60细胞向粒细胞的分化可能需要PKCα和PKCβ评的持续激活,而PKC的核内转位可能是HL-60细胞分化为单核/巨噬细胞的重要环节。     

基于红外相机技术和人工巢试验分析白冠长尾雉巢潜在捕食者

为了了解保护区内外的白冠长尾雉繁殖生态,2014年3—7月在河南董寨国家级自然保护区和保护区外湖北平靖关村利用人工巢试验(以鸡蛋为诱饵)、红外相机技术和栖息地样方调查搜集巢捕食信息,对其巢捕食率、巢潜在捕食者和影响巢捕食的栖息地因子进行研究.两轮试验分别为繁殖期前期3—4月和繁殖期中期5—6月.试验共放置巢149个,其中红外相机监测62个,累计相机日1315个,拍摄照片7776张,视频6950个.结果表明: 保护区外(平靖关)巢捕食率高于保护区内(董寨),繁殖期前期和繁殖期中期保护区内外差异均极显著.平靖关捕食者种类数(11和6种)在繁殖期前期和中期均高于董寨(7和5种),平靖关捕食者比例较高的是啮齿类和鸦科鸟类,董寨捕食比例较高的是貉.平靖关坡度和乔木盖度对巢捕食影响显著,而董寨的落叶盖度对其影响显著.在红外监测的人工巢中共发现野生白冠长尾雉访问人工巢13巢18次.     

RP-HPLC法测定北柴胡地上部分山柰酚的含量

目的:建立RP-HPLC法测定北柴胡地上部分山柰酚含量的色谱方法。方法:采用RP-HPLC,C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相甲醇-(0.5%磷酸)水(体积比为48∶52),检测波长360 nm,柱温34℃。结果:山柰酚质量浓度在0~0.048 g/L内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 5(n=6);平均回收率为100.7%,RSD=1.8%(n=6)。结论:测定方法准确,可靠,为北柴胡地上部分的质量评价提供了可靠的依据。     

高温对乳腺上皮细胞生长及凋亡的影响

近年来随着生物技术的发展,对应激的研究已经深入到细胞水平上,Li met al·(2006)揭示细胞抵抗热应激的能力因细胞种类、热处理的温度、时间的不同而存在差异;热应激还会引起G1/S或G2/M细胞周期调控点的阻滞(Kuhl and Rensing,2002;Fuse et al.,1996),剧烈的热应激还可以诱导细     

水稻籽粒灌浆过程中蛋白质表达特性及其对氮肥运筹的响应

采用大田栽培的方式,研究了大穗型水稻金辉809籽粒灌浆过程中蛋白质的差异表达变化模式以及同一施氮量下不同的氮肥施用比例(总施氮量225 kg/hm2,基蘖肥:穗粒肥分别为7∶3和6∶4)对强弱势粒灌浆影响的分子机制。获得了水稻不同灌浆时段籽粒总蛋白的表达图谱,共发现32个在灌浆过程中发生显著差异表达的蛋白点,涉及籽粒的淀粉合成,能量代谢,激素信号转导,基因表达调节和抗逆响应等。在此基础上,进一步构建了不同灌浆发育时段水稻强弱势籽粒响应不同氮肥比例调控的蛋白表达图谱,结果发现强势籽粒响应氮肥调控出现差异表达的蛋白点有8个,而弱势籽粒有26个,可见强势籽粒灌浆具有更强的环境稳定性,相对地,弱势籽粒灌浆则易被环境所调节。在总施氮量不变的情况下,适当增加生育后期氮肥的施用量,有利于增强弱势籽粒中信号转导,促进相关基因的表达,提高物质调运与能量代谢速率,增强抗逆性,增强弱势籽粒的代谢水平,延长其灌浆时期,提升弱势籽粒活性和灌浆强度,增加结实率和千粒重,最终实现高产高效。研究结果对于进一步明确氮素调控水稻强弱势粒灌浆的分子生态特性具有重要的理论与实际意义。     

角倍蚜室内越冬的观察

<正> 五倍子是我国重要的昆虫资源之一。主要含有单宁酸等成分,是重要的化工原料,又是传统的出口商品。 角倍是五倍子中的主要品种,致瘿蚜虫为角倍蚜Schlechtendalia chinensis Bell。角倍产量的高低,取决于角倍蚜越冬成活率的多少。在野外越冬受到气候的制约,天敌的为害,成活率仅为5％,而室内可高达40—50％。因此,室内繁育倍蚜安全越冬,是提高角倍产量的有效途径。从1980年11月至1981年3月,对角倍蚜的室内越冬进行初步观察,现整理如后。