一种高效产生小鼠杂交瘤的电融合方法

近年来,细胞电融合技术(Electrofusion)得到了迅速发展和应用.特别是在单克隆抗体领域,人们希望能以电融合技术的高融合频率来更有效地获得分泌单抗的杂交瘤.现主要有两种较有效的电融合方法来实现这一目的:一是Nova/Hopkins的抗原—抗生物素—生物素桥联(antigen-avidin-biotin bridge)方法,另一种则是Zimmermann电融合法.Nova/Hopkins方法虽然非常有效,但其较适用于中高亲和性的抗原—抗体系统     

用酸敏脂质体将荧光染料导入NIH3T3细胞及人胚肺成纤维细胞

我们制备了由DOPE/CHOL/OA(4:4:3)组成的酸敏脂质体,将荧光染料Calcein装载在脂质体内,并将这种包有荧光染料的脂质体导入NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞。90％以上的细胞有荧光物质进入,并均匀分布于细胞质。我们还制备了由DOPC/CHOL/OA(4:4:3)组成的非酸敏脂质体,其将荧光物质导入细胞的能力不如前者好。本文使用的冷冻干燥法制备脂质体,方法比较温和、所得到的脂质体有利于携带DNA或其它生物活性物质。     

崭露头角的共振电离光谱测定法

许多读者都知道,近年来研究人员们已经积累了大量的证据,表明地质史上曾发生过某些短期的不寻常事件,并推测它们是由庞大的地外天体撞击地球引起的。这一碰撞似乎产生了某些地球化学和同位素的异常现象,而这些异常恰好发生在生物地层界级上。例如,这些事件中距现代最近的事件大多数似乎发生在约6500万年以前,靠近白垩纪和第三纪两时期之间,与恐龙的灭绝时间差不多一致。1980年,美国伯克利加利福尼亚大学的几位专家对这一“中生代大灭绝”现象产生了兴趣。他们考察了白垩纪——第三纪     

Na~(+)、Ca~(2+)、Cu~(2+)和Zn~(2+)与HSA相互作用的~(23)(Na)-NMR研究

 本文应用~23Na-NMR波谱技术,研究了Na~(+)、Ca~(2+)、Cu~(2+)和Zn~(2+)与人体血清白蛋白(HSA)的相互作用。在实验基础上,通过引入两位快交换模型,拟合计算获得了Na~(+)与HSA相互作用的结合常数和处于结合状态Na~(+)的相关时间;实验表明Ca~(2+)能与Na~(+)竞争同HSA结合,拟合计算获得了两者与HSA相互作用结合常数的比值,棕榈酸钠能增强Ca~(2+)同Na~(+)竞争与HSA结合的能力;从实验上未能观察到Cu~(2+)、Zn~(2+)能同Na~(+)竞争与HSA相互作用的证据。     

钙调素

钙调素(Calmodulin)是美国(田纳西州立大学张槐耀于1967年在研究磷酸二酯酶活性时偶然发现的,是一种和钙结合的蛋白质.超初还认为它是磷酸二酯酶的激活剂,后来经分离,证明它是蛋白质(1～3).1978年,命名为Calmodulin.根据全国第一     

大肠癌中p53基因突变的研究

应用聚合酶链反应(PCR)──单链构型多态性(SSCP)结合银染法对14例大肠癌p53基因的第4、第5─6和第7外显子进行了点突变的研究,结果共检测出6例点突变,而且发现各外显子的突变频率存在差异。另外,利用购自ATCC的两个探针 (p53cDNA探针和pYNZ22探针)对大肠癌中p53基因的杂合性失去进行了研究,在14例大肠癌中共检出6例杂合性丢失。将点突变检测结果同杂合性丢失结果进行比较分析, 并着重探讨了大肠癌中p53基因失活导致肿瘤的作用方式。 Abstract:The exons 4-7 of p53 gene were examined in 14 colorectal Cancer patients by using PCR-SSCP-silver staining method.The results showed 6 cases of point mutation and the mutation frequencies of exons were different from each other.p53 cDNA and pYNZ22 VNTR were used as probes to examine LOH(Loss of heterozygosity)of 14 colorectal cancers.6 cases with LOH were found.The results of present research suggest that mutation and LOH of p53 gene are critical events in the progress and development of Cancer.There were different kinds of inactivation model of p53 gene in the process of development of cancer and transformation of cells.     

不同急性失血量和等容稀释对家兔血压心率微血管的影响

本实验以麻醉家兔总血量的１０％、２０％、３０％、４０％和５０％的动脉放血,并以５０％放血后等量输入生理盐水,使血液稀释．结果发现,随着失血度增加和红细胞压积的降低,动脉血压下降,等容稀释后动脉血压明显回升;心率随失血的增加出现先快后慢,等容稀释后变慢更明显．眼结膜微血管随失血量增加血速度变慢,等容稀释后明显加快．眼结膜微血管口径随失血量增加而变大,等容稀释后仍进一步变大．实验提示,急性失血红细胞压积在２５％左右,这时佐以等容血液稀释,保持正常容量,对机体无害而且是有益的．     

神经细胞死亡：新的杀手

神经细胞死亡：新的杀手对神经元而言,谷氨酸扮演着双重角色。一方面,它几乎是脑内最为重要的兴奋性神经递质,介导兴奋性信号的跨膜传递;而另一方面,在中风、脑损伤及神经退行性变时,谷氨酸又可作为兴奋性毒素大量涌入神经元,造成神经元的死亡。最近,对谷氨酸兴奋...     

人重组IL6／IL2融合蛋白的变性、复性及纯化

经超声破碎,分离已表达CH925包涵体,较系统地研究变性剂浓度、融合蛋白浓度对蛋白折叠的影响.在还原型及氧化型谷胱甘肽复性条件下,成功地将融合蛋白CH925折叠成具有IL6及IL2双活性蛋白,IL6的比活为2.3×10⁸U/mg, IL2比活为2.2×10⁶U/mg.经阴离子交换、凝胶过滤层析,获得一定纯度的CH925,配合反相HPLC.洗脱收集蛋白峰,CH925纯度为98%.