Bach1与Nrf2调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶对大鼠慢性阻塞性肺疾病的作用

为了探讨Bach1 (BTB and CNC homology 1)与红系衍生的核因子相关因子2（Nrf2）和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的表达变化在慢性阻塞性肺疾病（COPD）中的作用和意义,用气管内注入脂多糖及熏香烟的复合刺激法建立大鼠COPD 模型．观察两组大鼠的肺组织病理学改变,测两组大鼠的肺功能指标;应用免疫组化、Western印迹、原位杂交和逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）等方法检测Bach1与Nrf2及γ GCS 在两组大鼠的肺组织中的表达．结果显示,COPD组的肺功能指标（FEV_0.3、FEV_0.3/FVC%、PEF）明显恶化;光镜下肺组织病理改变符合COPD的特征性改变;γ GCS与Nrf2 的mRNA及蛋白质表达在COPD组大鼠肺组织中明显增强;而Bach1 mRNA及蛋白质在COPD组和对照组的表达无明显差别．且核/胞浆分离技术表明,Nrf2蛋白在对照组主要表达于胞浆,胞核中表达水平较弱,在COPD组胞浆、胞核均有表达,但是在胞核中的水平明显升高;Bach1蛋白在对照组主要表达于胞核中,胞浆中无明显表达,在COPD组主要表达于胞浆,胞核中无明显表达．相关性分析表明,γ-GCS mRNA与FEV_0.3、FEV_0.3/FVC%、PEF均呈负相关;Nrf2蛋白表达与γ GCS mRNA呈正相关;Bach1蛋白与γ GCS mRNA呈负相关．上述结果提示,Bach1与Nrf2和γ-GCS可能均在大鼠COPD的发病中发挥作用,且Bach1和Nrf2可能通过竞争性机制调控γ-GCS的表达,影响COPD的发生和发展．     

人IL-12和B7-1基因对HuPBL-SCID小鼠模型中人源肿瘤的协同抑制作用

人IL 12 (hIL 12 )对鼠源的免疫细胞作用较弱 ,进行hIL 12抗瘤研究缺乏有效的动物模型。为此利用荷人瘤的HuPBL SCID小鼠模型 ,将改良的Winnassay细胞免疫功能分析方法应用于评价hIL 12和hB 1协同抗瘤作用。用商业化的非脂质转基因试剂配制单独的hIL 12、hB7 1或hIL 12联合hB7 1的基因转染液。将上述三种基因转染液分别瞬时转基因入人恶性黑色素瘤A375细胞 ,转基因 30min后 ,按组别 (hIL 12组、hB7 1组、hIL 12 hB7 1组、rhIL 2对照组、HuPBL对照组和肿瘤对照组 )同人外周血淋巴细胞混合接种于SCID小鼠皮下 ,2 0天后处死实验小鼠 ,测得hIL 12和hB7 1的抑瘤率分别为 74 .0 6 %和 6 6 .98% ,联合作用达 93.4 0 % ,rhIL 2和HuPBL对照组无抗瘤作用。同时 ,在此模型上hIL 12联合hB7 1基因对人大肠癌LoVo和人肺癌SPC的抑制率分别为 98.37%和 97.39%。实验建立的各组HuPBL SCID小鼠 2 0天的外周血都含有人IgG(>0 .5mg/L)和极少量人CD3 淋巴细胞 (>0 .5个 /10 0个有核细胞 )。hIL 12、hB7 1和hIL 12 hB7 1组的瘤灶内人淋巴细胞浸润生长 ,肿瘤细胞残存 ,而rhIL 2和HuPBL对照组的瘤灶内人淋巴细胞“似团样”生长 ,肿瘤生长旺盛。表明此HuPBL SCID小鼠模型上的抗瘤机制为局部免疫反应。结果表明以此动物模型可跨     

丙型肝炎病毒复合高变区1模拟表位蛋白的免疫原性分析

将丙型肝炎病毒高变区1(HVR1)模拟表位融合基因插入原核表达载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,经亲和层析和凝胶过滤层析获得HCVHVR1模拟表位融合蛋白。用Westernblot和ELISA检测融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合情况。皮下注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清中的抗HCV抗体水平及其与天然HCV高变区1合成肽的交叉反应。结果表明融合蛋白能与HCV抗体阳性血清特异结合,融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合频率为71.6%(25/35)。融合蛋白免疫小鼠后能有效诱导免疫应答,其诱生的特异性抗体最高滴度达104(免疫后第8周),且该抗体能同2条天然HCVHVR1合成肽发生交叉反应。本研究提示,HCV复合HVR1模拟表位融合蛋白在丙型肝炎疫苗的研发中可能具有潜在应用价值。     

21个野生,培育及地方猪种免疫及生化遗传标记基因位点的遗传分化研究

分析了亚,欧,美,非２１个野生,培育及地方猪种４个免疫遗传标记基因位点（Ｅ,Ｆ,Ｇ,Ｌ系统）和３人生化遗传标记基因位点（Ｃｐ,Ａｍ和Ｔｆ）的遗传多态性,认为Ｅ＾ａｅｇ,Ｆ＾ａ,Ｔｆ＾ｃ基因在亚洲猪种与欧美猪种间存在显著差异,是亚洲猪种３个重要的遗传标记基因,根据Ｆ＾ａ基因频率在亚,欧,美,非猪种的变化规律分析了其基因流向特点,证明欧美猪的育种过程中利用了中国地方猪种的血缘,计算了所测猪种间的Ｎｅｉ     

基于贝叶斯权重估计方法估计浙江省古田山国家级自然保护区两栖爬行动物多样性

传统的两栖爬行动物多样性调查方法在进行野外实验时,常遇到抽样限制的问题,一些稀有物种可能无法在个体样本中被发现,由于存在相对较大的物种缺失,导致不同的研究结果差距较大,较难反映真实的物种多样性.因此,基于有限的调查和监测数据尽可能准确地估计生物多样性极其重要.本文于2017—2020年的每年秋季,采用视觉遇见法调查了4...     

中药夏枯草对人膀胱癌细胞FasL基因表达和侵袭能力的影响

目的:研究中药夏枯草对人膀胱癌细胞系T24细胞FasLmRNA表达及对其侵袭能力的影响.方法:根据MTT法得到中药夏枯草对T24细胞的半数有效抑制浓度(IC50),确定药物作用浓度.T24细胞分别经中药夏枯草不同浓度(0.5IC50、IC50)作用后,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测中药夏枯草作用前后人膀胱癌细胞系T24细胞FasL mRNA的变化;应用Transwell细胞侵袭试验检测中药夏枯草对T24细胞侵袭能力的影响.结果:中药夏枯草处理后较处理前T24细胞FasL mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05);而且FasL mRNA表达水平随中药夏枯草作用浓度增加显著上调,中药夏枯草不同浓度组比较均有显著性差异(P<0.05);随中药夏枯草作用浓度升高,T24细胞侵袭能力明显增强,不同浓度组比较均有显著性差异(P<0.05).结论:中药夏枯草在一定时间内均可上调人膀胱癌细胞系T24细胞FasL mRNA的表达,而且这种上调作用在一定范围内呈剂量依赖性,可使膀胱癌细胞的侵袭能力增强.     

防治扶桑绵粉蚧化学农药的筛选及其防治效果

为寻求防治扶桑绵粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley有效化学药剂,在室内测定了9种化学农药对该虫的致死效果,在此基础上,选出4种农药进行了田间防治试验.结果表明,室内条件下三氯杀螨醇、阿维菌素、阿维-氯氰、联苯菊酯4种药剂对成虫的校正死亡率在23.7%～66.7%之间,明显低于对1龄若虫的作用效齐果;高效氯氟氰菊酯、吡虫啉、啶虫脒和毒死蜱4种化学药剂,在田问施药后第5天的防治效果可达到91%以上,其中啶虫脒和毒死蜱的防治效果分别达到95.6%和98.2%.在防治应用中,建议推荐高效氯氟氰菊酯、吡虫啉、啶虫脒、马拉硫磷和毒死蜱5种药剂,同时应注意针对不同的虫态有必要适当调整用药浓度(就除害处理而言)和施药次数,以达到理想的防治效果.     

甘肃省尖山自然保护区维管植物区系研究

通过野外调查与资料整理,对尖山自然保护区维管植物物种组成和地理分布进行研究.结果表明:该区维管植物共131科592属1505种.其中,蕨类植物19科36属88种,裸子植物6科12属22种,被子植物106科544属1395种.该区维管植物优势现象明显,前十大科共703种,占该区维管植物总种数46.71％;寡种科和单种科以...     

黄土高原南部裸露坡耕地产流产沙试验研究

在黄土高原南部地区 ,通过人工模拟降雨试验 ,探讨了各因子对水土流失特征值的作用效应。结果表明 ,起流历时、径流模数主要受雨强和耕作措施影响 ;产沙模数主要受雨强和坡度影响。同时 ,建立了水土流失预报模型 ,在给定定义域的前提下 ,提高了方程的精度 ,并且为该模型在以后的应用增加了适用范围     

锌离子对鲜紫花苜蓿叶的护绿效果及技术优选研究

以鲜苜蓿叶为原料,采用硫酸锌常温处理、硫酸锌和醋酸锌高温处理、蒸馏水漂烫后醋酸锌常温浸泡处理,通过样品的外观颜色、过氧化物酶和多酚氧化酶活性、叶绿素含量综合评价不同处理的护绿效果,以筛选锌离子对鲜苜蓿最佳护绿技术.结果显示:(1) 不同浓度硫酸锌常温浸泡24 h后的紫花苜蓿叶绿素含量均显著高于对照,表现出显著护绿效果,并以0.10%浓度最佳,但处理样室温放置时比未处理对照加速褐变;(2)硫酸锌和醋酸锌的高温护色处理中,以0.05%醋酸锌溶液高温热烫2 min的苜蓿叶绿素含量最高.(3)新鲜紫花苜蓿高温漂烫后再用醋酸锌常温浸泡处理,以0.50%醋酸锌的护色液效果最佳,其样品在4℃冰箱中冷藏7个月后颜色仍为绿色,且叶绿素含量极显著高于对照和其它浓度处理. 研究表明,锌离子对紫花苜蓿叶有显著的护绿效果,并且以95℃蒸馏水热烫2 min后再用0.50%醋酸锌护色液常温浸泡24 h效果最好.