裂殖壶菌高产油突变体的高通量筛选

二十二碳六烯酸(DHA)具有促进婴幼儿大脑和视网膜发育等多种生理功能,被广泛应用于食品、医药和养殖等行业。为了获得适合于工业化生产的高产油、高产DHA的裂殖壶菌工程株,文中建立了一套操作简单、快速准确的基于尼罗红染色的高通量筛选方案。首先利用紫外线(UVC)诱变的方式快速构建裂殖壶菌的随机突变体库。然后采用优化后的筛选条件如裂殖壶菌的最佳尼罗红染色条件(二甲基亚砜浓度为20%,尼罗红终浓度为2.0μg/mL,孵育时间为10 min,孵育温度为40℃)和更合理的筛选依据(多功能酶标仪实现高通量测量的单位细胞密度油脂量)等,对3 648株突变体进行筛选,得到了3株高产油突变体(D03432、D05106和D01521)。摇瓶发酵实验表明,这3株突变体在生物量、油脂含量和DHA产量上均高于野生型菌株,其中突变体D03432和D05106的油脂量分别达到了干重的64.74%和63.13%,远高于野生型菌株的43.19%。而且这两株突变体的DHA产量分别是野生型菌株的2.26倍和2.37倍。最后,对突变体D03432和D05106进行了5 L发酵罐发酵培养,相较于野生型菌株,这两株突变体不仅生物量和油脂含量有所增加,而且DHA产量更是分别增加了45.5 1%和66.46%,展现出较好的工业应用潜力。此外,本筛选方案对其他产油微生物高产油突变体的高通量筛选具有借鉴作用。     

对肿瘤有抑制作用的假单胞菌新种——济南假单胞菌

1973年自山东省无影山表土中分离出一株革兰氏阴性杆菌(编号161)。它对小鼠的宫颈癌、肝癌和黑色素瘤有明显抑制作用;对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和微球菌也有拮抗作用。     

峨眉金线兰的生药鉴别

金线兰属植物形态相似，峨眉金线兰（Anoectochilus emeiensis）为金线兰（Anoectochilus roxburghii）的近缘种。调查发现，市场上常将峨眉金线兰当作金线兰使用，为区分两者，本试验采用生药学鉴定方法观察峨眉金线兰的原植物形态、组织构造及粉末显微特征；采用HPLC-ELSD法测定峨眉金线兰中主要内酯苷的含量。峨眉金线兰叶片为卵形，具有金红色网纹；花不倒置，唇瓣白色，前部裂片长圆状倒披针形，中部两侧各具1枚宽大长圆形的褶片且其边缘具疏锯齿。显微结构中，根茎横切面中皮层宽广，根木质部导管2~5个成束，茎木质部导管1~8个成束；叶横截面叶肉细胞中有大量红色物质，上表皮呈乳突状突起，下表皮气孔较多，气孔以不定式为主；粉末中可见草酸钙针晶和导管。3批峨眉金线兰中金线莲苷和斑叶兰苷（goodyeroside A）的含量分别为32.66~35.21 mg/g和134.41~137.72 mg/g，分别在100~500 μg/mL和200~1 000 μg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为100.51%（RSD=1.56%）和97.50%（RSD=1.54%）。以上特征可为峨眉金线兰的生药鉴别提供参考依据。     

近40年鄱阳湖区“三生空间”格局转型与空间异质机制

洞察快速城市化进程下三生空间的转型规律和空间异质驱动机制,是湖域地区生产生活方式“绿色化”转变和国土空间规划高质量发展的重要基础,对于地区国土资源优化配置和生态系统韧性建设具有重要意义。以鄱阳湖区为研究对象,基于1980—2020年土地覆被遥感影像数据,从“空间结构-分布格局-空间功能”演变视角分析鄱阳湖区三生空间格局转型规律,并定量识别环湖区、近湖区和远湖区格局转型的空间异质机制。结果表明：(1)近40年鄱阳湖区三生空间格局转型具有显著的空间动态异质性,生产空间持续聚焦于湖滨及河流沿岸平原区,生活空间向各城市建成区蔓延集聚,生态空间存续于湖域及边缘山区丘陵地带。县域尺度格局转型同样呈显著的差异化演进格局,其中生态空间的收缩趋势呈现出由环湖向远湖逐渐衰减的态势;(2)尽管以生态空间为主导的结构基本面未改变,但生态空间在生产和生活空间侵占下持续减损,突出表现为大规模水域和林地生态空间被农业生产、工矿和城镇建设空间侵占;(3)功能指数转型中持续呈现出由环湖区向远湖区的梯度变化过程,证实了三生空间功能转型“湖泊效应”现象的存在;(4)城市化和工业化是环湖区和近湖区三生空间格局转型的关键驱动因...     

脂肪干细胞与放射后成纤维细胞共培养模型的建立和lncRNA高通量测序

目的:探讨大鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对放射后成纤维细胞(fibroblast,Fb)的影响。方法:体外原代培养SD大鼠ADSCs和真皮Fb,分别对两种细胞进行鉴定,Fb辐照后两种細胞建立共培养模型。将Fb分为3组,对其进行lncRNA和mRNA转录本高通量测序。结果:ADSCs高表达CD29和CD44,低表达CD31和CD45。大鼠Fb高表达波形蛋白。Fb单纯辐照和干細胞干预后转录水平有明显的差异。结论:ADSCs能使辐射后的Fb細胞lncRNA和mRNA转录水平明显的改变,提示多项生物学功能及信号通路在其中发挥作用。     

罗丹明类荧光分子探针与血清白蛋白之间相互作用的研究

本研究旨在对罗丹明类荧光探针ZM-6与人血清白蛋白(HSA)的相互作用进行研究。采用了荧光光谱法、三维荧光光谱法、同步荧光光谱法以及CD光谱法在模拟生理条件下对二者的相互作用以及HSA的构象进行了研究。研究结果表明,探针与ZM-6之间的猝灭机理主要是静态猝灭方式。根据热力学数据确定了二者之间的作用力,类型为范德华力和氢键。二者之间的结合距离为4.45 nm。同时得出,ZM-6对HSA的构象产生了影响。此研究对于探针分子的设计以及修饰提供有效的数据以及理论支持。     

清开灵对小胶质细胞BV2缺氧再复氧损伤gp~(91phox)表达的影响

目的:建立小胶质细胞缺氧再复氧损伤模型,观察产生ROS的NADPH氧化酶的重要功能亚基gp91phox的表达变化及清开灵的干预作用,丰富清开灵基于解毒通络法以祛除内毒恢复脉络的作用内涵。方法:体外培养小鼠胶质细胞BV2,细胞分为正常组、模型组和清开灵高、中、低剂量组,在1%O2三气培养箱中缺氧12小时再复氧12小时模拟缺血再灌注损伤,正常对照组在培养箱中培养24小时,实时荧光定量PCR法检测gp91phoxmRNA的转录水平,Western blot法检测gp91phox蛋白表达。结果:缺氧再复氧损伤后,模型组gp91phox基因转录水平和蛋白表达提高(P0.05);与模型组比较,清开灵低、中、高剂量组都有明显改善作用,其中低剂量(0.0625%)对基因转录降低更明显,高剂量组(0.25%)对gp91phox蛋白表达的抑制更显著,具有统计学意义(P0.05)。结论:清开灵可通过降低缺氧再复氧后小胶质细胞gp91phox的表达,减少活性氧的产生而抑制脑缺血损伤氧化应激反应。     

小叶榕不同提取物的主要药效学研究

为研究小叶榕不同提取部位的镇咳、抗炎作用,采用氨水致咳小鼠动物模型、枸橼酸致咳豚鼠动物模型来评价小叶榕不同提取部位的镇咳作用;采用二甲苯滴耳廓致肿胀的小鼠动物模型、大鼠棉球肉芽肿动物模型来评价小叶榕不同提取部位的抗炎作用。结果表明:小叶榕醇沉不溶物能延长小鼠和豚鼠的咳嗽潜伏期,但不能减少咳嗽次数,小叶榕水提物、水提醇沉溶解物、大孔吸附树脂吸附洗脱物能延长小鼠和豚鼠的咳嗽潜伏期,并能减少咳嗽次数,其中水提醇沉溶解物镇咳作用最强;小叶榕醇沉不溶物不能减轻二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀的程度,能减轻大鼠棉球肉芽肿足跖肿胀的程度,但效果不明显,小叶榕水提物、水提醇沉溶解物、大孔吸附树脂吸附洗脱物均能明显减轻二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀的程度,并能明显减轻大鼠棉球肉芽肿足跖肿胀的程度。这表明国产小叶榕不同提取部位具有明显的镇咳、抗炎作用。     

不同激素对锦绣杜鹃的催花作用

在加温、补光条件下,研究赤霉素(GA3)、萘乙酸(NAA)和吲哚乙酸(IAA)处理对锦绣杜鹃花蕾发育、开花期及开花质量等的影响。结果表明:锦绣杜鹃花蕾经0～3000mg.L-1GA3涂抹后,其催花效果随处理浓度增大呈先升后降趋势,并于2000mg.L-1浓度下达到最佳,表现在花蕾发育快、开花期提前及开花质量高等;而0～3000mg.L-1NAA和IAA对锦绣杜鹃催花效果均不明显。锦绣杜鹃花蕾大小(包括长度和宽度)与开花期提前时间和花径之间均呈极显著正相关,与花蕾期则呈极显著负相关;花蕾期与开花期提前时间之间呈极显著负相关(P<0.01)。     

江苏省湿地被子植物新记录

通过野外调查和标本鉴定,发现江苏省湿地被子植物新记录7种1变种,分别为北美黄亚麻Linum medium (Planch.) Britton、毛龙葵Solanum sarrachoides Sendtn.、断节莎Cyperus odoratus L.、疣果飘拂草Fimbristylis dipsacea var. verrucifera (Maxim.) T. Koyama、海边月见草Oenothera drummondii Hook.、细花丁香蓼Ludwigia perennis L.、伞房花耳草Hedyotis corymbosa (L.) Lam.、水茫草Limosella aquatica L.,其中水茫草属Limosella L.为江苏省新记录属,北美黄亚麻、毛龙葵、断节莎和海边月见草4个种为江苏省外来归化植物新记录。凭证标本保存于江苏省中国科学院植物研究所标本馆(NAS)。