Selection of trkB-binding peptides from a phage-displayed random peptide library

Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) shows potential in the treatment of neurodegenerative diseases, but the therapeutic application of BDNF has been greatly limited because it is too large in molecular size to permeate blood-brain barrier. To develop low-molecular-weight BDNF-like peptides, we selected a phage-displayed random peptide library using trkB expressed on NIH 3T3 cells as target in the study. With the strategy of peptide library incubation with NIH 3T3 cells and competitive elution with 1 μg/mL of BDNF in the last round of selection, the specific phages able to bind to the natural conformation of trkB and antagonize BDNF binding to trkB were enriched effectively. Five trkB-binding peptides were obtained, in which a core sequence of CRA/TXΦXXΦXXC (X represents the random amino acids, Φ represents T, L or I) was identified. The BDNF-like activity of these five peptides displayed on phages was not observed, though all of them antagonized the activity of BDNF in a dose-dependent manner. Similar results were obtained with the synthetic peptide of C1 clone, indicating that the 5 phage-derived peptides were trkB antagonists. These low-molecular-weight antagonists of trkB may be of potential application in the treatment of neuroblastoma and chronic pain. Meanwhile, the obtained core sequence also could be used as the base to construct the secondary phage-displayed peptide library for further development of small peptides mimicking BDNF activity.     

小鼠肝炎病毒抗体检测试剂盒的标准化研究

目的筛选适合制备检测试剂盒的抗原组合。方法用 ＥＬＩＳＡ方法,将５株小鼠肝炎病毒（ＭＨＶ）抗原分别组合作为包被抗原,研究ＭＨＶ抗原不同组合与标准毒株抗体的反应性,分析ＭＨＶ各毒株间的差别,进一步比较不同组台抗原的灵敏性、特异性。结果通过对１９９７～１９９９年送检２３８只普通级实验小鼠检测,结果表明,ＭＨＶ的感染率虽有下降趋势,但感染率仍然很高（５９％～８７％）。结论我国分离的ＭＨＶ－ＨＵ７９株,在本次研究中表明能够用于ＭＨＶ抗体检测试剂盒。     

山地麻蜥越冬及其耐饥力的观察

据调查,徐州山地麻蜥的入蛰时间为１２月中旬;出蛰时间为翌年２月中旬,冬眠期为２个月左右。生活在丘陵山地的山地麻蜥是穴居在大石块下松土中过冬的。冬眠期的活动与温度高底有一定的关系。冬眠期山地麻蜥有较强的耐饥能力。     

德国景天在吉林市安家落户

德国景天（Ｓｅｄｕｍｈｙｂｒｉｄｕｍｃｖ．Ｉｍｍｅｒｇｒｕｎｃｈｅｔ）是景天科景天属的多年生肉质草本植物。１９９２年引种到吉林市进行栽培与应用研究,几年来的结果证明,它具有较强的绿化功能和观赏价值,是一种很好的地被植物,又是一种很有前途的造型植物。德...     

微生物原生质体融合育种技术及其应用

工业微生物菌种选育在发酵工业中占有重要地位。微生物原生质体融合(microbial protoplast fusion)技术具有重组频率高、受结合型或致育型限制小以及遗传物质传递完整等优点,是微生物育种最常用的方法之一。结合相关研究进展,分析了原生质体融合技术的组成,包括制备、再生、融合的影响因素以及融合子的筛选方法,重点评述了原生质体融合技术应用在微生物育种中的最新进展,以及微生物原生质体融合技术的发展前景。     

水世界的完美精灵——鱼龙

<正>海阔凭鱼跃,天高任鸟飞,恐龙帝国的天空大半由翼龙主宰,那么,又是谁主宰着龙宫呢?在广阔的海洋中,虽然有形形色色的鱼类畅游其间,但它们只是食物链的一个个中间环节。中生代的海洋爬行动物才是海洋的主宰,     

第九届亚太生物化工会议（APBioChEC，09）报道

2009年11月24日至29日,第九届亚太生物化工会议（AsiaPacifiCBiochemicalEngineeringConference2009．APBioChEC’09）在日本神户的神户国际会议中心隆重举行。来自中国、日本、中国台湾、韩国、印度、马来西亚、印度尼西亚、新加坡、瑞典、德国、澳大利亚、美国、新西兰、泰国等20多个国家和地区的550余位学者和学生参加了本次亚太生物化工盛会。     

直面澳大利亚恐龙大溃逃

晚白垩世早期,澳大利亚西部,这块神秘的大陆此时还未脱离南极板块,随着夏季的到来,气温逐渐升高,森林里再次充满了生机与活力。高大的杉木占领了森林的上层,树干上长着毛茸茸的苔藓植物。假山毛榉则拼命展开宽大的叶子,舒服地晒着太阳。毕竟,这长达数月的极夜,把植物们都憋坏了。     

抗山羊ΔfosB基因表达产物抗体的制备及应用

ΔfosB是fosB基因的自然截短型,稳定存在于许多组织中,在脂肪细胞和成骨细胞的形成和分化中起到重要作用。ΔFosB蛋白可能与钙在骨和乳腺中的代谢有关,并且调控钙从骨向乳腺转移的信号通路。将奶山羊的ΔfosB基因亚克隆到pET32a载体得到pET32a-ΔfosB原核表达载体,IPTG诱导其在大肠杆菌中表达,纯化融合蛋白免疫兔子制备多克隆抗体。ELISA检测显示抗体效价达1:51200,Western blotting结果显示制备的抗体能特异性检测原核表达的ΔFosB蛋白以及在HEK-293细胞中表达的ΔFosB蛋白。进一步的组织差异表达检测表明ΔFosB在山羊的乳腺、骨髓、脑髓、肌肉、心脏、肝和肺组织中均有表达。     

NL63冠状病毒木瓜样蛋白酶去泛素化酶活性和对宿主抗病毒天然免疫反应调节作用

引起人类呼吸道感染的冠状病毒已多达5种．冠状病毒与宿主相互作用决定了其致病性和免疫特性．冠状病毒感染后宿主会立即启动抗病毒天然免疫反应,而人类冠状病毒往往会编码特定蛋白逃逸或抑制宿主的天然免疫反应．NL63冠状病毒是一种新型人类冠状病毒,其非结构蛋白nsp3编码2个木瓜样蛋白酶(PLP)核心结构域PLP1和PLP2．前期研究发现,人类冠状病毒PLP2是一种病毒编码的去泛素化酶(DUB),但是对其DUB特性和功能还不清楚．研究发现,NL63冠状病毒PLP1和PLP2两个核心结构域中只有PLP2具有DUB活性,而且,PLP2的DUB活性对K48和K63连接的多聚泛素化修饰不表现明显特异性．同时,蛋白酶活性催化位点C1678和H1836突变后对其DUB活性有明显抑制作用,而蛋白酶活性催化位点D1849突变后对DUB活性无影响．其次,PLP2而非PLP1核心结构域能够明显抑制仙台病毒和重要信号蛋白(RIG-I、ERIS/STING/MITA)激活的干扰素表达,表明PLP2是一种冠状病毒编码的干扰素拮抗剂,而且PLP2的干扰素拮抗作用不完全依赖其蛋白酶活性．机制研究表明,PLP2能够与干扰素表达通路中的重要调节蛋白RIG-I和ERIS发生相互作用,通过对RIG-I和ERIS的去泛素化负调控宿主抗病毒天然免疫反应．此外,PLP2除利用DUB活性抑制干扰素表达外,很可能存在不依赖自身催化活性的其他组分共同抑制干扰素的产生．以上研究对阐明人类新发冠状病毒免疫和致病机理以及抗病毒药物研发具有重要参考价值．