曲霉无性发育及其与次级代谢相关性研究进展

曲霉(Aspergillus)是应用于工业生产的一类重要微生物,它与人类生活及医药卫生等方面密切相关。分生孢子的形成是曲霉无性繁殖的主要方式,它是个复杂的过程,需要多个基因参与调控,且分生孢子的形成与次级代谢产物的生物合成有密切的关系。本文综述了曲霉分生孢子形成的调控模式,简述了曲霉中连接无性发育和曲霉毒素生物合成的G-蛋白信号通路,及既参与发育调控又参与曲霉次级代谢调控的Velvet蛋白家族,可为其他丝状真菌的研究提供理论指导,对工业生产也有很重要的意义。     

川芎嗪对缺血心肌的保护及抗氧化作用的实验研究

研究川芎嗪的心肌保护及抗氧化作用机制。在心脏停跳液中加入川芎嗪后对离全兔心脏进行缺血再灌注,然后观察心肌线粒体内丙二醛（ＭＤＡ）含量、超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）活性及心肌组织超微结构损伤程度。发现含有川芎嗪的停跳液组丙二醛（ＭＤＡ）含量显著降低,超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）活显著升高,观察心肌组织超微结构损伤程度发现较轻,因此,川芎嗪对缺血心肌具有良好的保护脑抗氧化作用。     

对斜纹夜蛾高毒力的Bt新分离株及其特性的研究

对从德国禁止施用Bt杀虫剂地区的土壤中分离的18个Bt菌株,以斜纹夜蛾幼虫为靶子昆虫进行了筛选,结果表明,其中6个菌株对斜纹夜蛾有高毒性,当晶体蛋白浓度为4．5～5．0μg／ml时,48h的校正死亡率高达85％～90％,LD50范围为28．2～137.2μg晶体蛋白。对这6菌株的生化特性、鞭毛血清型以及质粒DNA的琼脂电泳图谱进行了研究。     

基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制剂在肾细胞癌组织中的表达

目的:基质金属蛋白酶及组织金属蛋白酶抑制剂在肾细胞癌转移中占有重要的作用,研究肾细胞癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的表达情况,为肾癌转移的治疗提供理论依据。方法:选取36例肾细胞癌肾组织标本,从相同的肾细胞癌组织及癌旁肾组织获得对照样本,均进行根治性肾切除手术切除。肿瘤分期按TNM分期标准。为了统计评估,肿瘤1期和2期为低级,3期以上为高级。RT-PCR检测肿瘤和正常组织中的MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的表达。结果:不同样本MMPs和TIMPs表达水平各不相同。肾细胞癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在肾细胞癌中的表达明显高于正常肾组织(P0.05)。在肾细胞癌的肿瘤分期方面,MMP-2与MMP-9和肿瘤的分期显著相关,随着肿瘤分期的增加,MMP-2与MMP-9的表达明显升高(P0.05),而TIMP-1与TIMP-2与肿瘤的分期无关。结论:肾细胞癌组织中TIMP-2、MMP-2,MMP-9,TIMP-1的mRNA表达显著高于正常肾组织,抑制MMPS的表达将成为治疗肾细胞癌转移的新的方向。     

Survivin与VEGF在良、恶性胃溃疡组织中的表达及研究

目的:研究凋亡基因生存素(Survivin)及血管内皮生长因子(VEGF)在良、恶性胃溃疡中的表达及二者在溃疡型胃癌中的表达与临床病理特征之间的关系,分析二者在胃癌发生发展中的作用和在胃癌中表达的相关性。方法:应用免疫组化S-P染色检测Survivin及VEGF在良性胃溃疡,胃溃疡伴中-重度不典型增生和溃疡性胃癌中的表达,结合临床病理特征进行相关分析。结果:Survivin及VEGF在良性胃溃疡中的表达率分别为16.2%、24.3%,在胃溃疡伴中-重度不典型中的表达率分别为52.3%、45.5%,在溃疡型胃癌中的表达率分别为71.4%、55.4%,差异具有显著性(P0.01);Survivin和VEGF的表达与溃疡型胃癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期具有相关性。Survivin和VEGF的表达亦呈正相关。结论:Survivin基因在溃疡型胃癌组织中的表达显著增高,是胃癌演变进程中的重要步骤,过表达Survivin可能提示预后不良。Survivin对胃癌的诊断及预后有潜在的应用价值。Survivin和VEGF在溃疡型胃癌的发生发展中起协同作用,动态随访二者对胃溃疡的演变可能有一定的价值,可作为判断肿瘤进程和浸润转移的生物学指标。Survivin及VEGF的联合检测可能对胃癌的综合治疗提供理论依据,对其进行深入研究有望为胃癌的诊疗开辟新的天地。     

白蚁链霉菌(Streptomyces termitum)ACT-2菌株拮抗物质的分离纯化、解析及活性分析

从浙江省金华市郊水稻田土壤中筛到1株拮抗水稻白叶枯病菌的白蚁链霉菌(Streptomyces termitum)ACT-2菌株。该菌株的菌体和发酵液对水稻白叶枯病菌均表现出较强的拮抗能力;水稻盆栽生防试验结果表明:对水稻白叶枯病有较好的防效,生防效果最高可达80.80%。通过分步萃取、硅胶柱层析、凝胶柱层析等步骤,分离纯化获得拮抗活性物质,对目标物进行核磁共振氢谱分析和质谱分析,通过解析与比对该目标物为Aloesaponarin II(1-甲基-3,8-二羟基蒽醌),分子式为C15H10O4。以氯霉素为对照,测定纯化的Aloesaponarin II对水稻白叶枯病菌拮抗活性,结果表明Aloesaponarin II具有较强的抗菌活性,半抑制浓度为IC50=19.2μg/mL,但较氯霉素弱(半抑制浓度为IC50=0.39μg/mL)。     

小鼠肺腺癌模型的建立及肿瘤病理分析

目的用乙基亚硝脲（ENU）在BABL/c小鼠建立肺腺癌模型并对ENU所诱发的肺腺癌进行病理观察。方法妊娠17d的SPF级母鼠腹腔接受ENU或缓冲液注射,在子代鼠的鼠龄满32周时收获其全肺标本,对肺组织进行常规石蜡半连续切片,HE染色,镜下观察肿瘤病理。结果 ENU经胎盘一次性诱发子代鼠多发性肺肿瘤形成,病理显示这些肿瘤为处于不同发展阶段的腺瘤和腺癌,腺癌的类型有细支气管肺泡癌样腺癌（雌性：5/6,雄性：4/6）和分化不等的腺癌（雌性：4/6,雄性：5/6）,诱癌频率在雌、雄性小鼠均为5/6,癌变频率在雌性16/43,雄性12/31。结论成功建立了小鼠肺腺癌模型,肿瘤病理的多样性提示癌变机制在分子水平的复杂性。     

不同浓度血府逐瘀汤含药血清对大鼠血管平滑肌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的观察不同浓度血府逐瘀汤含药血清对大鼠主动脉平滑肌细胞（VSMCs）增殖、迁移及侵袭的影响,以及其生成一氧化氮（NO）的情况。方法用MTT法观察VSMCs的增殖,Transwell小室法观察VSMCs的迁移、侵袭,并检测培养上清液一氧化氮（NO）的含量。结果与空白对照组比较,5%血府逐瘀汤组能显著促进VSMCs的增殖（P〈0.05）,20%,30%血府逐瘀汤组能显著抑制VSMCs的增殖（P〈0.05）;与空白对照组比较,培养48 h的培养上清液中,血府逐瘀汤组的NO水平有显著升高（P〈0.01）,且与血府逐瘀汤含药血清的浓度有剂量依赖关系。结论低浓度（〈10%）血府逐瘀汤含药血清有促进VASMCs增殖和迁移、侵袭的作用,高浓度（〉10%）血府逐瘀汤含药血清有抑制VASMCs增殖、迁移和侵袭的作用,其作用可能与上清液的NO水平有关。     

MicroRNA引起mRNA降解关键核酸酶CAF1和POP2的生物进化分析

MicroRNA(miRNA)参与调控高等真核生物中三分之一以上基因的表达,其中核酸酶CAF1(CCR4-associated factor 1)及其同源基因POP2在miRNA引发的mRNA 3′端多聚腺苷酸(poly(A))的脱腺苷酸化过程中起了关键作用.通过实时定量RT-PCR的方法检测了小鼠各个组织中CAF1和POP2的相对表达情况,发现CAF1和POP2的组织分布特征不同.大多数组织中CAF1的表达水平明显高于POP2,并且组织间差异很大,特别是在大脑、小脑以及睾丸组织中CAF1的表达量很高,而POP2的表达量和变化幅度都较低.蛋白质序列比对发现,CAF1和POP2是一类进化过程中高度保守的核酸外切酶,在酵母、线虫、果蝇和尾索动物代表物种海鞘中都只存在单一基因,而进化到鱼类后产生了两个同源基因——CAF1和POP2,其中CAF1的氨基酸序列保守性较POP2更高,更加接近于原始的单一序列.CAF1和POP2这一对同源基因氨基酸序列的主要差别在蛋白质的C端.鱼类中POP2的C端序列同CAF1的序列较为接近,而在爬行动物之后POP2产生了与CAF1具有明显差异的C端序列,并逐渐趋于稳定.我们的分析结果同已有的功能研究一致,表明可能在miRNA产生后的进化过程中产生了CAF1和POP2两个同源基因,其中CAF1主要担负miRNA调控mRNA脱腺苷酸化的功能,而POP2可能主要参与其它不同的调控作用。     

生物芯片研究进展

生物芯片是便携式生物化学分析器的核心技术。通过对微加工获得的微米结构作生物化学处理能使成千上万个与生命相关的信息集成在一块厘米见方的芯片上。采用生物芯片可进行生命科学和医学中所涉及的各种生物化学反应,从而达到对基因、抗原和活体细胞等进行测试分析的目的。生物芯片发展的最终目标是将从样品制备、化学反应到检测的整个生化分析过程集成化以获得所谓的微型全分析系统（ｍｉｃｒｏｔｏｔａｌａｎａｌｙｔｉｃａｌｓｙｓ－ｔｅｍ）或称缩微芯片实验室（ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｏｎａｃｈｉｐ）。生物芯片技术的出现将会给生命科学、医学、化学、新药开发、生物武器战争、司法鉴定、食品和环境卫生监督等领域带来一场革命。本文阐述了生物芯片技术在加工制备、功能和应用方面的近期研究进展。