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用基因重组及定位突变技术成功地构建了t·PA的Kl区缺失突变体t—PAdelKl、PAI-1结合位点缺失突变体t—PA del(296—302)及两者的组合突变体t—PA del(Kl·296—302),并在COS-7细胞中实现三者的暂时性表达,在cHO细胞中实现了t·PA deI(K1.296—302)的稳定性表达.对表达产物的生物学特性分析表明,t—PA del(296—302)及t-PA del(K1,296—302)获得了Pal-1抗性.因时t-PA del(K1.296—302)在大鼠体内的半衰期延长约5倍,而与纤维蛋白的亲和力只略有下降。因此,此组合突变体有可能成为优于野生t—PA的新型溶栓剂候选株. 相似文献
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已经从melanoma细胞系中成功地获得了人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)cDNA,在此基础上用双脱氧终止法测定了t-PAcDNA编码区全序列及3’非编码区部分序列,并发现与Pennica等发表的r-PAcDNA序列相比,有两处差异,其一是第1725位核苷酸残基为C而非A,并使此处序列与Pennica序列相比新产生一个StyI切点,但由于差异发生在密码子第三位,没有引起编码的氨基酸变化;其二是第 相似文献