细菌人工染色体的修饰及其转基因应用研究

细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)是一种新发展起来的DNA载体系统,它具有容量大、遗传特性稳定、易于操作等优点.广泛的应用于基因组文库构建、基因功能分析等方面.随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体进行有目的修饰已成为功能基因组学研究的一个重要环节.BAC载体转基因技术可能成为避开基因打靶获得高效表达的转基因生物的另一途径.本文介绍了BAC作为转基因载体的几种修饰方法及其在转基因研究上的应用.     

细菌人工染色体文库的构建方法分析

细菌人工染色体是一种承载大片段DNA的新型载体系统,它具有插入片断大、嵌合率低、遗传稳定性好、易于操作等优点.在高等生物基因组文库的构建和基因功能的分析等方面有广泛应用.BAC文库的构建是基因组较大的真核生物基因组学研究的重要基础.介绍了近年来细菌人工染色体文库构建方法上的研究进展,对其中载体的制备和高分子量DNA的制备这两个关键环节作了较深入的探讨.     

细菌人工染色体载体的发展和应用

细茵人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)是在大肠杆菌F质粒的基础上建成的高容量、低拷贝的质粒载体.BAC载体已广泛应用于基因组文库的构建及筛选、基因组测序、新基因的发现、图位克隆、BAC微阵列、转基因和动物品种资源保存等方面.本文综述了BAC载体的发展及其应用.     

流式细胞术研究细胞凋亡的方法与技术

细胞发生凋亡时,会伴随着一系列形态学、生物化学及分子生物学性质的变化,包括细胞皱缩,核染色质凝聚,细胞膜通透性改变,Caspases激活,线粒体跨膜电位降低,膜磷酯酰丝氨酸外化,胞质Ca2+浓度升高,DNA片段化及含量变化等特点.应用流式细胞术进行细胞凋亡的研究,对于探讨胚胎发育、衰老以及研究肿瘤的发生、发展和转化等病理生理过程和病毒感染及免疫等具有十分重要的意义.本文就细胞凋亡的特征、基于细胞膜功能的流式细胞术检测方法和基于细胞器功能的流式细胞术检测方法等关键性问题进行了阐述.     

动物乳腺生物反应器的应用与展望

应用转基因技术生产乳腺生物反应器可以获得高效、安全、足量的人类重组蛋白、药用蛋白及其目的蛋白.本文概述了制备转基因动物过程中目的基因选择、载体构建等技术环节的研究现状;通过叙述乳腺生物反应器的原理和应用现状来分析乳腺生物反应器的优势及特点,为乳腺生物反应器的发展和应用奠定理论基础.     

凋亡抑制基因Survivin与肿瘤的关系

Survivin是一种新的凋亡抑制蛋白,其具有抗凋亡的特征性结构。Survivin在肿瘤的发生发展中起重要作用,与肿瘤预后密切相关,有望成为一种广谱的肿瘤诊断标记物,并可能是抗肿瘤治疗的重要标靶。     

供体细胞的不同选择和处理对重编程过程的影响

摘要: 供体细胞核移入去核的卵母细胞后, 必定要经过表观遗传修饰的重编程过程, 回到胚胎开始发育的全能状态。若重编程过程不完全, 必定会导致克隆效率降低。但是, 体细胞核的重编程能力不仅仅是在其移入去核的卵母细胞后所体现, 它在不同的供体细胞当中的潜能也是不尽相同的。并且, 对供体细胞进行不同的处理, 也会导致其重编程的能力和程度不同。文章首先阐述了供体细胞的类型、代数、周期、年龄以及物种的不同选择对其核移植后重编程过程的不同影响, 其后又通过对供体细胞的冷冻保存, 血清饥饿以及不同试剂的处理等方面对重编程过程所起到的作用作出了概况性的论述与分析     

山东省地方绵羊品种微卫星遗传多态性

利用24个微卫星标记,分析了山东省内原有地方绵羊品种的遗传多样性.结果表明,在来自4个品种共71个种群的164只绵羊中,共检测到等位基因467个,有效等位基因占49.59％,不同微卫星基因座之间的等位基因数差异大于品种之间的差异;发现特有等位基因123个,优势等位基因43个.在所有微卫星基因座中,89％处于Hardy-Weinberg不平衡状态,有50％属于中性基因座.不同品种的微卫星基因座多态信息含量呈高度多态（PIC＞0.5）,Shannon指数较高（I＞1.5）,平均观察杂合度（范围0.454～0.560）明显低于期望杂合度（范围0.831～0.849）,证明4个地方绵羊种群具有丰富的遗传多样性和广泛的遗传基础,但品种内存在着一定程度的近交.聚类分析表明,山东地方绵羊品种遗传进化关系明确,可划分为鲁西地区的小尾寒羊和大尾寒羊、鲁东地区的山地绵羊和洼地绵羊两大类群,其遗传距离与地理分布距离相一致.     

中国绒山羊遗传多样性现状和系统发生关系的微卫星分析

为了调查中国绒山羊遗传资源现状, 作者应用联合国粮农组织和国际家畜研究所推荐的19对微卫星引物并结合荧光PCR技术, 对9个中国地方产绒山羊群体和1个西非山羊品种进行了遗传多样性检测。14个微卫星座位在10个山羊群体中显示为高度多态, 可作为山羊遗传多样性分析的有效标记。多态信息含量和遗传杂合度等数据表明: 目前中国地方产绒山羊群体的遗传多样性较为丰富, 并且大部分保种场较好地保存了这些地方资源。采用非加权配对算术平均法构建的聚类图和采用主成分分析法得到的散点图均显示, 中国山羊与西非山羊为不同的2类; 中国产绒山羊中河谷山羊、河西绒山羊与其他山羊的遗传距离较远; 其他山羊又大致分为2类: 一类由辽宁绒山羊、新疆山羊、柴达木山羊、陕北山羊组成, 另一类由内蒙古绒山羊组成。此研究结果为开展我国地方绒山羊种质特性研究及资源保护和利用提供了科学依据。     

边际多样性方法在中国猪种保护资金分配中的应用

农业动物种质资源面临着严重危机, 有必要构建一个科学、有效的保护方案, 合理分配有限的资金, 以期保护最大的多样性。本文应用边际多样性方法, 以中国18个地方猪种为例, 通过对灭绝概率、现实多样性、边际多样性和保护潜力的分析, 应用3种模型分析了未来群体期望多样性变化趋势, 并提出了相应的资金优化配置方案。在文中所涉及的模型中, 加性模型(Model A)被评定为资金优化配置的最佳模型; 共有10个品种获得保护资金, 其中杭猪获得最高比例(16％)的保护资金; 其次为赣中南花猪(万安猪)、嵊县花猪, 各获得14％; 阳新猪、乐平猪各获得11%; 五指山猪、玉山乌猪、赣中南花猪(冠朝猪)、清平猪、武夷黑猪和嘉兴黑猪分别获得10％、9％、9％、2％、2％和2％的保护资金。结果表明, 分配保护资金需综合考虑群体的受威胁程度、群体遗传多样性和经济重要性等。