长短日照下绍鸭性成熟时间,下丘脑GnRH-Ⅰ、POMC和NPY mRNA表达的差异

利用长日照和短日照环境调控绍鸭的性成熟时间,并采用反转录多聚酶链式反应（RT．PCR）方法,检测两种日照组（n=6）鸭性成熟过程中下丘脑促性腺激素释放激素-Ⅰ（GnRH-Ⅰ）、阿片促黑激素皮质素原（POMC）和神经肽Y（NPY） mRNA表达的发育性变化及日龄间差异。结果表明,长日照组性成熟时间较短日照组提前30d。RT-PCR结果显示,两组鸭下丘脑GnRH-Ⅰ mRNA的发育性表达模式相似,从出雏至性成熟过程中,其表达水平呈逐渐增加趋势;长日照组下丘脑GnRH．ImRNA表达丰度均高于同日龄短日照组,并于120日龄时其差异达显著水平。两组POMC mRNA的表达丰度呈现先增加后降低趋势,于性成熟前后显著下降;日照长度对其基因表达具有显著影响。两组NPYmRNA表达水平分别于60和90日龄时显著升高,于性成熟时显著下降,但光照对其基因表达无显著影响。下丘脑GnRH-Ⅰ基因表达的显著上调可能是禽类性成熟启动的关键因素,也是长日照条件下绍鸭性早熟的主要原因;GnRH-Ⅰ表达的上调与下丘脑POMC和NPY mRNA表达变化有关。     

半胱胺对断奶前后仔猪血清皮质醇、T3、T4和IL-2水平的影响

选取新生仔猪18窝,随机分为对照组和处理组各9窝。从12日龄开始,对照组饲喂基础乳猪料;处理组在基础乳猪料中添加半胱胺,剂量为120mg／kg饲料。两组仔猪均在35日龄断奶。分别于断奶前7d(28日龄,D28),断奶当天(D35),断奶后36h(D36．5)、72h(D38)、7d(D42)、10d(D45),随机选取对照组和处理组仔猪各6头,屠宰采集血样。采用放射免疫分析法测定仔猪血清皮质醇、三碘甲腺厚氨酸(T3)、甲状腺激素(T4)和白细胞介素-2(IL-2)水平。结果表明：(1)对照组血清皮质醇水平在断奶前保持稳定,在D36．5时升高,在D42时恢复至D35水平,随后保持稳定;处理组血清皮质醇水平在D36．5时较D35有升高趋势,在D38时恢复至D35水平,随后保持稳定。对照组血清T3水平在D36．5显著高于D28,其他日龄点间无显著差异,处理组基本保持稳定。对照组血清T4水平在D36．5时升高,在D38日时恢复至D35水平,随后保持稳定;处理组血清T4水平从D35至D45基本保持稳定。两组中血清IL-2水平在D28至D42保持稳定,D45升高。(2)在D36．5时,处理组血清皮质醇水平较对照组降低30％,处理组血清T3水平在D35和D45较对照组提高49．2％和38．6％,T4水平在D35和D45提高31％和45．8％,在其他日龄点,处理组T3、T4水平较对照组有升高趋势,但差异不显著。处理组IL-2水平在D36．5、D38、D45也分别较对照组提高22．1％、12．6％和17．8％,在其他日龄点有升高趋势。以上结果提示半胱胺能抵抗仔猪断奶应激,提高仔猪血清T3、T4水平,增强仔猪的免疫力。     

早期和后期限饲对肉鸡腓肠肌肌纤维类型和生长轴相关基因表达的影响

1日龄三黄雏鸡随机分为自由采食对照组(C)、1-14日龄隔日饲喂的早期限饲组(ER)和50-63日龄隔日饲喂的后期限饲组(LR)。63日龄采腓肠肌外侧头,ATPase染色法及相对定量RT-PCR法检测不同类型肌纤维含量及生长轴相关基因(GHR、IGF-I、IGF-IR)表达。结果表明:E组慢肌纤维含量降低,快肌纤维含量增加,L组无变化。E组慢肌肌球蛋白重链基因表达低于对照组(P<0·05),并伴随生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-ⅠR)mRNA表达的上调(P<0·05),L组无显著变化。提示:早期限饲可对肉鸡生长和肌纤维类型产生长期而且显著的影响,并且涉及肌肉中生长相关基因表达的改变,而后期限饲对肉鸡影响较小,说明早期和后期限饲通过截然不同的机制影响肉鸡肌肉生长。     

胰岛素对小鼠胚胎印迹基因Igf2/H19甲基化水平和表达的影响

探讨胰岛素对小鼠早期胚胎体外发育影响的分子机理.将小鼠2细胞胚胎培养于KSOM+0.25 μg/ml胰岛素培养基内,发育至桑椹胚和囊胚.提取桑椹胚和囊胚的总RNA和DNA.实时定量PCR分析,实验组桑椹胚Igf2 mRNA表达是对照组的4.7倍,H19表达是对照组的5.7倍;实验组囊胚Igf2 mRNA表达是对照组的1.8倍,而H19表达量是对照组的2.3倍;BSP测序法分析Igf2/H19印迹控制区的甲基化水平,实验组桑椹胚、囊胚的甲基化率分别为7.3%和32.3%,分别比对照组下降86.4%和35.4%.结果显示,胰岛素降低植入前胚胎Igf2/H19印迹控制区DNA甲基化的水平,从而使Igf2和H19基因表达升高.     

绵羊皮肤中GHR、IGF-1和IGF-1R基因表达的发育性变化及品种特点

采用相对定量反转录多聚酶链式反应 (RT-PCR)方法, 以18S rRNA作内标, 研究了罗米丽(Romilly Hillys)×中国美利奴(新疆军垦型)杂交一代优质细毛羊和哈萨克粗毛羊皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R) mRNA发育性变化并进行了品种间比较。分别于30、60、90、135、180和255日龄称重、采毛样, 并于30、90、135和255日龄采皮样。结果表明: 粗毛羊和细毛羊体重、羊毛生长的发育模式没有明显的差异, 30~135日龄体重迅速增加, 135~255日龄增重十分缓慢; 30~135日龄羊毛日增长逐渐增加, 135~180日龄羊毛生长十分缓慢, 而180~255日龄又上升到较高水平。粗毛羊皮肤中GHR mRNA在30~90日龄显著增加 (P<0.05), 90日龄达到高峰, 此后显著下降(P<0.05); 细毛羊在135日龄时GHR mRNA极显著地升高(P<0.01), 此后又极显著地下降。粗毛羊皮肤中IGF-1、IGF-1R mRNA 30~90日龄上升, 90日龄之后极显著下降(P<0.01); 细毛羊皮肤中IGF-1、IGF-1R mRNA出生时较高, 然后逐渐下降。品种之间比较, 细毛羊GHR mRNA出现高峰晚于粗毛羊, 135日龄高峰时显著地高于粗毛羊; 粗毛羊IGF-1、IGF-1R mRNA在90日龄出现高峰, 并极显著或显著地高于细毛羊; 粗毛羊90日龄前GHR、IGF-1和IGF-1R mRNA高于细毛羊, 之后低于细毛羊。结果提示: 绵羊皮肤中GHR、IGF-1和IGF-1R基因表达有特定的发育模式, 并存在品种差异。     

猪肌红蛋白基因表达的发育性变化及品种、性别特点

试验动物选用生长速度慢的肥胖型猪二花脸猪与生长速度快的瘦肉型猪大白猪,分别于3、20、90、120和180日龄随机屠宰大白猪公猪和二花脸公、母猪各4头,采集背最长肌样品。采用反转录―聚合酶链式反应（RT-PCR）法,以18S rRNA为内标,定量分析背最长肌中肌红蛋白（myoglobin,MB）基因表达的发育性变化,并进行品种和性别间比较。结果显示,两品种猪背最长肌MB mRNA的表达呈现不同的发育模式。3日龄时,MB mRNA 表达无论在大白公猪还是二花脸公猪均处在较低水平,之后两品种出现分歧。大白猪3日龄后MB mRNA 表达无显著变化;而二花脸在20日龄有显著的升高（P<0.01）,之后维持此高水平表达。因此,两品种3日龄时MB mRNA水平无显著差异,20到180日龄,二花脸公猪显著高于大白公猪（P<0.01或P<0.05）。性别间,二花脸公猪和母猪MB mRNA水平在120日龄前无显著差异,180日龄时二花脸公猪极显著高于母猪（P<0.01）。