下调CENP-E对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的:探讨有丝分裂检查点蛋白着丝粒蛋白-E(CENP-E)基因在肿瘤发生发展中的作用。方法:利用shRNA下调CENP-E基因的表达,分别用巢式PCR和Western blot检测CENP-E mRNA和蛋白的表达;MTT检测CENP-E下调后MCF-7细胞的增殖变化;流式细胞术检测CENP-E下调后对MCF-7细胞凋亡的影响;Transwell试验检测MCF-7细胞的迁移和侵袭能力变化;间接免疫荧光检测细胞内CENP-E蛋白和有丝分裂情况。结果:shRNA能有效抑制CENP-E mRNA和蛋白的表达。MTT结果显示CENP-E下调后MCF-7细胞的增殖能力减弱(P<0.05);流式细胞术显示下调CENP-E后能促进MCF-7细胞的凋亡;间接荧光结果显示CENP-E干扰后MCF-7细胞内CENP-E蛋白减少并伴有核分裂异常;Transwell试验显示CENP-E干扰组细胞的迁移和侵袭能力增强(P<0.05)。结论:下调部分CENP-E的表达能抑制MCF-7细胞的增殖,促进MCF-7细胞的凋亡,增强MCF-7细胞的迁移和侵袭能力。     

提取法生产氨基酸的最新技术进展

对提取法生产氨基酸的工艺路线、技术状况、工艺设备及我国采用提取法从毛发中生产氨基酸行业的最新技术进展进行了总结和展望。     

难治性抑郁症治疗前后血浆单胺类神经递质代谢产物的变化

目的：探讨难治性抑郁症患者抗抑郁剂治疗前后的单胺类神经递质代谢产物的改变。方法：随机入组30例难治性抑郁症患者,进行汉密尔顿抑郁量表（HAMD）的临床评定。用酶联免疫吸附方法对这30例患者进行5-HIAA,MHPG检测,并与随机选取的经汉密尔顿抑郁量表（HAMD）临床评定的30名普通抑郁症患者进行比较。综合治疗8周后对难治性抑郁症患者进行治疗前后对比。结果：难治性抑郁症组治疗前血浆5-HIAA,MHPG浓度低于普通对照组（p〈0.05）,经5-羟色胺重摄取抑制剂治疗的难治性抑郁症患者,5-HIAA和MHPG含量与治疗前比较均有所升高,差异有显著性（p〈0.05）;结论：难治性抑郁症患者存在中枢5-羟色胺和去甲肾上腺素功能低下;个体化合理使用SSRIs类药物辅以心理治疗能有效地提高难治性抑郁症患者的外周单胺类递质水平,减轻患者的抑郁程度。     

拔除阻生智齿患者牙科焦虑的调查及分析

目的：了解综合医院口腔科拔除阻生智齿患者牙科焦虑的患病情况并进行相关因素分析。方法：采用牙科焦虑一般因素调查表、改良牙科焦虑量表（MDAS）及状态焦虑量表（S-AI）对300例口腔颌面外科门诊的拔除阻生智齿患者进行调查及评定,同时对引起牙科焦虑的相关因素进行分析。结果：拔除阻生智齿患者牙科焦虑的发生率为56.00%,有6项因素对牙科焦虑症的患病率有影响,差异有统计学意义（P〈0.05）,其中5项因素对MDAS得分影响较大。结论：牙科焦虑在拔除阻生智齿的患者中较普遍,有多种因素影响患者牙科焦虑的程度。     

难治性抑郁症治疗前后血浆单胺类神经递质代谢产物的变化

目的:探讨难治性抑郁症患者抗抑郁剂治疗前后的单胺类神经递质代谢产物的改变。方法:随机入组30例难治性抑郁症患者,进行汉密尔顿抑郁量表(HAMD)的临床评定。用酶联免疫吸附方法对这30例患者进行5-HIAA,MHPG检测,并与随机选取的经汉密尔顿抑郁量表(HAMD)临床评定的30名普通抑郁症患者进行比较。综合治疗8周后对难治性抑郁症患者进行治疗前后对比。结果:难治性抑郁症组治疗前血浆5-HIAA,MHPG浓度低于普通对照组(p<0.05),经5-羟色胺重摄取抑制剂治疗的难治性抑郁症患者,5-HIAA和MHPG含量与治疗前比较均有所升高,差异有显著性(p<0.05);结论:难治性抑郁症患者存在中枢5-羟色胺和去甲肾上腺素功能低下;个体化合理使用SSRIs类药物辅以心理治疗能有效地提高难治性抑郁症患者的外周单胺类递质水平,减轻患者的抑郁程度。     

FRD特殊染色技术在宫颈疾病筛查中的结果分析

目的:研究FRD特殊染色技术(FRD)在宫颈疾病筛查中的结果情况,为临床诊疗提供依据。方法:选取2015年5月到2016年5月我院就诊宫颈疾病筛查者306例,对所有患者进行FRD和液基细胞学检测,两种检测有一项提示阳性则行阴道镜病理检测,以病理检测为标准,比较两种检测方法诊断价值。结果:宫颈癌前病变和宫颈癌筛查中两种检测方法敏感度分别为87.6%、84.0%,特异性分别为69.0%、63.3%,诊断符合率分别为79.7%、75.8%,阳性预测值分别为79.2%和78.4%,阴性预测值分别为81.7%和71.4%,Kappa值为0.56和0.48,比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:FRD与液基细胞学检测筛查宫颈癌前病变和宫颈癌效果相似,但是FRD操作简便,值得在临床上应用。     

亚慢性亚毒性有机磷酯类杀虫剂抑制抗氧化酶而致兔血管内皮功能损伤

有机磷酸酯类(OPs)是全球最广泛使用的杀虫剂之一．其除了抑制胆碱酯酶(AChE)活性外, 也抑制对氧磷酶(PON1)的活性．其急性中毒主要与抑制AChE有关．最近,OPs 对PON1的影响已引起学术界广泛关注．因为PON1除了有水解OPs的功能外,也有抗低密度脂蛋白(LDL)氧化和降解LDL中的脂质过氧化物的作用．因为血管内皮功能损伤是动脉粥样硬化形成的起始步骤．将探讨OPs对血管内皮功能的影响作为研究目的．研究结果表明,连续每天给兔灌胃敌百虫(18 mg/kg)70天,可导致其离体血管内皮依赖性舒张(EDR)反应和eNOS活性显著性降低,血浆超氧化物岐化酶活性、一氧化氮水平、PON1 和AChE 活性降低,脂质过氧化代谢产物丙二醛水平增加．OPs的活性成分——对氧磷在体外与兔胸主动脉环直接孵育也能浓度和时间依赖性地显著抑制EDR．研究结果提示,亚慢性-亚毒性剂量的敌百虫灌胃或对氧磷与离体血管环直接孵育,均可导致兔血管内皮功能损伤,其机制可能与OPs抑制氧化酶和诱发氧化应激反应有关．     

利用DNA免疫技术制备SAX蛋白多克隆抗体

骨形态发生蛋白(BMP)属于细胞因子和转化生长因子β(TGF-β)超家族,在胚胎形态发生和器官形成中起重要作用,但目前缺乏BMP信号通路I型受体SAX的各类抗体。本文利用果蝇胚胎提取出总RNA,反转录得到cDNA,将其作为模板通过PCR得到sax基因片段,将片段连接到pCAGGS-P7上,构建成重组质粒pCAGGS-P7-sax。采用质粒DNA免疫技术,免疫了BALB/C小鼠,制备了果蝇SAX蛋白多克隆抗体。进一步分析表明,构建的真核表达重组质粒pCAGGS-P7-saxDNA具有良好的免疫原性,在免疫小鼠后所获得的抗血清抗体效价达1∶100。Western blot和果蝇胚胎免疫荧光检测表明,抗血清能特异型地识别SAX蛋白。果蝇SAX抗体的成功制备为进一步研究sax基因及BMP信号在果蝇心脏发育中的作用奠定了基础。     

C-myc通过调控BubR1影响食管鳞癌细胞对紫杉醇的敏感性

探讨C-Myc与有丝分裂期检查点蛋白BubR1的表达关系和对紫杉醇药物作用的可能影响.用免疫组化方法检测23例食管鳞癌组织标本中C-Myc和BubR1的表达水平,并通过免疫印迹的方法比较3株食管鳞癌细胞株ECA-109,KYSE150和KYSE180中C-Myc和BubR1的表达高低,分析相关性;将人BUB1b基因启动子上游约2000bp片段插入pSEAP2分泌型碱性磷酸酶报告质粒中构建为pSEAP2-BubR1-P2000,分别转染至3株鳞癌细胞内,检测启动子激活效果;在ECA-109细胞内过表达C-Myc后再转染pSEAP2-BubR1-P2000后,检测启动子的激活效果;免疫印迹方法检测C-Myc抑制剂10058-F4对BubR1蛋白表达的影响;通过MTT检测10058-F4干扰C-Myc后ECA-109细胞在梯度紫杉醇浓度下的生存率变化;最后通过DAPI染色观察单用C-Myc抑制剂,单用低浓度紫杉醇(100nM)或联用10058-F4和紫杉醇组的凋亡比例.结果发现在临床食管鳞癌标本和食管鳞癌细胞株中C-Myc和BubR1的表达有相关一致性;C-Myc高表达的细胞株中BubR1启动子活性的激活程度更强,并且过表达C-Myc后能进一步上调启动子活性;C-Myc特异性抑制剂10058-F4可以有效下调BubR1表达,并减低细胞在梯度紫杉醇作用下的细胞生存率.DAPI染色结果显示联用10058-F4和低浓度紫杉醇能明显增加细胞处于有丝分裂期的比率.在食管鳞癌细胞中C-Myc能上调有丝分裂期检查点蛋白BuR1的水平,并与食管癌对紫杉醇的敏感性相关,C-Myc可能通过上调BubR1表达而减低食管鳞癌对紫杉醇的反应.     

吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制

目的:探讨吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制.方法:14只C57BL/6小鼠随机分为对照组和吸烟组.吸烟组小鼠被动吸烟8周后,检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)浓度.采用液体闪烁计数法分别检测对照组小鼠血清、吸烟组小鼠血清、吸烟组小鼠血清+N-乙酰半胱氨酸(NAC,2mM)介导的细胞胆固醇流出效率.结果:与对照组相比,吸烟组小鼠血清中HDL-C显著降低,TG显著升高,TC和LDL-C无显著差别,并且吸烟组小鼠血清中MDA水平也显著升高.吸烟组小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出效率明显降低,给予抗氧化剂NAC共同孵育可以显著增加吸烟组小鼠血清胆固醇流出效率.结论:吸烟显著降低小鼠血清介导的巨噬细胞胆固醇流出效率,其机制可能与吸烟降低HDL-C水平以及促进HDL脂质过氧化有关.