TNF-α、IL-1β及LPS对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达的影响及作用机制研究

通过ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定检查ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因表达及ＮＯ生成的影响．结果表明,ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ均能显著诱导ＶＳＭＣｉＮＯＳ基因表达和促进ＮＯ生成,其作用强度与浓度和作用时间有关;双因素（ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ,ＬＰＳ＋ＩＬ－１β）对诱导ｉＮＯＳ基因表达及ＮＯ生成产生协同作用．ＰｏｌｙｍｙｘｉｎＢ和地塞米松可部分抑制ＴＮＦ－α对ｉＮＯＳ基因表达的诱导作用及ＮＯ生成     

内皮素cDNA片段的分离及测序

<正> 自从Yanagisawa等报道内皮素(Endothelin, ET)是体内最强的缩血管多肽以来,ET的生物学意义及其表达调控机制日益引起人们的重视。已发现,组织缺血缺氧、循环儿茶酚胺浓度升高以及血管紧张素Ⅱ、加压素和钙离子载体等多种使细胞内Ca~(2+)浓度增加的因素均     

SM22α:血管平滑肌细胞分化的分子标志

SM22α是一种分化型血管平滑肌细胞(VSMC)的标志基因,编码一种22kDa的收缩调节蛋白。由于SM22α基因结构短小,表达具有VSMC特异性、调控机制较为清楚,因而被广泛用于VSMC发育分化的研究。利用该基因的表达调控特征,设计可在VSMC中高表达目的蛋白的人工启动子,是心血管病基因治疗的新策略。     

同源异型盒基因对血管平滑肌细胞的调控作用

同源异型盒基因是一类对生物体的生长、发育和分化从时间和空间上进行协调的调控基因。构成血管中膜的血管平滑肌细胞表型具有极大的可塑性。在一些病理性血管重构时,血管平滑肌细胞可发生表型调变,从分化型调变为去分化型,具备增殖和迁移能力。在此过程中,多种同源异型盒基因的表达发挥了重要的调控作用。现就同源异型盒基因与血管平滑肌细胞的表型调变、增殖和迁移的关系等方面的研究进展作一综述。     

一种新发现的肌特异基因表达调节因子:心股素

心肌素是一种新发现的特异性调节心肌和平滑肌基因表达的蛋白因子,与血清效应因子(SRF)一起构成肌细胞分化分子开关的组成成分.心肌素在胚胎及成年心肌和平滑肌细胞中均进行表达,是这两类细胞基因特异性表达及分化所必需的转录激活因子.本文就心肌素的结构特征及其调节肌特异基因表达的分子机制进行综述.     

hhlim促进DMSO诱导的P19细胞向心肌分化

为了确定hhlim是否参与胚胎期的心肌分化和发育过程,用可表达hhlim蛋白和hhlim反义RNA的真核表达质粒转染P19胚胎干细胞,经G418筛选得到稳定表达hhlim和hhlim反义RNA的P19细胞克隆后,观察hhlim对P19细胞向心肌分化和发育的影响.结果显示,Nkx2.5和GATA-4在未被外源性hhlim基因转染的P19细胞中不表达.DMSO刺激细胞2天后,GATA-4开始表达,3天后Nkx2.5的表达活性显著升高.hhlim的过表达不但有利于P19细胞的存活和生长,而且还可以使Nkx2.5和GATA-4的表达比对照细胞提前1天.反义hhlim细胞株被DMSO诱导5天后,细胞仍呈集落化生长.同时,Nkx2.5和GATA-4开始表达的时间明显延滞.结果表明,hhlim能促进P19细胞向心肌细胞分化,其作用是通过促进转录因子GATA-4和Nkx2.5的表达而实现的.     

重组人EPO真核表达质粒在大鼠骨骼肌中的表达及其对贫血的治疗作用

目的和方法构建ＥＰＯ真核细胞表达载体（ｐｃＤ２ＥＰＯ）,用缝线法和注射法将其直接导入肾性贫血大鼠股四头肌,观察ＥＰＯ在骨骼肌细胞中的表达及其对贫血的治疗作用。结果：ｐｃＤ２ＥＰＯ导入股四头肌２周后,骨骼肌细胞内出现ＥＰＯｍＲＮＡ,提示被导入的ＥＰＯ基因在肌细胞内得到表达。贫血动物被治疗１周后,缝线组和注射组动物的ＨＧＢ和ＲＢＣ均显著升高;在第３周,缝线组的ＨＧＢ和ＲＢＣ接近健康大鼠的水平;至第４周,两个治疗组的ＨＧＢ和ＲＢＣ仍显著高于对照组。结论：经缝线法导入的ｐｃＤ２ＥＰＯ在骨骼肌中的表达效率及对贫血的治疗效果明显高于直接注射法,而两种治疗方法对改善肾性贫血动物肾脏清除ＢＵＮ的功能无明显差异     

血管再狭窄发生过程中MMP-2基因表达与胶原转换的动态变化

建立主动脉内皮剥脱后血管再狭窄大鼠模型,用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹分析、含明胶ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、羟脯氨酸含量测定及流式细胞术动态观察血管再狭窄发生过程中ＭＭＰ－２基因表达与胶原转换及血管细胞增殖之间的关系．实验结果表明,血管内皮剥脱后,ＭＭＰ－２基因表达被显著诱导,ＭＭＰ－２活性及胶原转换明显增高,在第７ ｄ,ＭＭＰ－２表达活性及胶原合成与降解均达到峰值;第２１ ｄ,ＭＭＰ－２表达恢复正常,胶原合成和降解仍维持在较高水平．流式细胞分析结果显示,血管内皮剥脱后进入增殖状态及发生凋亡的细胞显著增加,增殖细胞所占比例高于凋亡细胞,且两者均随内皮损伤后的时间延长而增加．     

红细胞生成素基因在大鼠体内的表达及表达产物的生物学效应

红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ,ＥＰＯ）是一种由胎儿肝脏和成人肾脏产生的多肽类生长因子,在体内的表达具有严格的组织特异性,因此,慢性肾病所引起的贫血常常难以得到有效的治疗．随着基因治疗技术的不断成熟与完善,尤其是近年一些实验室先后发现质粒...     

蛋白磷酸酶

神经和激素对细胞代谢的调节机能主要是通过控制蛋白激酶和(或)蛋白磷酸酶(proteinphosphatase,PrP)的活性,使代谢途径中的调节酶发生可逆磷酸化。生物合成途径中的限速酶,如糖原合成酶、乙酰CoA羧化酶和HMG-CoA还原酶等在蛋白激酶作用下活性降低,而PrP则将这些酶重新激活。反之,磷酸化激活生物降解途径中的限速酶,如糖原磷酸化酶和甘油三酯脂酶等,则脱磷酸又使其失去活性。