基于银染增强的纳米金探针定量检测microRNA

MicroRNA是一类存在于动植物体内的重要的、序列高度同源的基因表达转录后调节因子,近来对microRNA不同表达模式和调节作用的研究要求能够快速、灵敏、特异地检测痕量microRNA的方法．利用纳米金银染增强技术建立了一种简单快速的microRNA定量方法,以纳米金标记的寡核苷酸分子作为信号探针,以生物素标记寡核苷酸分子作为捕获探针,经链霉亲和素-生物素作用将靶序列捕获在固相载体酶标孔上,继而通过纳米金催化的银染增强放大效应产生高灵敏的识别信号,记录其吸光度值从而实现microRNA分子的定量．用该方法检测小鼠肝脏,脑组织中miR-122a和miR-128各自的含量及合成miR-122a,结果表明其在良好的线形范围(10 pmol/L～10 fmol/L)内最低检测限为10 fmol/L,能够特异地区别单核苷酸错配的靶microRNA．     

AM真菌对重金属污染土壤生物修复的应用与机理

土壤重金属污染威胁人类健康和整个生态系统,而高效、低耗、安全的生物修复技术显示出了极大的应用潜力,特别是利用植物-微生物共生体增强生物修复效应的应用.丛枝菌根(Arbuscular Mycorrhizae,AM)真菌是一类广泛分布于土壤生态系统中的有益微生物,能与90％以上的陆生高等植物形成共生体.研究发现,AM真菌能够增强宿主植物对土壤中重金属胁迫的耐受性.当前,利用AM真菌开展重金属污染土壤的生物修复已经引起环境学家和生态学家的广泛关注.基于此,围绕AM真菌在重金属污染土壤生物修复作用中的最新研究进展,从物理性防御体系的形成、对植物生理代谢的调控、生化拮抗物质的产生、基因表达的调控等角度探究AM真菌在重金属污染土壤生物修复中的作用机理,以期为利用AM真菌开展重金属污染的生物修复提供理论依据,并对本领域未来的发展和应用前景进行了展望.     

环渤海红条毛肤石鳖种群遗传多样性研究

以线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)为遗传标记分析了环渤海红条毛肤石鳖Acanthochiton rubrolineatus 9个种群的遗传多样性及遗传结构。126只个体经PCR扩增测序获得654 bp的COⅠ基因序列,41个多态位点产生29种单倍型,单倍型多样性为0. 899±0. 013,核苷酸多样性为0. 013 3±0. 006 8。种群遗传多样性与纬度(r=-0. 808,P <0. 05)及年平均温度变异系数(r=-0. 795,P <0. 05)呈显著负相关,表明红条毛肤石鳖适应低纬度及温度稳定的海洋环境。分子方差分析表明,遗传变异主要发生在种群内(83. 26%,P <0. 001)。系统发生树与单倍型网络图没有呈现明显的谱系地理结构。种群历史动态结果显示,红条毛肤石鳖在早更新世晚期(第二温暖期)间冰期经历了种群扩张。     

上转换纳米颗粒在肿瘤诊断与治疗中的研究进展

上转换纳米颗粒具备光学/化学稳定性高、生物毒性低、荧光寿命长及激发光生物组织穿透深度较大等显著优点,近年来在生物传感、生物成像和疾病治疗等生物医学领域的研究和应用获得了广泛的关注。本文中,笔者就稀土元素掺杂的上转换纳米颗粒在肿瘤的诊断与治疗方面的研究现状及进展进行综合概述,主要对其在光动力疗法(PDT)、光热疗法(PPT)、化学联合疗法及多模态诊疗一体化等方面的研究展开分析和讨论,为上转换纳米颗粒的进一步研究开发及临床应用提供新的参考方向及思路。     

响应面法优化超声辅助提取宣木瓜总皂苷提取工艺研究

对宣木瓜总皂苷的超声辅助提取工艺优化进行研究.在单因素试验基础上,选择提取时间、温度、乙醇浓度和料液比为自变量,以宣木瓜总皂苷得率为响应值,采用Central Composite Design试验设计方法,研究各自变量及其交互作用对宣木瓜总皂苷提取率的影响.利用Design Expert软件得到回归方程的预测模型并进行响应面分析,确定超声辅助提取宣木瓜总皂苷的最佳条件为时间61.69 min,温度62.34℃,乙醇浓度70.49％,料液比1∶30.57 g/mL,在此条件下,总皂苷提取率达到1.55％.验证实验表明,所得模型方程能较好地预测实验结果.     

孤雌产雌生殖品系松毛虫赤眼蜂产卵强度 对Wolbachia诱导的其生殖表型的影响

【目的】松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi是一种用于鳞翅目害虫生物防治的重要卵期寄生蜂。本研究旨在明确孤雌产雌生殖品系松毛虫赤眼蜂的产卵强度对其体内Wolbachia滴度及Wolbachia诱导的孤雌产雌生殖表型的影响。【方法】在室内调查了3个处理组松毛虫赤眼蜂雌蜂不同产卵强度(每日仅1 h供寄主卵、隔日24 h供寄主卵和持续供寄主卵)对其生物学指标包括7 d内逐日子代雄性比、逐日产卵量、累积子代雄性比和累积产卵量的影响;采用实时荧光定量PCR方法检测未产卵雌蜂(对照)以及每日仅1 h供寄主卵和持续供寄主卵的雌蜂体内Wolbachia滴度(wsp基因拷贝数)。【结果】持续供寄主卵的雌蜂累积子代雄性比显著高于每日仅1 h供寄主卵,但与隔日24 h供寄主卵相比无显著差异。3个处理组雌蜂逐日子代雄性比随日龄的增加均显著上升,其中持续供寄主卵的处理组的上升幅度最高。持续供寄主卵的雌蜂累计产卵量显著高于每日仅1 h供寄主卵和隔日24 h供寄主卵。3个处理组雌蜂逐日产卵量随日龄的增加而显著下降,其中持续供寄主卵的处理组的下降幅度最高。未产卵的雌蜂体内Wolbachia滴度显著高于持续提供寄主卵的雌蜂体内的滴度,但与每日仅1 h供寄主卵的雌蜂体内的滴度相比无显著差异。【结论】结果说明,当松毛虫赤眼蜂雌蜂产卵不受限制时,Wolbachia滴度减少,宿主孤雌产雌表型减弱;而限制雌蜂产卵有助于维持Wolbachia滴度和宿主孤雌产雌表型。研究结果为认识Wolbachia与宿主赤眼蜂之间的互作以及应用孤雌产雌生殖品系松毛虫赤眼蜂防控害虫提供一定的参考。     

半干旱区锦鸡儿属植物根际土壤真菌群落多样性及驱动因素

为探究半干旱区锦鸡儿属植物根际土壤真菌群落多样性及其与生态因子的互作机制,本研究以不同生境下的中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿为对象,采用高通量测序技术分析了2种锦鸡儿根际土壤真菌多样性和群落结构组成及其驱动因素。结果表明: 2种锦鸡儿根际土壤真菌隶属于7门20纲43目66科78属。优势真菌门为子囊菌(37.7%)、担子菌(13.7%)和接合菌(4.3%)。在属水平上,青霉菌、地丝霉菌和被孢霉菌为优势属,且土壤中存在根内球囊霉菌和球囊霉菌。小叶锦鸡儿根际土壤真菌群落的Chao1、ACE和Simpson多样性指数显著高于中间锦鸡儿,且2种植物的根际土壤真菌群落结构差异显著。冗余分析结果表明,土壤有机碳、全氮、电导率、速效钾、海拔、全磷和干旱指数是影响土壤真菌多样性的主要生态因子。研究结果丰富了锦鸡儿属植物根际土壤微生物群落多样与生态因子的关系,可为深入理解半干旱区荒漠植物的生态适应机制提供参考。     

机体微生态变化及炎症因子表达在支气管扩张症中的预警作用初步分析

摘要 目的：初步探讨与分析机体微生态变化及炎症因子表达在支气管扩张症中的预警作用。方法：2020年6月1日-2022年3月31日选择在本院诊治的支气管扩张患者100例作为支气管扩张组,同期选择本院体检中心招募50例体检人员作为对照组。测定支气管扩张组及对照组的第一秒用力呼气容积（FEV₁）,用力肺活量（FVC）,血清炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α含量以及外周血炎性标记物中性粒细胞（NEU）,C-反应蛋白（CRP）。将完成电子气管镜检查的患者分为急性加重期组（A组）及稳定期组（B组）,同时测定A组B组肺泡灌洗液的细菌丰度并进行相关性分析。结果：支气管扩张组的FEV₁、FVC都明显低于对照组（P<0.05）。支气管扩张组中急性加重期支气管扩张患者43例,稳定期支气管患者扩张例57例。支气管扩张组的血IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α、NEU、CRP明显高于对照组（P<0.05）,且在急性加重时增高更明显。100例支气管扩张患者中完成电子气管镜检查的患者61例,分为急性加重期组（A组）30例及稳定期组（B组）31例,A组流感嗜血杆菌丰度明显高于B组（P<0.05）,A组铜绿假单胞菌丰度与B组无显著差异（P＞0.05）。在支气管扩张组及对照组150例入选者中,Spearsman分析显示血IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α、NEU、CRP与支气管扩张存在相关性（P<0.05）,在61例支气管扩张患者中,流感嗜血杆菌丰度与支气管扩张急性加重存在相关性（P<0.05）。COX比例风险回归模型分析显示血IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α、NEU、CRP都可能为导致支气管扩张发生的重要预警因子（P<0.05）。流感嗜血杆菌丰度可能为导致支气管扩张急性加重的重要预警因子（P<0.05）。结论：支气管扩张可导致患者肺功能下降,多伴随有血清炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α含量的高表达以及外周血炎症标记物NEU、CRP的增高,且在急性加重时的表达和增高更明显,该因子都可能为导致支气管扩张发生的重要预警因子。支气管扩张患者肺泡灌洗液中可含有大量铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌,流感嗜血杆菌丰度可能为导致支气管扩张急性加重的重要预警因子,铜绿假单胞菌丰度却与支气管扩张急性加重无显著相关。     

干旱对土壤剖面不同深度土壤CO2通量的影响

由于全球气候变化,预计未来我国亚热带地区干旱频率和持续时间将会增加。森林土壤CO₂的释放是陆地生态系统碳循环的重要组成部分,然而,有关不同深度土壤CO₂通量对干旱响应的理解仍相当有限。选择武夷山针叶林（Coniferous Forest,CF）和常绿阔叶林（Evergreen Broadleaved Forest,EBF）为研究对象,于2014年6月至2015年12月,采用梯度法计算10、30 cm和50 cm深度各层土壤CO₂通量,探讨模拟干旱对其影响。结果表明：CF和EBF样地土壤CO₂浓度均随土壤深度的增加而升高。CF和EBF样地对照（CK）处理10 cm深度土壤CO₂生产量分别占总CO₂生产量的53.5%和55.7%,表明土壤CO₂生产量主要来源于浅层土壤,这可能与浅层土壤有高的有机碳含量及细根生物量主要分布区有关。干旱处理使CF和EBF样地不同深度土壤CO₂通量均显著减少。在两个样地土壤CO₂通量的温度敏感性（Q₁₀）值均随着土壤深度的增加而减少。干旱处理显著减少了CF样地浅层土壤的Q₁₀值（P=0.02）,对深层土壤影响不显著（30 cm：P=0.30;50 cm：P=0.23）;而在EBF样地干旱处理显著减少了深层土壤的Q₁₀值（30 cm：P=0.02;50 cm：P=0.01）,对浅层土壤影响不显著（P=0.32）。     

血红素氧合酶-1参与心肌细胞延迟预适应

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在心肌细胞缺血预适应(IPC)中的作用。方法:实验分5组:正常对照组(CN组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血预适应+缺血/再灌注组(PC组)、ZnPP(HO-1抑制剂)+缺血预适应+缺血/再灌注组(ZP组)和Hemin(HO-1诱导剂)+缺血/再灌注组(HE组)。测定HO-1mRNA表达、心肌细胞存活率、胞内[Ca2+]i和细胞培养液中MDA含量等。结果:PC组和HE组HO-1mRNA表达量和细胞存活率显著高于I/R组,而MDA含量和胞内[Ca2+]i则皆显著低于I/R组,PC组各指标与ZP组间有显著性差异,与HE组66较未见显著性差异。结论:IPC可以诱导HO-1mRNA表达,对心肌细胞缺血/再灌注损伤产生延迟保护作用。