褐黑素对大鼠海马神经元谷氨酸所致毒性的拮抗作用

在大鼠海马脑片上电刺激Ｓｃｈａｆｆｅｒ侧支纤维,胞外记录ＣＡ１区锥体细胞层诱发群体锋电位,观察灌流谷氨酸和褪黑素对ＰＳ的影响。结果显示：５．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ可使ＰＳ值下降至对照值的４．１％;ＭＥ（０．４、０．５和０．６μｍｏｌ／Ｌ）一５．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ可使ＰＳ值下降至对照值的１４．７％、１０５．２％、２４．３％;ＭＥＬ、Ｇｌｕ,与赛庚啶混合给药,ＰＳ值下降至０。上述结果提示。     

褪黑素抑制低氧引起大鼠大脑皮层氨基酸递质释放

为研究褪黑素对低氧引起大鼠大脑皮层脑片氨基酸释放变化的影响,利用反相高效液相色谱结合荧光检测法,测定了孵育液中氨基酸类神经递质的含量。低氧条件为通入９１．６％Ｎ２和８．４％Ｏ２的混合气体。低氧３０ｍｉｎ时,大鼠大脑皮层脑片孵育中,氨基酸类神经递质天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、牛磺酸和γ－氨基丁酸的含量显著增加,其含量分别是正常氧组的２４０．４％,３３４．３％,２００．６％,２１０．４％,１６     

褪黑素抑制雌二醇诱致的垂体PRL瘤生长与血浆PRL和过氧化脂质含量的关系

雄性大鼠皮下埋置17-β雌二醇(17-β-estradiol,E2)药泵诱发垂体催乳素PRL)瘤,并每日皮下注射褪黑素(melatonin,MLT)观察MLT对E2诱发PRL瘤生长的影响.另外,采用放免法和紫外分光光度法测定大鼠血浆PRL和过氧化脂质(peroxidativelipid,PL)浓度,观察PRL瘤重量与大鼠血浆浓度间的相关关系.实验结果显示,在对照组、0.05、0.25、0.50、1.00和2.00mgMLT组,PRL瘤重量分别为115.0±71.0、85.2±41.0、58.9±24.1、72.7±23.6、79.3±56.1、74.5±46.8mg;血浆PRL浓度分别为493.46±33.3、373.78±26.5、125.13±13.3、201.79±11.2、418.88±41.3、281.94±36.4ng/ml;血浆PL水平分别为1.21±0.23、0.89±0.32、0.92±0.27、0.64±0.24、0.41±0.14、0.43±0.21△D233/ml.相关性分析表明,PRL瘤重量与血浆PRL浓度间的相关系数为0.8738(P＜0.05),与血浆PL水平间的相关系数为0.5550(P＞0.05),血浆PRL浓度与血浆PL水平间的相关系数为0.2141(P＞0.05).该结果提示,(1)0.25(P＜0.01)、0.50(P＜0.05)mgMLT能有效抑制E2诱致的PRL瘤生长和PRL分泌,所有剂量的MLT均能抑制血浆PL的形成;(2)PRL瘤重量与血浆PRL浓度间呈正相关关系,PRL瘤重量与血浆PL水平间、以及血浆PRL浓度与血浆PL水平间均无相关关系.因此,我们认为,MLT抑制E2诱致的PRL瘤生长可能与MLT抑制PRL表达性分泌有关,但与MLT抗氧化作用无关.     

中西医观解读时间生物学

时间生物学是一门研究生命活动节律的科学.在西方医学中,研究时间生物学是利用分子生物学实验来阐释其机制,以西医的思维方法解释时间生物学的生理及病理过程;中医对时间生物学的记载有两千多年的历史,阴阳理论、子午流注学说以及五运六气学说一直以来都在指导中医的诊断和治疗.中西医观的不同对时间生物学的研究提供了新的研究思路,同时时间生物学也为研究中西医结合提供了广阔的前景.     

褪黑素对邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯致雄性小鼠生殖细胞DNA损伤的拮抗作用

目的探讨邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)致小鼠睾丸细胞DNA损伤及褪黑素(MT)对此损伤的拮抗作用。方法将40只CL57BL/6J雄性小鼠随机分为4组,包括对照组、MT组、DEHP组和MT+DEHP联合组。MT采用腹腔注射(剂量为15 mg·kg-1),DEHP灌胃染毒(染毒剂量为1000 mg·kg-1),每天染毒1次,连续30 d。检测睾丸组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHd G)含量。单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测睾丸细胞DNA损伤,慧星图像软件测定慧星尾长、慧尾DNA百分含量、尾矩及Olive尾矩。结果与对照组比较,DEHP组小鼠睾丸组织GSH-Px和SOD活力降低,MDA和8-OHd G含量增加,睾丸细胞彗星尾长、彗尾DNA百分含量、尾矩、Olive尾矩均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与DEHP组比较,MT+DEHP联合组小鼠睾丸组织GSH-Px和SOD活力升高,MDA和8-OHd G含量降低,睾丸细胞DNA损伤程度减轻,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DEHP造成小鼠睾丸明显的氧化应激,并引起睾丸细胞DNA的损伤;MT可拮抗因DEHP染毒导致的睾丸氧化损伤。     

褪黑素联合顺铂对A549细胞凋亡相关基因的影响

观察褪黑素以及褪黑素联合顺铂是否可以抑制A549细胞增殖并促进细胞凋亡,探讨ERK1/2MAPK信号通路在这一过程中的作用,为肺腺癌的研究提供实验依据。用不同浓度的褪黑素、不同浓度的顺铂、褪黑素联合顺铂刺激体外培养的肺腺癌细胞系A549细胞,MTT法检测各组细胞的活性,运用Real-time RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、p53的表达水平,Western-blot检测ERK1/2MAPK的活性变化。结果:1)单纯使用褪黑素和顺铂均可抑制A549细胞增殖,褪黑素联合顺铂时,抑制作用更加显著,一定浓度的褪黑素可降低顺铂的使用浓度;2)未经处理的A549细胞Bcl-2/Bax很高,p53基因表达较低,经褪黑素以及褪黑素联合顺铂刺激后A549细胞中Bcl-2/Bax明显下降,p53基因表达明显升高,并有浓度依赖;3)经褪黑素和顺铂刺激后A549细胞中磷酸化ERK1/2MAPK水平明显降低。褪黑素联合顺铂可抑制A549细胞增殖并且诱导凋亡相关基因表达,褪黑素和顺铂对A549细胞的抑制作用可能与ERK1/2MAPK信号通路有关。     

褪黑素抗H22细胞增殖的机制研究

目的　采用体内和体外实验观察褪黑素 (melatonin ,MLT)对小鼠肝癌H2 2细胞株的生长抑制作用 ,并探讨其机理。方法　MTT法分析MLT对培养H2 2细胞的抑制作用 ,流式细胞技术 (flowcytometry ,FCM)检测细胞周期分布 ,采用免疫组化方法进行体内和体外P5 3、cyclinE的检测 ,通过RT PCR方法进一步检测 p5 3mRNA水平。结果　 1.MTT显示MLT对H2 2细胞具有极显著抑制作用 (P <0 0 1) ;2 .FCM显示 :MLT可引起H2 2细胞G0 /G1期比例升高 ;3.免疫组化分析显示MLT使体内和体外P5 3蛋白水平显著增高 (P <0 0 1) ,cyclinE水平下降 (P <0 0 1) ,RT PCR方法证明p5 3mRNA水平增高。结论　MLT可引起细胞周期阻滞在G1期 ,其机理可能是通过P5 3抑制cyclinE的表达 ,从而阻止细胞进入S期的结果。     

外源褪黑素对低温胁迫下茄子幼苗生长及其光合作用和抗氧化系统的影响

以‘沪茄08-1’茄子幼苗为试验材料,采用基质栽培方式,研究了叶面喷施50~200μmol·L-1外源褪黑素(melatonin,MT)对低温胁迫[(10±1)℃(昼)/(5±1)℃(夜)]下茄子幼苗生长、光合作用和抗氧化系统等生理指标的影响,以明确外源MT在茄子幼苗抵御低温逆境方面的生理机制。结果显示:(1)低温胁迫处理后,茄子幼苗株高、茎粗、地上部鲜重和根系鲜重、叶绿素含量、叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)均显著降低,丙二醛(MDA)含量、超氧阴离子产生速率(O-·2)和过氧化氢(H2O2)含量均显著增加。(2)幼苗叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性及抗坏血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)含量均显著升高,而其脯氨酸(Pro)和可溶性蛋白质含量均显著增加;外源MT处理可有效增强低温胁迫条件下茄子幼苗叶片中SOD、POD、CAT、APX、GR、DHAR活性,提高AsA和GSH含量,增加Pro和可溶性蛋白含量,显著抑制其叶片MDA、O-·2及H2O2的积累。研究表明,外源MT主要通过增强低温胁迫下茄子幼苗的光合作用以及清除活性氧的能力,减缓低温胁迫的危害,提高茄子幼苗对低温胁迫的耐性。     

褪黑素缓解空肠黏膜上皮细胞氧化损伤的效果研究

肠道黏膜氧化损伤与畜禽的生长发育和腹泻等疾病的发生密切相关，而褪黑素作为一种吲哚胺类化合物，具有明显抗氧化保护作用。为探究褪黑素对肠黏膜上皮细胞氧化损伤时的保护作用，本研究选取原代小鼠空肠黏膜上皮细胞，利用硫酸亚铁和过氧化氢处理建立氧化损伤模型，并通过添加不同浓度的褪黑素预处理上皮细胞，检测细胞损伤、氧化产物、抗氧化酶和炎性相关细胞因子的表达变化。结果发现，硫酸亚铁和过氧化氢处理后，黏膜上皮细胞明显受损，丙二醛含量显著增加、抗氧化酶表达水平降低。而褪黑素能明显减轻细胞氧化损伤程度、抑制丙二醛的产生并增加抗氧化酶的表达。同时，褪黑素还能显著减少炎性因子白介素-6的表达，并增加趋化因子白介素-8的表达。因此，褪黑素可以缓解自由基增加诱发的空肠黏膜上皮细胞氧化损伤，并能够减轻细胞损伤引起的炎症反应。     

褪黑素抗肿瘤机制的研究进展

褪黑素是新近引起人们广泛注意的天然抗肿瘤药物，对多种恶性或良性肿瘤具有明显抑制作用。其抗瘤机制复杂而广泛，主要包括调节雌激素作用通路，影响细胞周期，调节生长因子，干扰钙调素和微管蛋白功能，增加细胞间缝隙连接，对细胞代谢的影响以及抗氧化作用和免疫增强作用等。对于褪黑素作用机制的全面了解将有助于其进一步应用于临床。