木榄CaM基因的克隆及序列分析

以深圳红树自然保护区的木榄为材料,根据GenBank上已公布的钙调蛋白氨基酸保守区的碱基序列设计引物,RT-PCR扩增木榄CaM序列,获得cDNA全长735bp,命名为BgCaM(GenBank登录号:GU722140)。生物信息学分析表明,BgCaM与拟南芥、花生、大麦、榉木及甘薯等植物钙调蛋白氨基酸保守区具有较高同源性。BgCaM基因完整开放阅读框为450bp,编码149个氨基酸,预测蛋白等电点为4.11,分子量为16.8kD。分析基因序列和相应酶切位点,将扩增获得的BgCaM基因完整开放阅读框与中间表达载体相应酶切产物进行连接,构建植物表达载体pC13rd29A-BgCaM,为BgCaM功能分析和进一步利用奠定了基础,为植物转基因研究与应用又增添了一个新的基因源。     

小花口壳属两个中国新记录种

<正>小花口壳属Anthostomella Sacc.于1875年建立(Saccardo 1875),隶属子囊菌门Ascomycota、炭角菌科Xylariaceae(Kirk et al.2008)。该属特征是:子囊壳球形或近球形,革质,埋生或半埋生于基质中;子囊圆柱形或棍棒形,具短柄,单囊壁,     

酸奶生产菌株的诱变选育

通过诱变选育高产酸力菌株;首先采用紫外线和亚硝基胍对乳酸菌进行单因素诱变,确定紫外线照射剂量为150s,并得到一株产酸力为57.85°T的菌株,比原菌株产酸力提高了3.05%;NTG的诱变剂量是0.3mg/mL,处理时间为60min,得到产酸力为58.02°T的菌株,较出发菌株提高了6.52%。接着以紫外线和NTG对高产酸菌株进行了2轮复合诱变,最终得到产酸力达83.66°T的诱变株,较出发菌株产酸力提高了30.64%。     

高山被孢霉△5脱饱和酶基因的分离与验证

花生四烯酸（arachidonic acid）是人体的必需脂防酸,具有独特的生物活性。△5脱饱和酶是花生四烯酸生物合成途径上的关键酶,以二高-γ-亚麻酸为底物,催化其第5位碳脱氢形成花生四烯酸。从花生四烯酸高产菌株高山被孢霉M6（Mortierella alpina）中通过RT—PCR分离了可能的编码△5脱饱和酶完整的cDNA,其大小为1366bp,编码446个氨基酸。推导出的蛋白质含有△5脂酰脱饱和酶中保守的特征性结构域,包括该蛋白质N端典型的细胞色素b。结构域,以及3个保守的组氨酸盒。为验证该蛋白质的功能,将该基因片段克隆到穿梭表达载体pPIC9K中,获得的重组载体pPIC9K-D5通过电转化法转化到巴斯德毕赤酵母GS115中,利用G418耐受度筛选出高拷贝数的酵母转化子,在加入外源底物二高-γ-亚麻酸时,利用甲醇诱导酵母转化子表达外源基因。酵母转化子的油脂的气相色谱图谱中出现了一个花生四烯酸的特征峰,进一步对该峰进行气质联谱（GC—MS）分析,证实该峰是花生四烯酸。研究结果表明,从高山被孢霉M6中分离出△5脱饱和酶基因。     

医师对器官移植供体艾滋病确定的伦理与法律责任

强调医师在器官移植过程中必须遵循法律与伦理道德。依照国家、国务院颁布的对艾滋病管理的法律条款及法规来进行供体艾滋病确定及器官移植,以免发生医疗纠纷,甚至触犯法律。     

甘肃野生羊肚菌根际土壤真菌群落与环境因子相互关系

为探究甘肃不同采样点野生羊肚菌根际土壤中真菌群落结构以及真菌群落与环境因子的相关性,采用Illumina Mi-Seq高通量测序技术和生物信息学方法,分析真菌菌群组成和多样性,揭示真菌群落与环境因子的相互关系.结果表明,不同采样点的根际土壤中真菌群落差异较大;9个采样点共有的OTU(operational taxono...     

化合物毒性及三维结构参数的定量构效关系研究

目的：建立小分子化合物毒性的三维定量构效关系模型,探索化合物毒性数据和三维结构参数之间关系的方法。方法：利用比较分子力场分析方法（CoMFA）,建立了一组对发光菌有急性毒性的小分子的三维定量构效模型。结果：模型的交叉验证相关系数q^2=0．731,非交叉验证相关系数r^2=0．973,标准偏差SE=0．122,F=70．910。结论：该模型具有较好的预测能力,表明在甲基的邻对位减小取代基体积或电负性可以降低化合物毒性。     

利用Site-Finding PCR克隆琼胶酶基因

目的：新型琼胶酶基因的筛选。方法：根据α-琼胶酶基因序列的同源性,设计了兼并引物,利用兼并PCR对所筛选到的琼胶酶产生菌株进行筛选,阳性菌株进行16s rDNA序列测定并构建了进化树。利用染色体步移技术Site-finding PCR获得目的基因的上下游序列,经过拼接获得全长的目的基因序列,并利用Blast对其进行分析。将目的基因插入pET 24a（＋）载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）,利用平板水解圈初步鉴定了重组酶的性质,并利用DNS法检测了重组酶发酵上清液的酶活。结果：获得了一株疑似α-琼胶酶产生菌株,16s rDNA序列鉴定显示为Thalassomonas sp.,命名为Thalassomonas sp.LD5。获得了一个新的基因,命名为agaD。agaD开放阅读框长4401 bp,编码1466个氨基酸,理论分子量为158.8kDa。序列分析表明,agaD编码的蛋白AgaD与已有的两种α-琼胶酶的相似性分别为89%和77%。重组AgaD经诱导后可以直接降解琼胶平板产生水解圈,其发酵上清液酶活为0.2 U.ml-1,说明该蛋白为琼胶酶。结论：采用分子克隆技术分离出新的琼胶酶基因,该基因的发现为活性寡糖的制备提供了新的工具。     

儿童过敏性紫癜早期肾损伤中 VCAM-1 的临床意义

摘要 目的： 探讨血管细胞粘附分子 -1 （ VCAM-1 ）的检测在儿童过敏性紫癜 （AP ） 早期肾损伤中的临床意义。方法： 选择明确诊断 为 AP 患儿 85 例, 均为早期无肾损害的 AP 病儿。根据第七版诸福棠实用儿科学有关章节的诊断标准和随访结果, 进一步将研究 对象分为有肾损害 AP 为 APN 组, 无肾损害 AP 为 AP 组, 于同时间、同群体中选择健康儿童 35 名为对照组。应用 ELISA 法分别 检测三组患儿早期无肾损害时血 VCAM-1 的含量, 分析血 VCAM-1 在儿童过敏性紫癜早期肾损伤中的临床意义。结果： APN 组 血 VCAM-1 水平均高于 AP 组和正常对照组; AP 组亦高于正常对照组, 差异均有统计学意义 （ P<0.01 ）。结论： 对早期无肾损害的 AP 病儿, 检测血浆 VCAM-1 对 AP 发生 APN 的预后诊断有重要的临床意义。     

彩叶地被植物在南京园林绿地中的应用

简要阐述了彩叶地被植物的概念、分类以及南京园林绿地中应用的常见种类、应用原则,提出了彩叶地被植物在园林景观中林下、林缘、疏林、水景、边坡、道路、空旷地及花境中的应用形式,供园林绿化者参考。