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131.
降钙素基因相关肽肽段的抗原性和免疫原性 总被引:2,自引:0,他引:2
用固相合成法合成了有关降钙素基因相关肽CGRP五个肽段。它们的氨基酸顺序分别为:CGRP-1(24-37);CGRP-2(14-37);CGRP-3(9-23);CGRP-4(1-23)和CGRP-5(1-13)。用酶标方法测定了它们的抗原性,发现CGRP-2和CGRP-1能够很好地与抗CGRP抗血清结合。将CGRP-1;CGRP-3和CGRP-5分别免疫兔子,获得的抗血清分别与CGRP进行反应, 相似文献
132.
丙型肝炎病毒非结构3区基因片段的克隆表达及抗原纯化鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
通过逆转录PCR技术,从中国江苏省丙型肝炎病人血清中扩增克隆了丙型肝炎病毒(HCV)的非结构3区的部分基因片段(C33)。DNA序列分析证实,该片段全长842bp。在合成的一对逆转录PCR引物上,上游引物增加了NcoⅠ酶切位点(内含起始密码子ATG),下游引物上增加了SalⅠ酶切位点及终止密码子TAA,将克隆的C33基因片段克隆至表达载体pBV221内,获得了表达C33抗原的工程菌,表达C33抗原分子过为30kD,经尿素裂解纯化、分子筛分离纯化及复性后进行离子交换和反相亲和层析纯化,获得的重组蛋白经ELBA和免疫印迹等证实有较好的抗原性和特异性。 相似文献
133.
用固相合成法合成了有关降钙素基因相关肽CGRP五个肽段。它们的氨基酸顺序分别为:CGRP-1(24-37);CGRP-2(14-37);CGRP-3(9-23);CGRP-4(1-23)和CGRP-5(1-13)。用酶标方法测定了它们的抗原性,发现CGRP-2和CGRP-1能够很好地与抗CGRP抗血清结合。将CGRP-1;CGRP-3和CGRP-5分别免疫兔子,获得的抗血清分别与CGRP进行反应,发现只有抗CGRP-1的抗血清能够与CGRP很好地结合。因此,可以推测CGRP的羧端部分是其免疫活性部位。 相似文献
134.
以HBV全基因组质粒为模板,扩增出目的区段:S(1-222AA),preS1(10-50AA)和C(2-30AA),以酶切-PCR的方法进行连接,克隆入表达载体pPIC3.5k,电穿孔转化后利用G418加压筛选出多拷贝整合菌株,诱导表达并对表达产物进行检测。结果显示融合后的基因为ss1c,长度约为906bp。在酵母中成功地进行了表达,表达产物(SSIC)的大小约为31kDa,并形成直径约为22nm的病毒样颗粒。表达产物与HBs抗体、preS1抗体和HBc抗体均有特异反应。为进一步研究治疗性疫苗提供了重要的基础。 相似文献
135.
136.
兔多杀性巴氏杆菌铁调节外膜蛋白(IROMPs)抗原交叉性试验 总被引:4,自引:0,他引:4
分别以含铁培养基和限铁培养基培养4株兔多杀性巴氏杆菌JS、C51—2、C51-3及C51—17株,用刚果红结合试验初步分析铁调节外膜蛋白(IROMPs)表达情况,同时破碎菌体,提取外膜蛋白,经SDS-PAGE比较这4株细菌在正常培养条件、富铁培养条件及限铁培养条件时外膜蛋白的表达差异,结果表明:限铁培养时,细菌表现出对刚果红染料较强结合性,且这4株巴氏杆菌均表达数种高分子量的IROMPs,主要有147kD、135kD、99kD、94kD、82kD及72kD蛋白带,4株之间存在一定的差异,而正常或富铁条件培养时均不表达上述条带。免疫印迹结果显示,正常条件培养的全菌(C51—17株)抗血清中不含有针对IROMPs的抗体,限铁培养的C51-17株IROMPs可诱导机体产生相应抗体,并且能与JS、C51—2及C51-3株的IROMPs发生抗原交叉性反应。同时用间接ELISA检测C51—17株3种IROMP(99kD、94kD和87.6kD)的交叉抗体效价,结果这3种抗血清均与其它3株的产生较高的交叉抗体滴度。 相似文献
137.
乙型肝炎病毒变异株功能基因组研究及其临床意义 总被引:4,自引:0,他引:4
综述了近年对乙型肝炎病毒(HBV)变异株的复制、免疫学特性、致病性、耐药性等功能基因组研究及其临床意义的研究进展,阐述基因组水平研究HBV变异株功能的重要性及有关结果,展望今后HBV变异株生物学特性研究的方向。 相似文献
138.
以HBV全基因组质粒为模板,扩增出目的区段S(1-222AA),preS1(10-50AA)和C(2-30AA),以酶切-PCR的方法进行连接,克隆入表达载体pPIC3.5k,电穿孔转化后利用G418加压筛选出多拷贝整合菌株,诱导表达并对表达产物进行检测.结果显示融合后的基因为ss1c,长度约为906bp.在酵母中成功地进行了表达,表达产物(SSIC)的大小约为31kDa,并形成直径约为22nm的病毒样颗粒.表达产物与HBs抗体、preS1抗体和HBc抗体均有特异反应.为进一步研究治疗性疫苗提供了重要的基础. 相似文献
139.
浙江省麻疹病毒分离株的基因特性与免疫原性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为了研究浙江省1999~2003年麻疹病毒分离株的抗原性变化以及基因特性,阐明其基因特性与麻疹流行的关系,以及抗原性变化对疫苗免疫效果的影响.我们从麻疹患者含漱液中分离麻疹病毒株,制备大鼠免疫血清,与疫苗株沪191和Edmonston株等进行交叉中和试验,测定各毒株之间抗原比;并采集儿童麻疹疫苗免疫前后血清,分别测定其对不同毒株的中和抗体滴度;采用RT-PCR法扩增麻疹毒株血凝素蛋白(H)及核蛋白(N)基因,进行核苷酸序列测定.结果浙江99-1和浙江02-2株与沪191株之间的抗原比分别为3.0和7.3;儿童免疫后血清对浙江02-2株的麻疹中和抗体平均几何滴度(GMT)为15.03,明显低于沪191疫苗株(GMT为68.12);浙江省1999~2003年麻疹分离株之间,H基因氨基酸同源性为99.8%,N基因氨基酸同源性为98.5%~100.0%;与沪191疫苗株的H基因和N基因相比较,分离株与其在氨基酸水平上同源性分别为95.5%~95.7%和95.9%~96.3%.从基因进化树显示,1999~2003年浙江省分离到的麻疹毒株属于H1基因型,但与疫苗株沪191在抗原性和基因特性上已存在明显的差异. 相似文献
140.
构建表达质粒pcDNA3 VP2,将其转染CHO细胞建立了稳定表达的细胞系;用间接免疫荧光法和Western印迹证明了表达的VP2蛋白的特异性。对昆虫杆状病毒系统表达的VP2蛋白作初步纯化。分别用由大肠杆菌、CHO细胞和昆虫杆状病毒表达系统表达的VP2蛋白,以间接免疫荧光法和ELISA法检测人群血清中的VP2抗体,结果表明,间接免疫荧光法的敏感性高于ELISA法。 相似文献