小檗碱联合松果菊苷抗人脑胶质细胞衰老的实验研究

摘要 目的：探究小檗碱联合松果菊苷抗人脑胶质细胞衰老的作用及其分子机制。方法：采用依托泊苷诱导人脑胶质细胞衰老,使用小檗碱与松果菊苷联合干预,采用β-半乳糖苷酶染色法色观察衰老阳性细胞比例,采用CCK-8法检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞周期,采用Western blot法检测细胞中衰老相关蛋白FoxO1、CAT、SOD2、 Bcl-2的表达水平。结果：小檗碱联合松果菊苷可显著减少依托泊苷诱导的衰老阳性细胞比例,显著增强细胞活力,显著降低G2/M期细胞比例,显著提高FoxO1、CAT、SOD2、Bcl-2的蛋白水平。结论：小檗碱联合松果菊苷可显著抑制依托泊苷诱导的人脑胶质细胞衰老,可能与增强细胞活力、推进细胞周期进程、降低胞内氧化应激水平、抗凋亡等途径有关。     

缺血性脑血管病患者认知功能分析

目的：探讨缺血性脑血管病患者认知功能。方法：将60例缺血性脑血管病患者依据卒中风险评分量表评分,分为轻危组20例、中危组22例、高危组18例;应用蒙特利尔量表进行认知功能评定。结果：（1）高危组与低危组在视空间和执行功能、注意力、计算力、抽象概括能力、命名、记忆、时间定向方面有显著性差异（P〈0．05）;中危组与低危组比较在视空间和执行功能、注意力、计算力、抽象概括能力、记忆各方面有显著性差异（P〈0．05）;视空间、命名、计算、语言、时间定向各方面中危组较高危组有显著性差异（P〈O．05）。（2）各项认知功能评分与血管因素进行相关分析,年龄、TIA或脑卒中、高血压与MOCA各项评分呈负相关。结论：缺血性脑血管病患者随着危险因素增多,其认知功能障碍越显著。     

流式细胞术BrdU／DNA双染法测定云芝糖肽诱导的Molt-4细胞周期阻滞

目的：探究云芝糖）Ik（PSP）对人急性淋巴母细胞白血病Molt-4细胞周期的影响。方法：采用流式细胞术BrdU／DNA双染法获得各时相细胞分布状况和细胞周期的动力学参数。结果：0．1mg／mlPSP处理12h后,G2／M期细胞百分比由对照组的11．09％减少至3．69％。DNA合成时间由12．10h延长至108．40h。24h处理组中,S期细胞百分比由对照组的43.29％增加至67．26％,而G0／G1期和G2／M期细胞百分比均减少,G0／G1期细胞百分比由对照组的37．47％减少至27．43％,G2／M期细胞百分比由对照组的19．24％降低至5.31％。DNA合成时间更是由11．95h延长至114．52h。结论：PSP对人急性淋巴母细胞白血病Molt-4细胞周期的阻滞作用在于S期．该作用与DNA合成抑制有关。     

胞膜窖与钾离子通道

胞膜窖（caveolae）是细胞质膜内陷形成的凹陷小窝,参与细胞内多种重要的生理活动的调节.近年研究表明,电压门控钾离子通道、钙离子 激活的电压门控钾离子通道和ATP敏感的钾离子通道等多种钾离子通道家族 成员的功能调节与胞膜窖有关.本文概括介绍了胞膜窖和钾离子通道调节关系的研究进展．     

虎耳草中抗氧化活性物质的提取及成分研究

对虎耳草中抗氧化活性物质提取工艺进行优化研究并对其进行总黄酮、总多酚、多糖的含量测定。通过单因素试验和Box-Behnken设计,以虎耳草中抗氧化活性物质对DPPH.自由基的清除率为响应值,利用响应面分析法对提取参数进行优化。结果表明:在提取温度39℃、料液比1∶40.5(g/mL)、提取时间3.7 min,微波功率500 W的优化条件下,以水为提取溶剂时,其提取液对DPPH.的清除率达到最大,为80.32%,同时将该提取液进行成分分析,1 g提取液中含有总黄酮11.30 mg,总多酚20.27 mg,多糖55.85 mg。     

犬牙囊干细胞膜片的构建及生物学特性的研究

目的:利用犬牙囊干细胞(Dental Follicle Stem Cells,DFSCs)构建细胞膜片并研究其生物学特性。方法:取4至6月龄犬尖牙牙胚,分离培养DFSCs,鉴定。用含抗坏血酸的培养基诱导2周构建细胞膜片,并通过倒置显微镜、HE染色、茜素红染色、油红染色、扫描电镜(SEM)对膜片进行形态学检测,检测成骨、成脂能力。结果:DFSCs于体外被成功分离、纯化、培养,细胞克隆形成率约为5.1%。流式鉴定为CD29+CD44+CD34-,增殖能力及克隆形成能力较强,并能成功构建成细胞膜片。光镜和电镜显示膜片细胞排列紧密,细胞基质分泌多,油红O染色后可见细胞内有大量脂滴形成。(B)茜素红染色后可见大量清晰的钙结节形成。结论:成功构建犬DFSCs膜片,并证明其具有较强的成骨能力,为进一步利用犬DFSCs膜片修复牙槽骨缺损的研究提供条件。     

HP1α在Zmpste24-缺陷早老小鼠胚胎成纤维细胞中表达和磷酸化水平升高

本实验旨在研究异染色质蛋白1（heterochromatin protein 1, HP1）在Zmpste24基因敲除早老小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)中的表达量和磷酸化水平,探索异染色质功能异常与早老发病机制的内在联系．首先取雄雌Zmpste24杂合子小鼠胚胎,原代培养MEFs;分别用PCR和Western 印迹检测MEFs基因型和A型核纤层蛋白（laminA）表达以区分野生型与Zmpste24-缺陷型早老细胞;用与衰老相关的β-半乳糖苷酶染色法 (senescence associated-β-galactosidase assay, SA-β-gal)确定早老细胞出现衰老表型的传代数．用Western 印迹和phos-tag Western 印迹分别检测HP1在Zmpste24+/+和Zmpste24-/- MEFs中表达量和磷酸化水平的差异．实验结果显示,Zmpste24-/- MEFs中存在异常的LaminA,且在传代培养第5代出现明显的细胞衰老现象．选用培养至第3代或第4代的MEFs细胞进行下述实验发现,Zmpste24-/-MEFs中HP1α表达量明显高于Zmpste24+/+ MEFs,而HP1β未发现明显升高;Zmpste24+/+ MEFs中HP1α以非磷酸化状态为主,但在Zmpste24-/- MEFs中磷酸化HP1α比例明显升高;2种细胞中均未检测到磷酸化HP1β. 本研究结果证明,HP1α在Zmpste24-缺陷型早老小鼠传代早期MEFs中的表达量和磷酸化水平均有升高,提示HP1α参与A型核纤层蛋白相关的早老小鼠发病机制．     

黄土丘陵区纸坊沟流域农业生态经济系统耦合态势

基于1938-2007年黄土丘陵区纸坊沟流域的调查资料,通过建立生态环境与社会经济综合评价指标体系和耦合模型,对该流域的耦合态势进行了分析.结果表明：研究期间,纸坊沟流域农业生态经济系统经历了经济系统对生态系统的初级再生阶段-消耗阶段-促进阶段-协调阶段以及生态系统对经济系统的初级响应阶段-滞后阶段-恢复阶段-协调阶段的耦合过程.依据耦合度拟合曲线及所划分的耦合类型,目前纸坊沟流域农业生态经济系统仍处于不断协调过程中,有望形成良性耦合态势.     

酪酸菌对肠道有益菌的增殖作用和共生关系研究

目的通过体外液体培养证明,酪酸菌能与双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和粪链球菌这些肠道有益菌共生.方法在双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和粪链球菌的培养基中,加入1/3比例的酪酸菌发酵提取物,进行室温培养24 h.结果3种菌的活菌含量分别比对照组提高了24.00%、42.57%和6.76%.结论表明酪酸菌对肠道有益菌具有增殖作用.