| HP1α在Zmpste24-缺陷早老小鼠胚胎成纤维细胞中表达和磷酸化水平升高 |
| |
| 引用本文： | 刘佳,周光前,尹献辉,刘宝华,郑慧玲,李雪芹,王优雅,王子梅.HP1α在Zmpste24-缺陷早老小鼠胚胎成纤维细胞中表达和磷酸化水平升高[J].中国生物化学与分子生物学报,2012,28(7):624-629. |
| |
| 作者姓名： | 刘佳 周光前 尹献辉 刘宝华 郑慧玲 李雪芹 王优雅 王子梅 |
| |
| 作者单位： | 深圳大学医学院;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室;香港大学李嘉诚医学院 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(No.81070270);深圳市科技基金基础研究计划面上项目(No.JC201005280552A)~~ |
| |
| 摘 要： | 本实验旨在研究异染色质蛋白1（heterochromatin protein 1, HP1）在Zmpste24基因敲除早老小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)中的表达量和磷酸化水平，探索异染色质功能异常与早老发病机制的内在联系．首先取雄雌Zmpste24杂合子小鼠胚胎，原代培养MEFs；分别用PCR和Western 印迹检测MEFs基因型和A型核纤层蛋白（laminA）表达以区分野生型与Zmpste24-缺陷型早老细胞；用与衰老相关的β-半乳糖苷酶染色法 (senescence associated-β-galactosidase assay, SA-β-gal)确定早老细胞出现衰老表型的传代数．用Western 印迹和phos-tag Western 印迹分别检测HP1在Zmpste24+/+和Zmpste24-/- MEFs中表达量和磷酸化水平的差异．实验结果显示，Zmpste24-/- MEFs中存在异常的LaminA，且在传代培养第5代出现明显的细胞衰老现象．选用培养至第3代或第4代的MEFs细胞进行下述实验发现，Zmpste24-/-MEFs中HP1α表达量明显高于Zmpste24+/+ MEFs，而HP1β未发现明显升高；Zmpste24+/+ MEFs中HP1α以非磷酸化状态为主，但在Zmpste24-/- MEFs中磷酸化HP1α比例明显升高；2种细胞中均未检测到磷酸化HP1β. 本研究结果证明，HP1α在Zmpste24-缺陷型早老小鼠传代早期MEFs中的表达量和磷酸化水平均有升高，提示HP1α参与A型核纤层蛋白相关的早老小鼠发病机制．
|
| 关 键 词： | 异染色质蛋白1（HP1） A型核纤层蛋白 早老症 小鼠胚胎成纤维细胞 蛋白质磷酸化 |
| 收稿时间： | 2012-03-14 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国生物化学与分子生物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国生物化学与分子生物学报》下载免费的PDF全文 |
