CRISPR/Cas9介导的LATS1/2敲除抑制卵巢癌细胞ES-2增殖

Hippo信号通路在哺乳动物肝脏发育、动态平衡、再生和疾病中发挥非常重要的作用。大肿瘤抑制基因1/2（large tumor suppressor 1/2, LATS1/2）激酶是Hippo信号通路的关键激酶,可以磷酸化YES相关蛋白（yes-associated protein,YAP）,从而调节YAP的核质定位和降解。本文采用CRISPR/Cas9方法构建慢病毒介导的Last1/2基因敲除的载体,通过包装、感染和嘌呤霉素筛选,获得LATS1/2部分敲除的人卵巢癌ES-2和H08910细胞,免疫印迹方法检测LATS1/2表达明显减少。细胞增殖实验检测LATS1/2缺失明显抑制ES-2和HO8910细胞增殖。软琼脂克隆形成实验表明,LATS1/2缺失抑制卵巢癌ES-2细胞的克隆形成能力。细胞划痕和Transwell实验证明,LATS1/2缺失明显抑制卵巢癌ES-2细胞迁移。流式细胞检测发现,LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞凋亡并影响细胞周期。裸鼠成瘤实验表明,LATS1/2缺失明显抑制体内肿瘤组织增殖。分子机制研究表明, LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞中胶原I型α1（collagen type I α1,ColIα1）基因表达量增加,在卵巢癌ES-2细胞中同时敲除LATS1/2和COL1A1,可以促进细胞克隆形成。综上结果,人卵巢癌ES-2细胞中LATS1/2缺失能促进COL1A1表达增加, 从而抑制细胞增殖、转移和克隆形成,并影响细胞周期和促进细胞凋亡。     

基于单链DNA开关调控的多功能生物电路（英文）

合成生物电路在生物传感及生物计算方面成为了广泛应用的工具。工程化生物电路系统具有良好的灵活性,同时也具备模块化的特征。在本文中,研究了基于单链DNA开关调控的多功能生物电路的构建方法。通过将计算机辅助设计的单链DNA开关作为核心控制元件,并利用长度为20 bp的toehold区域来激活单链DNA开关,驱动了简单的单向式、循环式以及级联的多层次的生物电路系统。在级联式电路系统中,通过调整单链DNA开关的结构,使信噪比从2. 996变成5. 274。同时,单链DNA开关作为长单链DNA(784 bp)的一部分,在无细胞蛋白质系统中实现了基因表达调控。因此,本文研究的工程化方法为今后复杂的人工生物电路的构建提供了坚实的技术基础。     

改性胶原蛋白膜用于大肠杆菌EP8-10组合固定化

探讨了不同方法对胶原蛋白膜进行改性处理,结果表明经过甲醛处理过的胶原蛋白膜具有良好的通透性及耐水性能。将胶原蛋白膜与卡拉胶凝胶颗粒形成组合固定化体系,用于大肠杆菌EP8-10固定化,天冬氨酸转氨酶活回收率达到了91.3%,反应20批次后,酶活回收率仍在80%以上。     

福建九龙棘蛙和小棘蛙的核型和Ag—NORs研究

福建两种棘蛙的核型和Ａｇ－ＮＯＲｓ观察结果如下：九龙棘蛙，２ｎ＝２６（２２Ｍ＋４ＳＭ），ＮＦ＝５２，５＋８模式，Ａｇ－ＮＯＲｓ位于６ｐｉｎｔｅｒ，小棘蛙，２ｎ＝２６（２０Ｍ＋６ＳＭ），ＮＦ＝５２，５＋８模式，次缢痕和Ａｇ－ＮＯＲｓ在６ｐｉｎｔｅｒ。二者均未发现与性别分化相关的异形染色体。根据已知棘蛙属内的核型资料，对该属种间和居群间的核型演化机制进行了讨论。     

反应分离耦合技术生产L-苹果酸工艺过程的优化研究

运用生物反应分离耦合原理,以富马酸钙为底物,采用游离延胡索酸酶,直接转化生产苹果酸钙。该法相对目前广泛采用的包埋式固定化方法具有工艺流程短、操作简便、转化率、收率高等特点,研究结果表明,转化温度为40℃,PH为7．0－7．5时,每升延胡索酸酶液能在20－28h间将3．2kg的富马酸钙转化生产成苹果酸钙,转化率高达99．9％,富马酸在产品中的残留在0．1％左右,产品符合美国药典标准,成本与化学合成法生产的DL－苹果酸相当。     

应用酶标仪动力学方法监测棉蚜的抗药性

用酶标仪动力学测定法对3个抗性水平不同的棉蚜品系（R1、R2和R3）和1个敏感品系（S）的羧酸酯酶进行了研究,S、R1、R2和R3品系对α-乙酸萘酯（α-NA）的平均比活力分别为57．10、1171．69、1236．14和3293．00μmol·mgpro－1·min-1（分光光度计终点测定法）和38．24、85．27、198．14和762．25mOD·min－1·aphid-1（酶标仪动力学法）。终点测定法结果显示出不同品系间最大相差达60倍;酶标仪动力学测定法研究表明,4个棉蚜品系羧酸酶活性与其抗药性程度显著相关。通过对这两种方法的比较,酶动力学方法的测定结果更可靠。     

大叶黄杨长毛斑蛾生活习性观察

大叶黄杨长毛斑蛾PryeriasinicaMoore属鳞翅目,斑蛾科,又称冬青卫矛斑蛾。该虫过去是我地城镇庭院绿化观赏植物——大叶黄杨上的次要害虫。近几年突然暴发成灾,对街道、小区、单位庭院的大叶黄杨（俗称冬青）危害很重。为解决城镇绿化工程中的这一问题,1993～1995年作者对其生物学特性及防治进行了试验研究,现报道如下。1危害情况该虫食性较单一,主要危害大叶黄杨。据1992年在薛城区大叶黄杨上调查,很少见到危害症状。1993年同地调查发现危害株率在5％左右,1995年迅速发展到80％以上,造成大片植株叶片被食光,有的因此而枯死。它…     

神蕊螨属一新种述：（蜱螨亚纳：长须螨科）

本文记述神蕊螨属Ａｇｉｓｔｅｍｕｓ Ｓｕｍｍｅｒｓ一新种,黄山神蕊螨Ａｇｉｓｔｅｍｕｓ ｈｕａｎｇｓｈ－ａｎｅｎｓｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ。     

秦岭木姜子油细胞的分布和结构研究

利用组织透明法和石蜡制片法研究秦岭木姜子各器官内油细胞的结果表明：其根、茎、叶和果实内部有油细胞分布。但它们在大小、数量上存在差异：根的皮层和茎的次生木质部射线中的油细胞体积最小,直径１６￣２５μｍ,且数量较少;果实果肉中的油细胞体积最大,直径约７０μｍ,数量也最多：根的次生韧皮部薄壁组织、茎的皮层和髓以及叶肉组织中的油细胞大小和数量则介于前两者之间,直径约４０μｍ。油细胞多数为单个散在,呈球形或