| CRISPR/Cas9介导的LATS1/2敲除抑制卵巢癌细胞ES-2增殖 |
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| 引用本文： | 林仙德,胡灵灵,陈子彦,胡汉寅,杨柳青,王卓文,钱若文轩,刘胜兵,潘巍巍.CRISPR/Cas9介导的LATS1/2敲除抑制卵巢癌细胞ES-2增殖[J].中国生物化学与分子生物学报,2019,35(5):565-574. |
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| 作者姓名： | 林仙德 胡灵灵 陈子彦 胡汉寅 杨柳青 王卓文 钱若文轩 刘胜兵 潘巍巍 |
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| 作者单位： | （嘉兴学院 医学院生物教研室，浙江 嘉兴314001） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（No.81402162和No.31871402）；浙江省自然科学基金（No.LY17H160060）；浙江省大学生科技创新项目(No. 2018R417024)和重点SRT项目（No.NH85178445）资助 |
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| 摘 要： | Hippo信号通路在哺乳动物肝脏发育、动态平衡、再生和疾病中发挥非常重要的作用。大肿瘤抑制基因1/2（large tumor suppressor 1/2， LATS1/2）激酶是Hippo信号通路的关键激酶，可以磷酸化YES相关蛋白（yes-associated protein，YAP），从而调节YAP的核质定位和降解。本文采用CRISPR/Cas9方法构建慢病毒介导的Last1/2基因敲除的载体，通过包装、感染和嘌呤霉素筛选，获得LATS1/2部分敲除的人卵巢癌ES-2和H08910细胞，免疫印迹方法检测LATS1/2表达明显减少。细胞增殖实验检测LATS1/2缺失明显抑制ES-2和HO8910细胞增殖。软琼脂克隆形成实验表明，LATS1/2缺失抑制卵巢癌ES-2细胞的克隆形成能力。细胞划痕和Transwell实验证明，LATS1/2缺失明显抑制卵巢癌ES-2细胞迁移。流式细胞检测发现，LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞凋亡并影响细胞周期。裸鼠成瘤实验表明，LATS1/2缺失明显抑制体内肿瘤组织增殖。分子机制研究表明， LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞中胶原I型α1（collagen type I α1，ColIα1）基因表达量增加，在卵巢癌ES-2细胞中同时敲除LATS1/2和COL1A1，可以促进细胞克隆形成。综上结果，人卵巢癌ES-2细胞中LATS1/2缺失能促进COL1A1表达增加, 从而抑制细胞增殖、转移和克隆形成，并影响细胞周期和促进细胞凋亡。
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| 关 键 词： | 大肿瘤抑制基因1/2(LAST1/2) 卵巢癌 细胞增殖 凋亡 |
| 收稿时间： | 2018-11-29 |
CRISPR/Cas9-mediated LATS1/2 Knock-out Inhibits Proliferation of ES-2 Ovarian Cancer Cells |
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| LIN Xian-De,HU Ling-Ling,CHEN Zi-Yan,HU Han-Yin,YANG Liu-Qing,WANG Zuo-Wen,QIANRUO Wen-Xuan,LIU Sheng-Bing,PAN Wei-Wei.CRISPR/Cas9-mediated LATS1/2 Knock-out Inhibits Proliferation of ES-2 Ovarian Cancer Cells[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2019,35(5):565-574. |
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| Authors: | LIN Xian-De HU Ling-Ling CHEN Zi-Yan HU Han-Yin YANG Liu-Qing WANG Zuo-Wen QIANRUO Wen-Xuan LIU Sheng-Bing PAN Wei-Wei |
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| Institution: | (College of Medicine, Jiaxing University, Jiaxing 314001, Zhejiang, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | large tumor suppressor 1/2(LATS1/2) ovarian cancer proliferation apoptosis |
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