大肠杆菌BL21(DE3)磷酸转乙酰基酶缺陷变株的发酵研究

研究了E.coliBL21(DE3)及其磷酸转乙酰基酶(PTA)缺陷变株FR55发酵过程中菌体生长和有机酸产生情况,并以肿瘤坏死因子(TNF)为外源蛋白表达的模型考察了pta基因缺陷对外源蛋白表达的影响。在摇瓶培养条件下,pta变株TNF的表达水平比亲株提高了23%。在5L发酵罐中进行了补料分批培养试验,在不限制比生长速率的条件下pta变株能够以较长时间和较高比生长速率保持对数生长,最终达到32.5g(DCW)/L的菌密度,TNF的总表达量达2.8g/L;而在相同条件下,以BL21(DE3)为受体菌的对照组最高菌密度为19.5g(DCW)/L,TNF总表达量只有0.84g/L。表明pta变株对于提高工程菌外源蛋白的表达和实现高密度培养具有一定应用价值。分析了补料分批培养过程中发酵液有机酸组成和含量的动态变化情况,发现pta变株乙酸累积水平明显降低(为亲株乙酸累积水平的42%)的同时,其他几种有机酸(丙酮酸、乳酸、琥珀酸)的累积有显著增加的趋势,使发酵液中总有机酸浓度增加了123%,其中乳酸的累积是影响菌体进一步生长的主要因素。     

TAT-MafA融合蛋白诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素

借助蛋白质转导技术,利用胰岛β细胞转录因子MafA诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素,为糖尿病的治疗提供新的方法。将TAT基因与MafA基因一起插入p32a（＋）载体中,构建TAT—MafA融合蛋白原核表达载体,转化BL21获得表达菌株,经IPTG诱导和Ni柱亲和层析纯化TAT-MafA融合蛋白,用1μM浓度的该融合蛋白孵育IEC-6细胞12h和24h后,分别进行进胞检测和胰岛素表迭检测。实验结果表明,细胞免疫荧光和Western-blot方法检测到经TAT—MafA融合蛋白作用12h后的IEC-6细胞中有该蛋白,并经细胞免疫荧光和RT—PCR的方法检测出TAT—MafA作用24h后的IEC-6细胞中有胰岛素的表达。因此,TAT—MafA融合蛋白可以高效进入小肠细胞系IEC-6细胞,并且进胞后仍保持MafA原有的生物学活性,能启动胰岛素基因的表达,诱导IEC-6成为胰岛素表达细胞。     

透明质酸的制备与鉴定

透明质酸是一种酸性粘多糖,其特有的粘弹性和保湿性已被用于医药与化妆品的生产中。本文以黄牛眼睛为材料,通过提取,除杂质、有机溶剂沉淀等步骤进行透明质酸的制备,并对其性质进行鉴定,表明用此方法制备的透明质酸基本达到了市场的要求,而且此工艺简单,成本低廉。     

大鼠短间隔连续部分肝切除中上调表达基因的克隆与功能分析

以短间隔连续部分肝切除模型（0-4-40-76-112h)中0h肝组织材料做为驱动方,112h肝组织材料做为试验方,利用抑制性消减杂交技术构建了高效率的正向消减文库,从文库中随机挑取80个克隆进行PCR分析,有75个克隆中含外源插入片段,经测序表明他们代表了53个表达序列标记。在这些表达序列标记中,有9个与GenBank完全同源,有44个与GenBank不完全同源,其中有1个与GenBank无任何同源性,它可能代表了一个新基因。消减文库的建立为批量克隆和分析肝再生中上调表达基因奠定了基础。     

红花单株花产量选择指数的研究

本试验用9个栽培红花品种为材料,进行单株花产量选择指数的研究。结果表明,通过分枝高或株 高两性状进行相关选择可有效提高单株花产量。分枝高、单株有效果球数、开花期是决定单株花产量选 择效果的3个关键性状,综合选择时必须加以考虑。无效分枝数亦是影响单株花产量的重要因素之一, 选择时应予重视。用株高、分枝高、单株粒数、单株有效果球数、开花期、无效分枝数6个性伏组成的选 择指数对单株花产量进行选择的效果最好。用该选择指数对9个参试品种评审结果表明,张掖无刺为 最佳花用型品种,B-54为最差的低产花用品种。     

山东萊阳鸚鵡嘴龙一新种

一、引言本文描述的标本保存在北京自然博物馆,是中国科学院古脊椎动物与古人类研究所和北京自然博物馆于1958年秋在山东莱阳采掘的。具体地点是陡山以北5公里的盘龙沟南坡。层位是青山层。这一发现,丰富了我国鹦鹉嘴龙化石,为青山层的时代是早白堊世提供了补充证据。     

磷脂類對於蟾蜍心臟的作用——Ⅳ.在鉀離子乙醯胆鹼抑制中磷脂的作用

(一)在高鉀抑制的心臟,大豆磷脂與油脂酸鈉和血清有恢復或增強心臟搏動的能力。 (二)磷脂在加強高鉀抑制中的機械反應同時,亦加強心肌的動作電流。 (三)腎上腺素亦有興奮高鉀與乙醯胆鹼抑制心臟的作用。與磷脂所表現有所不同,腎上腺素在高鉀任氏溶液中不出現房室阻滯;在乙醯胆鹼抑制下,則不但興奮心肌的機械反應且增加心搏的頻率。     

北京大学人體及动物生理学教研室1956学年度科学研究工作简报

過去一年內(1956年4月至1957年4月)本教研室發表了5篇文章,先後有教師二人(劉泰槰、劉次元)和研究生7人(徐湯苹、張人驥、張慧娥、胡美浩、鄭榮樑、李宏鈞、萬傳文)通過了論文答辯。     

高级神经活动生理学基礎(六) 巴甫洛夫的分析器学说与皮质机能定位学说

作为反射论三大基本原则之一的是分析与综合的原则。分析是将整体分解成为它的组成部分的过程,而综合乃是将个别部分联系成为一个整体的过程。中枢神经系统一方面对有机体的内外环境进行着精细的分析,同时又进行着複杂的综合。分析与综合是中枢神经系统的不可分割的基本活动。在有机体的正常生