TAT-MafA融合蛋白诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素

借助蛋白质转导技术，利用胰岛β细胞转录因子MafA诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素，为糖尿病的治疗提供新的方法。将TAT基因与MafA基因一起插入p32a（＋）载体中，构建TAT—MafA融合蛋白原核表达载体，转化BL21获得表达菌株，经IPTG诱导和Ni柱亲和层析纯化TAT-MafA融合蛋白，用1μM浓度的该融合蛋白孵育IEC-6细胞12h和24h后，分别进行进胞检测和胰岛素表迭检测。实验结果表明，细胞免疫荧光和Western-blot方法检测到经TAT—MafA融合蛋白作用12h后的IEC-6细胞中有该蛋白，并经细胞免疫荧光和RT—PCR的方法检测出TAT—MafA作用24h后的IEC-6细胞中有胰岛素的表达。因此，TAT—MafA融合蛋白可以高效进入小肠细胞系IEC-6细胞，并且进胞后仍保持MafA原有的生物学活性，能启动胰岛素基因的表达，诱导IEC-6成为胰岛素表达细胞。

TAT-MafA Inducing Intestinal Epithelial Cells IEC-6 into Insulin Positive Cells