PCR－SSCP检测肺癌细胞p53基因点突变

应用溴化乙锭(EB)染色的PCR-SSCP技术对10例非小细胞性肺癌组织标本p53基因外显子5～8进行分析,其中1例在外显子5～6;1例在外显子7;2例在外显子8发现异常电泳带.对1例经SSCP检测异常的p53基因进行核酸序列分析,发现第280位密码子由AGA变成ACA,其编码的氨基酸由丝氨酸变成半胱氨酸.结果证实:非小细胞性肺癌与p53基因突变有关;EB法PCR-SSCP技术是一种简便、可靠的点突变检测法.     

检查细菌呼吸方式和运动性的一管多用鉴定培养基

自行研制一种检查细菌呼吸方式和运动性的一管多用鉴定细菌用培养基,可通过穿刺接种,37℃24～48h培养后在同一支高层培养基判定好氧性、厌氧性及运动性,经过接种临床常见40个菌属120个菌株的试验结果表明,该培养基有很好的实用性。其配方组成合理,材料易得,成本不高,质量稳定,使用简单,判定容易,可以省去厌氧菌培养检查器材和试剂,有助于提高细菌鉴定工作效率和质量。     

抗寒剂 CR－4对冬小麦幼苗质膜钙泵(Ca2+-ATPase)的稳定作用

通过磷酸铈沉淀的细胞化学观察揭示,常温下生长的冬小麦幼苗的     

抗寒剂CR—4对冬小麦幼苗质膜钙泵（Ca^2＋—ATPase）的稳定作用

通过磷酸铈沉淀的细胞化学观察揭示,常温下生长的冬小麦幼苗的Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性主要定位在质膜上,同时,水浸种和抗寒剂浸种的小麦质膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性没有差异。然而,小麦幼苗经－７℃冰冻处理１２小时和２４小时后,则表现明显的区别：水浸种的小麦幼苗质膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性明显下降,直至完全失活,细胞的精细结构也同时被破坏;而经抗寒剂浸种的小麦幼苗质膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶仍维持较高的活性,细胞结构也保持完整,显示抗寒剂对质膜Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ酶起着明显的稳定作用。     

抗寒锻炼对冬小麦幼苗质膜Ca^2＋—ATPase的稳定作用

通过氯化铈（ＣｅＣｌ３）沉淀的电镜细胞化学方法,观察了抗寒锻炼对冬小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）幼苗质膜Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ的稳定作用,主要结果是：（１）正常温度（２０℃）下生长的冬小麦幼苗（未经抗寒锻炼）,其质膜上有很强的Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性反应;当经过－９℃３ｈ的低温处理后,质膜的Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性明显降低;在处理１２ｈ后,质膜的Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性进一步降低;当处理时间延长到２４ｈ,质膜的Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ完全失活,同时细胞的超微结构受到破坏。（２）冬小麦幼苗在２℃低温下锻炼１５ｄ后,其质膜的Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性高于未经抗寒锻炼的小麦幼苗。抗寒锻炼后的小麦幼苗在－９℃处理３ｈ后,质膜的Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性与低温处理前相比无明显降低;经低温处理１２ｈ,质膜仍保持较高的Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性,较同样低温处理（－９℃,１２ｈ）但未经抗寒锻炼的幼苗高;当－９℃低温处理２４ｈ后,质膜上仍可观察到Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ的活性反应,而且细胞的超微结构也未受到破坏。结果表明,抗寒锻炼可提高冬小麦幼苗质膜Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ在低温下的稳定性     

念珠菌血症时甘露聚糖抗原及其IgG抗体检测诊断价值的临床研究

目的评价念珠菌甘露聚糖抗原（M抗原）及甘露聚糖IgG抗体（M-IgG抗体）检测诊断念珠菌血症的价值。方法收集2013年5月～2014年1月我院住院患者及健康体检人群共107例,包括念珠菌血症组（念珠菌血培养阳性患者）13例、危险因素组（临床诊断侵袭性念珠菌病或接受化疗恶性疾病、留置深静脉置管等侵袭性念珠菌病感染高危患者）63例和对照组（健康体检人群）31例。通过ELISA方法检测甘露聚糖抗原及甘露聚糖IgG抗体,比较3组人群检测阳性情况及持续时间,计算两种方法的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、ROC曲线下面积及Kappa值。结果白念珠菌和光滑念珠菌为念珠菌血症的主要念珠菌病原,均为5例。念珠菌血症的7／14菌株（1例患者合并2种念珠菌感染）来自重症医学科,其次为感染内科（2／14株）。除1例死亡病例外,余12例患者进行了M抗原和M—IgG抗体监测。首次M抗原检测中,4例阳性,1例可疑阳性;首次M-IgG抗体检测中,11例阳性,1例可疑阳性。经抗真菌治疗,监测14d,M-IgG抗体持续阳性时间长于M抗原。甘露聚糖抗原在诊断念珠菌血症的敏感度41．7％,特异度98．8％,阴性预测值92．4％,阳性预测值100％。甘露聚糖IgG抗体在诊断念珠菌血症的敏感度91．7％,特异度52．8％,阴性预测值100％,阳性预测值27．5％。M抗原、M抗原并M—IgG抗体作为念珠菌血症时诊断实验的ROC曲线下面积均为0．708（95％CI：0．517—0．900）,两者的Kappa值分别为0．520和0．559。结论甘露聚糖抗原在诊断念珠菌血症时的特异度较高,甘露聚糖IgG抗体在诊断念珠菌血症的敏感性较高,两者的联合检测可以适当提高检测的敏感度及特异度,有助于念珠菌血症的诊断。     

Akt基因的研究进展

Akt是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,对细胞代谢、细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期等多种生物学过程进行调控。本文主要综述了Akt的结构、调控机制、靶蛋白及其功能。     

12种不同产地铁皮石斛指纹图谱研究及重金属元素含量测定

以12种不同产地铁皮石斛新鲜茎段为材料,以Ultimate XB C18(4.6mm×250mm,5μm)乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长270nm,柱温30℃。通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统(国家药典委员会)进行相似度分析,并建立12个不同产地铁皮石斛指纹图谱。经微波消解处理材料后,采用ICP-AES原子吸收光谱法测定不同产地铁皮石斛新鲜茎段中重金属铜、镉、铅、汞的含量,分析不同产地铁皮石斛质量,为建立铁皮石斛质量标准提供理论依据。结果表明:(1)不同产地铁皮石斛指纹图谱共有23个特征峰,相似度为0.918~0.987,其中产自安徽大别山、云南文山的铁皮石斛相似度分别为0.918、0.935,相比其他产地具有一定的差异性。(2)通过聚类分析将12种不同产地铁皮石斛分为4类:安徽霍山、江苏南京、云南石屏、云南玉溪、云南思茅为一类,云南文山、浙江仙居为一类,云南红河、广西天峨、安徽大别山、福建宁化为一类,浙江天台单独为一类。(3)产自云南玉溪的铁皮石斛茎段中铜含量超标26.25%,产自福建宁化和江苏南京的镉含量分别超标27.33%和122.30%,其它产地铜、镉、铅、汞含量在国家现行安全值以内。     

兰科植物欺骗性传粉

植物与传粉动物的互利关系在生态系统中非常普遍。然而,有许多植物不为传粉者提供任何报酬,而是利用各种欺骗方式诱骗昆虫拜访,从而实现传粉,即欺骗性传粉。兰科是被子植物大科之一,其高度特化的繁殖器官和适应于昆虫传粉的精巧结构令人称奇。进化论创始人达尔文描述了许多兰花与昆虫精巧的传粉系统,但他忽视了欺骗性传粉的存在。事实上,近1/3的兰科植物都依赖于欺骗性传粉。欺骗性传粉可能是导致兰科植物多样性的重要原因之一。兰花利用或操作昆虫觅食、交配、产卵和栖息等行为,演化出各种各样的欺骗性传粉机制,常见的类型包括泛化的食源性欺骗、Batesian拟态、性欺骗、产卵地拟态和栖息地拟态。花的颜色、形态和气味在欺骗性传粉的成功实现中起到了重要作用。欺骗性兰花与传粉昆虫之间的演化可能是不同步的,兰花追踪昆虫的行为信号而发生分化,然而欺骗性传粉可能对昆虫造成一定的伤害,从而对昆虫也施加选择压力。由于昆虫的学习行为,欺骗性的兰花一般具有低的昆虫拜访率和结实率,其繁殖成功率受各种因素的影响。欺骗性加剧了兰花对传粉昆虫的依赖,使其具有更高的灭绝风险,传粉生物学的研究能为兰科植物的有效保护提供指导。在欺骗性传粉系统中,有报酬的伴生植物、拟态模型和其他拟态信号提供者对传粉成功有重要影响。因此,研究欺骗性传粉兰花、传粉昆虫和相关的生物和生态因子的网状进化关系具有重要理论和实践意义。     

利用异源生物生产青蒿素及其前体的研究进展

青蒿素是从中药青蒿中分离出来的一种倍半萜内酯类化合物,也是目前最有效的抗疟疾药物,对人类健康意义重大。该文通过对青蒿素生物合成途径及其相关酶的介绍,综述了利用异源生物通过组合生物合成途径生产青蒿素及其前体的最新研究进展。