尺蠖蜕皮激素受体基因Eo-EcR 的克隆、生物信息学分析和表达检测

【目的】蜕皮激素受体（ecdysteroid receptor, EcR）是一种超家族核受体,它能与超气门蛋白USP组成异源二聚体复合物EcR/USP,调节20 羟基蜕皮酮（20E）的生物活性,进而调控昆虫的发育、变态及繁殖等生命过程。本研究旨在克隆茶尺蠖 Ectropis obliqua Prout EcR基因全长,并了解该基因的编码蛋白特征和时空表达模式。【方法】通过RT-PCR方法并结合RACE技术,克隆茶尺蠖EcR的基因全长,通过生物信息学软件和在线网站分析茶尺蠖EcR的生物学特性,通过实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, qRT-PCR）技术比较茶尺蠖 EcR 在不同发育时期和6龄幼虫不同组织中的相对表达含量。【结果】克隆并鉴定了茶尺蠖EcR基因,将其命名为 Eo-EcR（基因登录号: KP869130.1）,Eo-EcR全长2 268 bp,含有1 728 bp开放阅读框,编码576个氨基酸。系统进化树和氨基酸同源性比对表明,Eo-EcR具有相对保守的进化特性,特别是与鳞翅目昆虫的保守性最高。三级结构模拟和功能结构域预测表明,Eo-EcR具有3个经典的结构模型,并以α螺旋为主,功能位点单一且为C₄型锌指结构。qRT-PCR结果表明,Eo-EcR在5龄和6龄幼虫期以及成虫期表达量较高,在其他龄期表达量变化不大;同时在前胸腺表达量最高,在血淋巴表达量最低。【结论】明确了Eo-EcR的核苷酸序列及编码蛋白特征,明确了Eo-EcR的时空表达特性。该研究结果为进一步研究Eo-EcR的分子功能和基于Eo-EcR为靶标杀虫剂的研制奠定分子基础。     

植物丙酮酸磷酸双激酶研究进展

丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate orthophosphate dikinase,PPDK)作为C4光合途径中一个非常重要的限速酶,其功能已经清楚,但在C3植物中以及逆境条件下的作用尚不明确。在阐述PPDK基本生物学特征的基础上,重点介绍了PPDK在C4植物和C3植物中的功能、活性调控、基因工程以及PPDK对逆境胁迫应答的研究进展,以期为植物抗逆基因挖掘及抗逆种质创制提供参考。     

新疆维吾尔族和哈萨克族人群3个微卫星座位分析

采用基因扫描技术研究了新疆维吾尔族和哈萨克族群体D16S539、D13S317、D7S8203个微卫星位点上的等位基因及基因型分布情况,获得3个基因座的群体遗传学数据。结果表明3个基因位点在两民族中均具有遗传多态性,两民族样本在这3个微卫星位点基因频率分布大致相同。     

翠云草黄酮类化合物对哮喘大鼠模型中卵清蛋白诱导的气道炎症的改善作用

翠云草黄酮类化合物具有抗菌、抗炎、抗病毒等多种功效,其在治疗肺部疾病方面具有较高的应用价值。为考察翠云草黄酮类化合物对哮喘大鼠模型中卵清蛋白诱导的气道炎症的改善作用及机制,本研究建立了卵清蛋白诱导的哮喘大鼠模型,然后按照100 mg/kg的剂量对大鼠灌胃翠云草黄酮类化合物溶液,共灌胃1周。苏木精和伊红(HE)染色显示翠云草黄酮类化合物有效降低了大鼠肺组织中炎症细胞浸润程度(p0.05),翠云草黄酮类化合物可降低大鼠血清IFN-γ、TNF-α和IL-6水平,并提高IL-4、IL-10和IL-13水平(p0.05)。此外,翠云草黄酮类化合物显著抑制大鼠血清中总IgE和卵清蛋白特异性IgE水平(p0.05)。免疫染色显示,翠云草黄酮类化合物显著抑制大鼠肺组织的Eotaxin阳性表达(p0.05)。RT-PCR和Western blotting结果显示,翠云草黄酮类化合物可以显著增加哮喘大鼠肺组织中T2R10的表达,并降低IP3R1、Orai1、NFATc1和c-Myc的表达。本研究表明翠云草黄酮类化合物可有效减弱哮喘大鼠模型的肺组织病变程度,抑制炎症介质和炎症趋化因子的表达。其对哮喘的治疗作用与调节调节T2R10信号通路有关。     

厌氧微生物培养分离：过去、现在和未来

厌氧菌是地球上数量最多、物种最丰富的微生物,也是分类上报道最少的微生物。它们对氧气敏感、生长条件苛刻,不容易培养分离。本文简要总结了厌氧微生物的研究历史,分析了限制厌氧微生物培养分离的主要因素,讨论了厌氧微生物培养分离的策略和方法,回顾了国内外厌氧微生物的系统分类学现状,并展望了厌氧微生物培养分离的发展趋势。     

当归多糖对免疫细胞增殖作用的实验研究

探讨当归多糖对免疫细胞的直接和间接作用。用MTT法分别检测当归多糖(PCA)对PBMC的直接作用、PCAPBMC培养液对PBMC的间接作用;用流式细胞术检测PCA作用于健康人PBMC后各种免疫细胞表型的改变;检测PCA注射BALB／c小鼠后脾细胞增殖变化和巨噬细胞的吞噬能力。当归多糖对PBMC具有直接的抑制作用,而当归多糖PBMC培养液可促进PBMC增殖。PCA注射BALB／c小鼠后脾细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力均得到了不同程度的增强。研究结果为进一步阐明当归多糖的免疫机理提供了理论依据。     

表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5的重组伪狂犬病毒TK-/gG-/GP5+的构建及其生物学特性初步探讨

以伪狂犬病毒基因缺失标志疫苗株TK/gG-/LacZ 为亲本株,通过同源重组,构建了表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要免疫原性蛋白GP5的重组伪狂犬病毒TK/gG-/GP5 .经PCR、Southern杂交、Western blot证实构建正确,并能表达GP5.同时,对重组病毒在PK-15细胞中的增殖特性进行了检测,结果与亲本株相比,增殖滴度无显著性差异.将重组病毒免疫BALB/c小鼠,2次免疫后4周,50%(3/6)小鼠产生了低水平的GP5特异性ELISA抗体,但中和抗体均小于1:4.     

双歧杆菌活菌制剂治疗婴幼儿迁延性、慢性腹泻随机对照研究

目的评价金双歧治疗婴幼儿迁延性、慢性腹泻的临床疗效和安全性.方法采用双盲法,将78例迁延性、慢性腹泻患儿随机分成金双歧组40例和思密达组38例,金双歧组剂量:＜1岁,0.5 g/次,2次/d;1～3岁,1.0 g/次,2次/d,口服.思密达组剂量:＜1岁,1.0 g/次,3次/d;1～3岁,1.5 g/次,3次/d,口服.疗程为3～5 d,比较2者疗效差异的显著性.结果金双歧组与思密达组比较组疗效差异有显著性,金双歧在改善临床症状,缩短病程方面优于思密达组.金双歧对菌群失调、霉菌感染及轮状病毒性腹泻有较好的疗效.2组均无明显毒副作用.结论金双歧是治疗迁延性、慢性腹泻有效和安全的药物.     

基因组学中几个遗传学问题的探讨

新兴的基因组学(genomics)极大地发展了基因与单倍型等遗传学的经典概念,但还有许多概念原理尚需进一步探究和规范.就基因组学中几个遗传学问题进行了探讨,如现代基因的概念与分类,交换、Lod值和作图群体,单倍型和单倍型块等.