IQCE mRNA与FXR1P在酵母三杂交体系中的相互作用

脆性X相关基因1编码蛋白FXR1P是一种RNA结合蛋白,其所结合的靶RNA目前所知甚少。本研究应用酵母三杂交技术对本课题组从pRH3-cDNA人脑海马RNA表达文库中筛选到的一种可能与FXR1P存在相互作用的RNA IQCE进行研究,以验证该RNA与FXR1P的相互作用。方法为:提取利用酵母三杂交技术初步筛选得到的酵母阳性克隆的质粒,转化大肠杆菌Top10,利用其质粒不相容性分离插入了目的片段的pRH3′-cDNA质粒,将该质粒转化入含目的基因FXR1的酵母菌株L40-ura3/pHyb lex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,进行一对一的酵母三杂交验证,最后将该片段进行测序。测序结果为IQCE的一段编码序列,而目前尚无研究报导FXR1与IQCE的相互关系。结论:提示FXR1P与IQCE mRNA存在相互作用,IQCE可能是FXR1P发育调控网络组成成员之一。     

抑制JAK/STAT信号通路可减轻激素诱导的MRL/lpr狼疮鼠股骨头坏死

股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)是系统性红斑狼疮(systematic lupus erythematosus,SLE)并发症之一,其发病机制复杂,治疗棘手,是SLE致残的主要原因。已有研究证实,JAK/STAT信号通路参与SLE的病理过程,而JAK/STAT激活也被发现与ONFH的发生有关。我们推测并证实,JAK/STAT信号通路在SLE-ONFH发生发展中发挥了重要作用。30只雌性MRL/lpr小鼠随机分为3组:模型组(脂多糖/24 h,2次+甲基强的松龙/24 h,3次)、对照组(加等量PBS)和治疗组(模型组+JAK1/2抑制剂巴瑞替尼/d, 6周),每组各10只。比较各组小鼠抓力的结果表明,模型组小鼠在第4周与第6周时,抓力值较对照组明显减少(P＜0.05);治疗组小鼠在第6周时,抓力值优于模型组(P＜0.05)。造模第6周处死小鼠取双侧股骨头,观察股骨头形态及HE染色病理改变。结果表明,对照组小鼠股骨头呈球型,透亮,骨质坚硬,无软骨缺损;模型组小鼠股骨头呈不规则型,粗糙,色泽灰暗,股骨头有部分缺损;治疗组小鼠表现基本与模型组相似,总体股骨头外观形态较对照组不规则,色泽较对照组暗,股骨头有部分缺损,但其程度无模型组严重。模型组与治疗组小鼠空骨陷窝率较对照组明显升高(P＜0.05);治疗组小鼠空骨陷窝率低于模型组(P＜0.05)。通过Western印迹、ELISA和RT-qPCR检测,局部骨组织JAK/STAT通路(JAK1、JAK2、JAK3、STAT3)蛋白质表达、磷酸化水平、mRNA表达,血清及局部组织IL-6、TNF-α表达。结果表明,模型组小鼠骨组织IL-6、TNF-α和STAT3的mRNA表达显著高于对照组及治疗组(P＜0.05),且模型组小鼠血清IL-6、TNF-α的含量较治疗组、对照组明显升高(P＜0.05)。模型组的软骨分解代谢物ADAMTS-4、MMP-13及JAK/STAT通路相关蛋白质JAK1、p-JAK1、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3均显著高于对照组及治疗组(P＜0.05)。综上所述,JAK/STAT信号通路参与了MRL/lpr狼疮小鼠ONFH发病过程。选择性JAK1/2抑制剂可有效抑制ONFH炎症,改善骨结构及关节功能,并可能成为系统性红斑狼疮ONFH的有效治疗药物。     

小牛血清去蛋白提取物联合天麻钩藤饮对急性脑梗死患者神经功能及血液流变学的影响

目的:分析小牛血清去蛋白提取物联合天麻钩藤饮对急性脑梗死患者神经功能及血液流变学的影响。方法:选择2015年10月至2018年10月在我院治疗的急性脑梗死患者90例为研究对象,将其随机均分两组。对照组仅采取小牛血清去蛋白提取物治疗,实验组在对照组基础上联合采用天麻钩藤饮治疗。比较两组治疗的临床总有效率、治疗前和治疗20 d后的神经功能缺损评分、日常生活能力评分和血液流变学指标的变化以及治疗期间不良反应的发生情况。结果:治疗后,实验组的总有效率为95.56%,显著高于对照组(77.78%,P0.05)。两组治疗后的美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS)和日常生活活动能力量表(Activities of Daily Living,ADL)评分均较治疗前显著升高,且实验组以上指标明显高于对照组(P0.05)。两组治疗后的全血高切黏度、全血低切黏、红细胞比容、血小板聚集率和纤维蛋白原较治疗前均显著降低,且实验组以上指标均显著低于对照组(P0.05)。结论:小牛血清去蛋白提取物联合天麻钩藤饮治疗急性脑梗死效果显著优于单用小牛血清去蛋白提取物治疗,其可更有效促进患者神经功能的恢复,提高患者生活质量,改善其血液流变学。     

致瘤性DNA病毒的整合机制及致瘤效应

恶性肿瘤是一种严重危害人类生命和健康的疾病,而致瘤性DNA病毒是多种恶性肿瘤的主要致病因子.致瘤性DNA病毒的整合可以使宿主细胞正常组织逐步向炎症组织转变,并可导致癌变.病毒整合可引起宿主细胞基因组不稳定和重排,产生新的融合基因,并导致宿主基因表达异常,也是病毒本身得以复制,逃避宿主免疫识别并长期维系自我生存的机制之一.本文综述了目前对致瘤性DNA病毒整合规律以及致瘤性DNA病毒整合致瘤效应的研究和进展,并展望致瘤性DNA病毒整合的研究方向以及在肿瘤发生、发展、诊断和治疗上的应用前景.     

细菌杀虫剂研究和开发的现状与展望

综述了苏云金芽孢杆菌杀虫剂等四种主要的细菌杀虫剂国内外近年来研究和开发的现状及其进展概况。     

细菌荚膜多糖的抵御对抗微生物多肽的作用[英]／Campos MA…／／Infect Imman．

天然免疫系统在机体抵抗微生物的过程中起到重要作用,抗微生物多肽和蛋白(antimicrobial peptides and proteins,AP)是这一系统中的重要防御物质。AP具有多种活性,可抵御革兰阴性和阳性细菌、真菌和一些包膜病毒的致病作用。革兰阴性菌能发生一系列变化来抵抗AP的活性。如大肠埃希菌等可拥有1种外膜蛋白OmpT,能分解蛋白质以清除AP;又如淋病奈瑟菌和小肠结肠炎耶尔森菌可依赖能量将AP泵出细胞外。     

B'亚型人类免疫缺陷病毒的基因序列分析

目的研究沈阳市人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)B'亚型毒株抗原表位的变异特征.方法从确诊的HIV-1感染者的全血样本中提取基因组DNA,经套式聚合酶链反应(PCR)扩增、产物纯化和测序分析后,将所得病毒核苷酸序列翻译成蛋白质的氨基酸序列,比较和分析我国人群中较常见的HLA型别限制的CTL表位的突变情况.结果在HIV-1 gag蛋白P24编码区,有4个抗原表位相当保守,且P17部分的抗原表位的变异率高于P24部分.结论 HIV-1 B'亚型毒株P24部分的4个抗原表位适合于抗原表位疫苗的研制.     

CRF01-AE亚型人类免疫缺陷病毒的基因序列特征研究

从确诊的HIV-1感染者的全血样本中提取基因组DNA,经套式聚合酶链反应(PCR)扩增其gag蛋白P17/P24交界区基因片断后,将扩增产物进行纯化和测序,分析其氨基酸序列。进而了解所检出的病毒基因变异和分子流行病学特征。结果发现,HIV-1 CRF01-AE亚型病毒分别与3株不同来源的国际参考毒株具有紧密的亲缘关系,表明这些毒株可能分别由不同的传播路线进入我国大陆境内。     

PCR-SSCP技术及其在微生物学研究中的应用

PCR- SSCP是利用DNA单链构象具有多态性进行基因检测的一种分析技术 ,对该技术的基本原理、方法学的发展情况及其在微生物学研究中的应用作了总结。