代谢工程改造大肠杆菌生产辅酶Q10

辅酶Q10(CoQ10)是一种脂溶性抗氧化剂,具有提高人体免疫力、延缓衰老和增强人体活力等功能,广泛应用于制药行业和化妆品行业。微生物发酵法能可持续性生产辅酶Q10,具有越来越多的商业价值。本研究首先将来自类球红细菌的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因(dps)整合到大肠杆菌ATCC 8739染色体上,敲除内源的八聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因(ispB),使内源的辅酶Q8合成途径被辅酶Q10合成途径取代,得到稳定生产辅酶Q10的菌株GD-14,其辅酶Q10产量达0.68 mg/L,单位细胞含量达0.54 mg/g DCW。随后用多个固定强度调控元件在染色体上对MEP途径的关键基因dxs和idi基因以及ubiCA基因进行组合调控,将辅酶Q10单位细胞含量提高2.46倍(从0.54到1.87 mg/g)。进一步引入运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis的Glf转运蛋白代替自身的磷酸烯醇式丙酮酸:碳水化合物磷酸转移酶系统(PTS),使辅酶Q10产量进一步提高16%。最后,对高产菌株GD-51进行分批补料发酵,辅酶Q10产量达433 mg/L,单位细胞含量达11.7 mg/g DCW。这是目前为止文献报道的大肠杆菌产辅酶Q10最高菌株。     

城市供水系统对水中真菌数量和群落结构的影响

【背景】对于饮用水中的微生物污染,绝大多数研究集中在细菌、病毒及原虫和蠕虫。由于真菌中包含多种潜在致病菌,应当引起人们的关注。【目的】研究城市供水系统中真菌数量、群落组成变化及可能存在的潜在致病真菌。【方法】利用MEA和RB两种培养基,对供水系统中的原水和两个水厂净水工艺过程及不同供水模式用户龙头水样进行培养法计数统计。提取上述样本总DNA,并应用Illumina MiSeq平台进行ITS1区高通量测序。【结果】从15个样本中共获得有效序列579 470条,1 260个OTU,包含8个门26个纲67个目228个属的真菌。门水平上子囊菌门真菌为供水系统优势真菌,属水平上不同样本存在差异,但曲霉属和枝顶孢属真菌在所有样本中均存在;培养法和高通量测序结果共同显示,活性炭过滤出水真菌数量和物种丰富度均较前一工艺有所上升;氯化消毒对真菌数量、物种多样性及物种组成影响显著;经过供水管网输配和二次供水设施后,用户龙头水样本真菌数量和物种丰富度明显高于出厂水。【结论】供水系统中的优势真菌为子囊菌门(Ascomycota),该门真菌可穿透净水工艺过程的多级屏障;水厂净水工艺能有效去除水中可培养真菌,生物活性炭过滤工艺能够影响真菌数目及物种多样性;供水管网及二次供水设施是末端饮用水中真菌污染的重要来源;供水系统中存在潜在致病真菌。     

精原干细胞与睾丸生殖衰老的研究进展

雄性睾丸内精子的生成及其质量随年龄增长逐渐降低。精原干细胞是精子生成的起点,其数量和质量决定了精子的生成,而精原干细胞niche是调节精原干细胞自我更新与分化的重要因素。在衰老过程中,干细胞微环境退化,精原干细胞自我更新和分化失衡,被认为是衰老导致睾丸生殖功能衰退的的主要因素。本文将综述衰老引起的精原干细胞与niche变化及其对生殖的影响相关研究进展。     

阴道镜配合病理活检应用于宫颈疾病的诊断价值

目的评价电子阴道镜及宫颈病理活检对宫颈疾病的诊断价值。方法收集我院妇科门诊2003年至2006年宫颈疾病患者行阴道镜检查病行宫颈活检的病理结果进行对照分析。结果电子阴道镜检查后行宫颈活检1060例,病理结果显示:宫颈癌16例,宫颈上皮内瘤样变342例,宫颈炎性病变702例,阴道镜诊断宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌的符合率分别为:93.44%和93.75%。结论阴道镜检查配合病理活检诊断宫颈疾病结果及时可靠,尤其对宫颈上皮内瘤样变的早诊断及降低宫颈癌的发生率有重要价值。     

珍稀濒危铁皮石斛的研究进展

铁皮石斛是我国传统名贵中药材,具有独特的药用价值和保健功效。从1950年代以来,人们掠夺式采挖野生铁皮石斛,导致现今铁皮石斛野生资源濒临枯竭。近十多年来,随着铁皮石斛研究工作取得的巨大进展,铁皮石斛相关产业也得到迅猛发展。为使今后进一步加强铁皮石斛野生资源保护和铁皮石斛产业健康可持续发展,该综述对近年来有关铁皮石斛的研究进行概述,并对铁皮石斛野生资源保护与资源开发利用中存在的问题进行探讨。     

地衣芽孢杆菌阴道栓的试制与临床应用

地衣芽孢杆菌存在于女性阴道内,是人体的一种正常非致病菌。该栓剂使用的菌株由我院检验科从一名正常待产妇女阴道拭子分离出来,并经中科院微生物研究所鉴定为地衣芽孢杆菌,经急性毒性试验,亚急性毒性试验,证实其毒性极低。经我院     

抗坏血酸在高粘度聚乙烯醇胶体溶液中分散均一性考察

目的:考察了采用实验室常用的磁力搅拌法和改进的机械搅拌法后,聚乙烯醇胶体溶液中抗坏血酸的分布均一度。接着,在机械搅拌法的基础上,研究了抗坏血酸粉末与抗坏血酸溶液在胶中分散的均一性。方法:分散混合方法:机械搅拌法,磁力搅拌法;均一性检验方法:以单位质量胶载药量RSD值作为指标;统计学分析方法:t检验。结果:采用磁力搅拌法不能够较好地混合抗坏血酸与PVA胶体溶液;而机械搅拌法RSD值控制在10%以内,说明胶中抗坏血酸均一分布,符合生产要求。T检验表明两种方法具有显著性差异。药物溶于水后分散更为均一。结论:解决药物在高粘度溶液介质中均匀分散的问题。     

磷酸西格列汀联合短期胰岛素强化治疗对初发2 型糖尿病患者血清25- 羟维生素D及胱抑素C 水平的影响

目的:探讨磷酸西格列汀联合短期胰岛素强化治疗对初发2型糖尿病患者血清25-羟维生素D及胱抑素C水平的影响。方法:选择我院收治的初发2型糖尿病患者70例,根据电脑生成的随机数字表将所有患者随机分为实验组与对照组,每组35例。对照组患者给予磷酸西格列汀进行治疗,实验组患者在对照组的基础上联合短期的胰岛素强化治疗。比较治疗前后两组患者者血清25-羟维生素D(25(OH)D)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胱抑素C(Cys C)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、空腹血糖(FBG)及餐后2h血糖(2h BG)水平的变化。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后的血清25(OH)D水平均升高,HOMA-IR、Cys C、TGF-β1、FBG及2h BG水平均降低(P0.05);与对照组相比,实验组患者血清25(OH)D水平较高,HOMA-IR、Cys C、TGF-β1、FBG及2h BG水平较低(P0.05)。结论:磷酸西格列汀联合短期胰岛素强化治疗能够有效改善初发2型糖尿病患者的胰岛素抵抗、肾功能,并降低血糖。     

利用对虾原代细胞增殖对虾杆状病毒HHNBV的研究

自1993年起,国内养殖的中国对虾(Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ)出现暴发性流行病。该病来势猛,发病急,传播快,死亡率高,严重影响我国的对虾养殖。在青岛地区,发病时间在6～8月。一旦发病,全池对虾可在3～10ｄ内大部或全部死亡。现已查明,该流行病的病原体为对虾皮下?..     

两株中和性抗hTNFα单抗可变区与hTNFα相互作用的计算机模拟及实验研究

在SGI图形工作站上,用同源蛋白结构预测的方法,建立了2株中和性抗hTNFα小鼠单抗(1C₃E₆,3F₆A₁₀)可变区的三维结构模型;并在实验研究2株单抗表位特异性的基础上,根据2株单抗与hTNFα分子表面的形状、静电性、疏水性、氢键等性质,对2株单抗可变区与hTNFα分子的可能结合模式进行了模拟和分析。再根据结合模型,设计并制备了2个hTNFα突变体,然后从实验与计算机模拟两方面着手,对比研究了hTNFα突变前后与两株单抗的结合能力与结合方式的变化。对比研究结果支持了结合模型,该结合模型的建立,为下一步的抗体人源化或小分子化改造等打下了基础。