培养条件对新疆紫草毛状根生长及紫草素含量的影响

以发根农杆菌诱导的新疆紫草毛状根为试验材料,采用二阶段液体培养法,首次建立了新疆紫草毛状根培养技术体系。结果显示:采用SH无铵培养基、pH 5.8时有利于毛状根的生长。培养12d时毛状根的增殖倍数达最高,平均10.26倍;毛状根生产的继代周期为25～30d;4种树脂吸附的紫草素及其衍生物含量均较对照(不添加树脂)高,以NKA-9所吸附的紫草素及其衍生物含量最高,为2.38%,较对照提高0.97倍。培养10d时添加NKA-9树脂,紫草素及其衍生物含量平均为3.64%,是对照的3.08倍。研究表明,生长阶段采用液体培养可以使新疆紫草毛状根快速增殖,生产阶段添加大孔吸附树脂能够提高紫草素及其衍生物含量。     

青藏高原紫穗槐主要形态特征变异分析

应用数量统计方法,对在西藏拉萨市、曲水县和甘肃玛曲县等青藏高原区首次种植的紫穗槐3个居群的17项形态特征指标进行比较分析。变异系数分析结果表明:不同居群内及居群间的形态特征存在一定程度的变异。采用主成分分析方法,找到了积累贡献率达86.603%的4个主成分,新枝长、新枝直径、老枝直径、主根直径、二级侧根总长5个性状是造成紫穗槐形态变异的主要因素,并分析了其与根际土壤生境的相关性。通过对紫穗槐一级侧根与二级侧根根长频率分布研究,表明:(1)不同居群内及居群间各个阶段根长存在差异;(2)居群3(玛曲)中一级侧根和二级侧根根长≥40 cm的频率明显高于另外两个居群。     

大肠埃希菌的分型研究

目的分析上海某医院各科室分离大肠埃希菌的药敏状况和致病性,了解大肠埃希菌在该院流行情况。方法采用K-B琼脂法进行药敏试验,多重PCR技术进行基因分型。结果药敏结果显示该菌对多种常用抗生素具有耐药性,仅对阿米卡星等药物敏感。85株菌分为4个基因型,其中B2型25株,致病性最强;D型37株,致病性次之。菌株间亲缘关系表明可能存在院内流行。结论实验获得菌株具有较强耐药性和致病性,应当采取相应的措施预防院内感染的流行。     

吗啡与安定对清醒猕猴前额叶皮层神经元自发放电活动的影响

本实验采用慢性微电极技术,对清醒猕猴前额叶皮层神经元自发放电活动进行了观察。并结合动物行为观察了吗啡与安定对该脑区电活动的影响。在14只对伤害性刺激有反应的神经元中,观察了9只神经元对静脉注射吗啡的效应,其中8只被激活;对伤害性有反应的7只神经元,注射安定后,仅有2只神经元的活动受到抑制,其它无变化。看来吗啡与安定对前额叶皮层的活动在一定的影响。     

心理干预对脑卒中抑郁焦虑情绪的康复作用及对患者治疗依从性的影响研究

目的:探讨心理干预对脑卒中抑郁焦虑情绪的康复作用及对患者治疗依从性的影响。方法:我院老年科、神经内科、康复医学科治疗的脑卒中并出现抑郁焦虑情绪障碍的患者120例,随机分为观察组和对照组,各60例,两组患者均入院以后给予脑血管药物进行常规治疗和日常功能训练;观察组同时给予心理干预并根据病情应用抗抑郁抗焦虑药物等。于干预前、干预后3个月、6个月、1年分别对两组患者用SCL-90量表、总体幸福感指数量表、Barthel指数量表对患者进行评估,并评估患者治疗依从性。结果:干预后,观察组SCL-90各因子评分及总分均较干预前明显降低(P0.05),对照组SCL-90各因子评分及总分与干预前比较无统计学差异(P0.05)。干预前两组患者总体幸福感评分和Barthel评分比较无统计学差异(P0.05),干预后3个月、6个月和1年观察组总体幸福感评分和Barthel评分均明显高于对照组(P0.05)。观察组患者在治疗期间总体依从率明显高于对照组(P0.05)。结论:心理干预能够有效的改善脑卒中患者早期康复病人抑郁和焦虑的情绪,提高患者治疗的依从性。     

水杨酸对水分胁迫黄瓜幼苗叶片生理过程的影响

研究了外源水杨酸(salicylic acid,SA)对水分胁迫下黄瓜幼苗叶片主要生理过程的影响。1mmol／L的SA处理黄瓜幼苗24h后,叶片中POD活性剧增,SOD活性增加不明显,H2O2清除酶CAT和APX活性受抑制,H2O2含量上升引起膜脂过氧化产物MDA含量上升,造成轻度氧化胁迫;在随后水分胁迫过程中,经SA预处理积累的H2O2诱导APX和CAT活性上升并清除产生的H2O2;SA预处理后,叶片中Rubisco含量及其基因转录水平明显高于对照,光合作用受影响较小。这表明SA使黄瓜幼苗生理活性有较大改善,增强了植株对水分胁迫的抗性。     

不同品系小鼠的体外受精、胚胎冷冻及移植的比较研究

目的　探讨不同品系小鼠的体外受精、胚胎和精子的低温保存效果。方法　本实验分别在中国科学院上海实验动物中心 (SLAC)和日本熊本大学动物资源开发中心 (CARD)对 13个品系小鼠 (C57BL 6J、BALB c、C3H HeJ、ICR、KM、FVB、MRL、NOD、CBA、DBA 2、CD 1、BDF1、B6C3F1)的体外受精 (IVF)率、胚胎培养及移植成绩进行了比较研究。结果　各品系小鼠新鲜精子的IVF率 15 1%～ 87 9% ,冻融精子的IVF率 8%～ 80 % ;冷冻胚胎的复苏率4 2 6 %～ 83 9% ;冻融胚胎移植后的产仔率在 17 8%～ 5 1 8%。结论　遗传背景不同的小鼠体外受精率、冷冻胚胎复苏率和胚胎移植的产仔率差异有显著性。但同一品系两个实验室间的新鲜精子的IVF率、冷冻胚胎的复苏率及移植产仔率差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;冻融精子的体外受精率CARD明显高于SLAC(P <0 0 1)。     

低温对离体大鼠心室肌复极时程的影响及其机制

目的: 观察低温对离体大鼠心室肌复极时程及Kir2.1蛋白表达的影响,探讨Kir2.1蛋白在其中的作用。 方法:18只健康雄性SD大鼠, 随机分为3组(n=6),即正常对照组(C组)、35℃低温组(H₁组)和32℃低温组(H₂组)。制备Langendorff离体心脏灌注模型,37℃ K-H液平衡灌注15 min后,C组继续灌注37℃ K-H液30 min;H₁组继续灌注35℃的K-H液30 min,H₂组继续灌注32℃的K-H液30 min。记录各组平衡灌注15 min(T₁)和继续灌注30 min(T₂)时HR、左心室前壁三层心肌单相动作电位,计算单相动作电位复极50％、90％的时程(MAPD₅₀、MAPD₉₀)和跨室壁复极离散度(TDR),同时记录心律失常发生情况。取测量电生理的心室肌部位组织以Western blot测定Kir2. 1蛋白表达,以免疫组织化学法测量Kir2. 1蛋白的平均光密度值(AOD)及分布情况。结果: 与T₀比较,T₁时H₁组和H₂组HR显著减慢(P＜0.05), MAPD₅₀、MAPD₉₀显著延长(P＜0.05),TDR显著增大(P＜ 0.05);与C组比较,T₁时H₁组和H₂组HR显著减慢(P＜0.05),MAPD₉₀显著延长(P＜0.05),TDR显著增大(P＜ 0.05),Kir2.1蛋白表达显著减少(P＜0.05), AOD值显著减少(P＜0.05)。与H₁组比较,T₁时H₂组心率显著减慢(P＜0.05),MAPD₅₀、MAPD₉₀显著延长(P＜0.05),TDR显著增大(P＜0.05)。C组Kir2.1蛋白分布正常,H₁、H₂组蛋白分布紊乱。结论: 低温会延长心室复极时程,增加复极离散度,其机制与低温下调Kir2.1蛋白表达、改变Kir2.1蛋白分布有关。     

香蕉抗(感)病品种根系分泌物对枯萎病菌和枯草芽孢杆菌的生物效应

为明确香蕉根系分泌物对枯萎病菌及其生防枯草芽孢杆菌的生物效应,采用离位溶液培养法收集抗枯萎病香蕉品种(南天黄)和感枯萎病香蕉品种(桂蕉6号)的根系分泌物,研究根系分泌物对土壤微生物种群数量、香蕉枯萎病菌和枯草芽孢杆菌生长的影响。结果表明: 抗病品种根系分泌物能显著减少土壤真菌的数量,抑制枯萎病菌孢子的萌发;而感病品种根系分泌物能显著促进病菌菌丝生长和孢子的萌发,两个品种根系分泌物均能显著促进枯草芽孢杆菌的生长和生物膜形成。经抗(感)病香蕉品种根系分泌物处理,病菌菌丝生长速率分别为11.28和12.28 mm·d^-1,病菌孢子的萌发率分别为34.6%和79.5%;枯草芽孢杆菌培养12 h后菌体生长量的OD₆₀₀分别为1.27和1.14,生物膜形成量在静置培养72 h后OD₅₇₀分别达1.11和1.30,两个品种处理间的差异均达显著水平。枯草芽孢杆菌在香蕉感病品种根际中定殖的菌量显著高于抗病品种。通过对两个品种根系分泌物中可溶性总糖、游离氨基酸和有机酸的含量和组成分析,发现抗病品种根系分泌物中有机酸和游离氨基酸的含量明显高于感病品种,在各组成成分中,以乙酸和脯氨酸在抗(感)病香蕉品种根系分泌物中含量比值较高,分别达3.7和2.4倍。综上所述,抗病品种根系分泌物能抑制病菌生长,感病品种根系分泌物则会显著促进病菌生长,而两个品种根系分泌物均能显著促进枯草芽孢杆菌的生长和生物膜的形成。     

miR-27a-3p通过靶向Sema7A调控病毒性心肌炎心肌细胞损伤的机制研究

目的探讨微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)过表达对病毒性心肌炎(VMC)细胞损伤的影响及其可能的作用机制。方法原代培养大鼠心肌细胞,柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌细胞建立VMC模型(CVB3组)。正常心肌细胞作为对照组,分别将miR-NC、miR-27a-3p mimics、si-NC,si-Sema7A分别转染至CVB3感染的心肌细胞,记为CVB3+miR-NC组、CVB3+miR-27a-3p组、CVB3+si-NC组、CVB3+si-Sema7A组。分别将miR-27a-3p mimics与pcDNA,miR-27a-3p mimics与pcDNA-Sema7A共转染至CVB3感染的心肌细胞,记为CVB3+miR-27a-3p+pcDNA组、CVB3+miR-27a-3p+pcDNA-Sema7A组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与Western blot法分别检测细胞中miR-27a-3p、信号蛋白7A(Sema7A)的表达水平;流式细胞术检测miR-27a-3p过表达或干扰Sema7A表达后心肌细胞的凋亡率;酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)的含量;双荧光素酶报告基因验证miR-27a-3p与Sema7A的靶向关系;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达。两组间比较采用独立样本t检验。结果与对照组比较,CVB3组miR-27a-3p的表达水平(1.01±0.09比0.42±0.04)降低,Sema7A的mRNA和蛋白表达水平(1.02±0.09比2.15±0.21、0.43±0.04比0.94±0.09)升高,TNF-α、IL-1水平[(403.56±38.16)pg/mL比(1156.48±63.59)pg/mL>(29.45±3.54)pg/mL比(136.57±12.47)pg/mL]升高,细胞凋亡率[(5.36±0.54)%比(24.58±2.14)%]升高,Bax、cleaved caspase-3的表达水平升高,Bcl-2的表达水平降低(P均<0.05);与CVB3+miR-NC组比较,CVB3+miR-27a-3p组TNF-α,IL-1水平[(1187.69±71.42)pg/mL比(516.28±48.31)pg/mL、(147.25±14.05)pg/mL比(43.68±5.02)pg/mL]和细胞凋亡率[(26.38±2.55)%比(10.24±1.15)%]降低,Bax、cleaved caspase-3表达水平降低,Bcl-2表达水平升高(P均<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-27a-3p可靶向调控Sema7A的表达;Sema7A过表达可逆转miR-27a-3p过表达对CVB3诱导的VMC细胞损伤的作用。结论miR-27a-3p过表达可降低VMC细胞中炎症因子的表达及抑制细胞凋亡从而减轻心肌损伤,其作用机制可能与靶向调控Sema7A的表达有关。