微生物多样性的全球影响

微生物多样性的全球影响张树政（中国科学院微生物研究所北京１０００８０）张树政研究员,中国科学院院士。１９４５年毕业于北京大学化学系。１９４５年至今从事微生物生理生化、代谢及酶等基础及应用研究。５０年代即开始曲霉淀粉酶的研究,证明了黑曲霉糖化酶的优越性...     

耐热DNA聚合酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

用PCR法从水生栖热菌菌株YT－1中扩增耐热DNA聚合酶基因,得到2．5kb的DNA片段t扩增片段重组到pUCl8中测序证实为Taq DNA聚合酶基因,将该片段重组到pBV221温控表达质粒中,在大肠杆菌中表达出94kDa的重组蛋白,100ml培养物的细胞产酶为1．5×10⁵u,表达的蛋白能催化PCR反应的进行。     

红曲霉葡萄糖淀粉酶的紫外差光谱的研究

红曲霉葡萄糖淀粉酶(EC3 2．1．3)在凝胶电泳上呈现3--5个极为接近均具有酶活性的区带,测定了其中主要的两个分子型E,和E．的紫外吸收特性,它们在水,pH5．0酷酸缓冲液,pH7．0柠檬酸缓冲液中吸收光谱十分接近,吸收峰均在Z80am。 E,在水溶液中280am时8=11．3 x104,A==20．4,E．在水溶液中280rim时8=11．0×104Ai==20．0,E3和E4在0.1NNaOH中吸收均增强且峰位红移,在0.1N HCI中吸收峰略为蓝移。测定了E,和E．在pH 3．1和pH 3．6时的温度差光谱,在pH 3.1 E,和E. AA变化极小,在pH 3.6,E,比E．△A变化大,但转变温度E,和E．都在56℃左右。E,和E．酪氨酸光谱滴定行为极为接近,其pK值在11．5左右。测定了E,pH差光谱和变性差光谱,以pH 2．66为参比溶液,在pH 3.55、4.65、7.14及7．84可以见到酪氨酸和色氨酸的差吸收峰。8M尿素和6M盐酸胍均能使E,出现酪氨酸和色氢酸的负的差吸收峰。     

康氏木霉纤维素酶系中Cx酶多分子型的分离纯化及某些性质

从康氐木霉(Trichoderma kkoningii) 白色变异株 AS 3．4001的粗酶制剂中,获得了纤维素酶系中的一组C_x酶(C_xt C_xz C_z3 C_z4)。分离步骤包括Sephadcx G-75凝胶过滤,DEAE-Sephadex A-50离子交换层析,ConA-Sepharnse亲合层析,SE—Sephadcx C-50离子交换层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳。C_xt 与C_xt 的分子量不同而所带电荷相同,它们的分子量各自为44,500和34,000。C_xz—C_x4 的分子量相同而所带电荷不同。纯化的C_xt—C_z4“经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单带。比较它们对羧甲基纤维素钠(CMC—Na)的糖化力及液化力表明在作用方式的随机性上C_xz>C_z3>C_z1>C_x4。     

利用牛肝过氧化氢酶结晶测定电子显微镜的放大倍数

为了将电子显微镜的性能维持在最佳状态,电镜的放大倍数至少要每月校正一次,最好是经常校准。新生产的电子显微镜在出厂前要测定在各种条件下的放大倍数曲线,以供用户使用。在使用电子显微镜过程中,由于电源电压的漂移、样品的差异、载网的弯曲以及电镜参数的变化等原因,均能引起放大倍数曲线的漂     

白地霉糖代谢酶体系的研究

除磷酸己糖激酶外,在白地霉无細胞提取液中测出有EMP途径及磷酸戊糖循环的主要酶类,葡萄糖和木糖培养的菌体在各酶活力方面无显著差异。用葡萄糖-C~(14)进行的呼吸实驗表明两种糖培养的菌株在不同代謝途径的相对比重方面也无明显差异。     

耐高渗透压酵母产生甘油及阿拉伯糖醇的研究IV．耐高渗透压酵母的糖代谢途径

1．测定了两株耐高渗透压酵母(Hansenula arabitolgenes Fang．275及 Zygosaacharo-myces cheyalieri Guill．2．309)无细胞提取液中EMP 及磷酸戊糖循环的酶活力,除在2．309中未能测出磷酸果糖激酶外,其他所测备酶在两株酵母中均有活力。 2．在两株酵母中均有联系NADP的多元醇脱氢酶,催化二攫丙酮还原为甘油(275厦2．309中)以及D-核酮糖还原为D一阿拉伯糖醇(仅在275中)。 3．用葡萄糖-C14的呼吸实赊表明在275号酵母中磷酸戊糖循环占较大比重,这与它能产生大量五碳化合物——阿拉伯糖醇是相符的。     

产碱菌外切异麦芽三糖水解酶的产生和性质

从污染的右旋糖酐溶液中分离出一株外切异麦芽三糖水解酶(Exo-isomaltotrio-hydrolase,1,6-α-D-Glucan isomaltotriohydrolase EC 3.2.1.95)产生菌,经鉴定为产碱菌(Alcaligenes sp.).研究了酶的产生条件和基本性质.产酶最适培养基组成(%):右旋糖酐1.5、鱼粉蛋白胨1、酵母抽提物0.1、牛肉膏0.3、甲醇2,pH8.0,250ml三角瓶中装20ml培养基,于26℃200r/min旋转摇床上振荡培养48小时.酶的最适作用温度和pH分别为50℃和p H6.5—7.5,在pH5.0—10.6范围内稳定.在40℃保温24小时酶活力基本不变,50℃保温8小时剩余酶活力为71.8%,保温24小时剩余酶活力为44.2%,在55℃酶活力的半寿期为10 小时.金属离子Hg^(2+)、Ag^+对酶强烈抑制.水解右旋糖酐的终产物为异麦芽三糖,酶的作用方式为外切型.