甘草甜素对树突状细胞表型及生物学功能的影响

培养小鼠髓系DC2．4细胞,加入LPS（阳性对照组）或甘草甜素,用扫描电镜观察DC的超微结构、流式细胞仪检测DC表面分子MHCII、CD86及CD40的表达、4-氨基安替比林（4-AAP）比色检测DC内酸性磷酸酶活性、ELISA方法检测DC培养上清中IL—12的浓度,体外刺激淋巴细胞增殖实验检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激能力。结果表明,与对照组相比,甘草甜素刺激后,DC表面树突状突起增多,表面分子MHCⅡ、CD86及CD40表达增加,酸性磷酸酶活性下降,培养上清中IL-12浓度升高,刺激同种异体T淋巴细胞的能力也明显增强。结果表明,甘草甜素能够促进小鼠髓系DC2.4表型及功能的成熟。     

华癸中生根瘤菌质粒复制基因repC的克隆与鉴定

摘要：【目的】repC为质粒复制必需的起始蛋白基因。本研究旨在对华癸中生根瘤菌菌株HN3015及其质粒消除突变株进行repC基因的克隆和鉴定。【方法】采用通用引物RC1和RC3进行repC基因的PCR扩增,扩增产物克隆到载体pMD-18T,然后测序。利用Southern 杂交对repC基因定位。利用在线软件分析基因的序列特征,BLAST 工具进行同源性搜索;ExPASy推断其氨基酸的序列;ClustalW进行同源核苷酸和氨基酸序列的多重比较分析;PredictProtein 进行蛋白二级结构分析。【结果】     

华癸中生根瘤茵7653R共生质粒pMH7653Rb的不相容性行为

摘要华癸中生根瘤菌菌株7653R含有2个内源质粒（pMH7653Ra,pMH7653Rb）．用三亲本杂交法将7653R的共生质粒pMH7653Rb分别导入HN308SR（Sm^r,Rif^r;含pMHHN308a,pMHHN308b和pMHHN308c）和HN3015SR（Sm^r,Rif^r;含pMHHN3015a,pMHHN3015b和pMHHN3015c）．发现受体菌HN308SR的两个稳定内源质粒pMHHN308b和pMHHN308c随着pMH7653Rb的导入而同时被消除．该接合子命名为HN308SRN14．这一结果表明pMH7653Rb与pMHHN308b和pMHHN308c不相容,可以归于同一不相容群．另一转移接合子HN3015SRN14的质粒图谱显示其第二大质粒pMHHN3015b由于pMH7653Rb的导入而被消除．该结果表明,pMH7653Rb与pMHHN3015b不相容．植物结瘤实验结果表明,pMH7653Rb的导入能恢复HN308SRN14的结瘤能力,其结瘤数目超过HN308SR,但不能替代pMHHN308b和pMHHN308c的固氮作用,HN308SRN14失去了固氮能力．质粒消除突变株HN308SRNl4D只含有pMHHN308a,能形成少量无效根瘤,确认pMHHN308a与HN308的结瘤能力有关．HN3015SRN14（含pMH7653Rb,pMHHN3015a和pMHHN3015c）只能形成无效根瘤,而质粒消除突变株HN3015SRN14D（仅含pMHHN3015a和pMHHN3015c）则完全失去结瘤能力．通过PCR反应从7653R,HN308,HN3015,HN308SRN14,HN3015SRN14中均检测到质粒复制基因repC．供试菌株的repC基因序列相似性达到99％．