具有分泌蛋白能力的短芽孢杆菌的筛选及鉴定

短芽孢杆菌（Bacillus　brevis）具有分泌蛋白能力强和胞外蛋白酶活性低的特性,是分泌表达外源蛋白较理想的宿主。为获得分泌表达系统较理想的宿主菌,建立了短芽孢杆菌高效筛选模型,从800余株细菌中筛得8株具有高蛋白分泌能力且没有胞外蛋白酶活性的候选菌。经多相分类学初步鉴定其中5株为短芽孢杆菌。     

阿尔茨海默病

近年来,对阿尔茨海默病（Alzheimer＇sdisease,简称AD）的分子基础的了解进展迅速,特别是AD病人脑内空斑（plaque）和缠结（tangle）化学组分的鉴定和导致该病家族性形式的遗传突变的鉴定。淀粉样蛋白前体蛋白（amyloidprecursorprotein,APP）在AD中起重要作用,它产生β－淀粉样蛋白,后者是空斑的主要组分。已知编码APP的基因的突变使一些个体易感早发性AD。再者,APP基因位于２１染色体;唐氏综合征（Down＇ssyndrome）患者有三条２１染色体,他们３０岁时就会犯AD。关于从APP生成β－淀粉样蛋白的生化基础的知识对了解阿…     

溶脲脲原体的尿素酶基因变异及其在生物分型中的意义

应用PCR技术成功地从溶脲脲原体14个血清型中获得尿素酶基因片段,经分析发现各序列间高度保守但也存在一定程度的变异,据此绘制的系统进化树可将14个血清型分为两大群,与在两个生物型划分的唯一区别是将属于生物1型的血清型3归于生物2型,在14个型的序列中,不同的核苷酸可作为区分各血清型的特征性碱基。     

气相色谱-质谱法分析肠杆菌细胞脂肪酸

用气相色谱质谱法分析了15种肠杆菌的全细胞酸性水解物,对结果中近30种脂肪肠酸初步化学定名13种,即C11：C12:0,C13:0、C14:0、C15:0、20H—C14:0、 3OH—C14:0 c-16:1、C16:0、aC17:0、C17:0、c13:1和D18:0,其中含量较高者为C-16:0、C18:1、 C15:0、 C-14:0、C16:0、C13:0、3OH—C14:0和C11:0。肠杆菌细胞脂肪酸成分特征是以直链饱和不饱和脂肪酸为主,C16:0。含量最高,而且均含有一定量的30H—C14：0,沙雷氏菌含20H—C14：0,其他未知成分也具有一定特征。本结果为肠杆菌的化学分类学和分子细菌学研究提供了资料。     

重组人表皮生长因子的研究概况

人表皮生长因子又称尿抑胃素,是存在于人体内的一种重要的多肽生长因子。它是在1975年由Cohen等和Gregory各自独立地从人尿液中分离得到的,并被分别命名为“人表皮生长因子(Human Epidermal Growth Factor, hEGF)”和“尿抑胃素(Urogastrone, UG)”。后来的研究证明两者实为同一物质,遂将其名称统一为“人表皮生长因子”。     

细胞单糖气相色谱图鉴别细菌的研究

本文介绍细胞单糖毛细管柱气相色谱图的绘制方法,对所得细菌细胞单糖气相色谱图中的某些组分进行分析鉴定,并借助电子计算机对细菌细胞单糖模式进行聚类分析。用上述方法鉴别了24株(5种)芽孢杆菌,均得到满意结果。结果表明,炭疽芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的单糖图谱有较明显的区别。     

重组人脑源性神经营养因子的纯化和鉴定

在确定培养条件和发酵参数后 ,工程菌 E.coli BL2 1 ( DE3) /PVBN6在 5 L发酵罐中稳定表达。获得的菌体经超声破碎 ,离心收集包含体。 6mol/L盐酸胍缓冲液溶解包含体 ,用透析法将盐酸胍替换成脲后 ,经过 CM Sepharose F.F.阳离子交换色谱和 C8反相色谱 ,可得到纯度达 95 %以上的rh BDNF。Western- blot表明 ,rh BDNF与抗 - h BDNF多克隆抗体有结合特异性。用 9日龄鸡胚背根神经节测定生物活性 ,rh BDNF活性为 5 0 ng/ml。N-末端氨基酸序列测定表明 rh BDNF N-末端为Met,其后 1 6个氨基酸残基与天然 h BDNF N-末端氨基酸残基序列一致     

代谢工程与重组大肠杆菌的发酵

利用代谢工程可以在重组大肠杆菌的改良中减少代谢副产物乙酸的累积,优化代谢系统,利于重组蛋白质的高表达以及重组菌的高密度发酵。应用代谢工程改良重组大肠杆菌主要包括阻断乙酸产生的主要途径、限制糖酵解途径上的碳代谢流、将过量的丙酮酸转化为其它低毒的副产物以及对碳代谢流进行分流等几个方面的工作。     

培养基中无机磷的测定

本文描述了一种用磷钼蓝法测定培养基中无机磷含量的方法。由于培养基中蛋白质浓度较高,用普遍磷钼蓝法测定时会出现沉淀,我们采用十二烷基磺酸钠(SDS)使蛋白质增溶,既防止了沉淀,也免去了去除蛋白质的繁琐,使测定工作简便、快捷、准确。     

细胞脂肪酸气相色谱图鉴别细菌的研究

本文介绍了细胞脂肪酸毛细管柱气相色谱图的绘制方法,对所得细菌细胞脂肪酸气相色谱图中的某些组分用气相色谱一质谱一计算机联用技术进行了分析鉴定,并借助电子计算机对细菌脂肪酸模式进行了聚类分析。用上述方法分别对24株(5种)芽孢杆菌、14株(3种)无芽孢杆菌、3种弧菌和2株临床分离的类霍乱弧菌进行鉴别,均得到满意结果。为微生物的分类鉴定、生理生化研究提供了一种现代分析方法。