环孢霉素A逆转人白血病耐药细胞系HL-60/ADM及其超微弱发光的观察

目的:探讨环孢霉素A(CSA)对抗阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系HL-60/ADM的耐药逆转作用,并比较二者之超微弱发光强度的特点。方法:选择环孢霉素A(CSA)作为耐药逆转剂,分别采用MTT法、流式细胞仪和免疫组化法分析CSA对人白血病耐药细胞系的毒性及逆转效果;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测细胞的超微弱发光强度。结果:当CSA浓度在4ug/mL以下时,对HL-60/ADM无明显毒性作用,超过此浓度,其毒性呈剂量效应(P＜0．001)。当CSA浓度为0．5ug/mL时就有明显逆转作用,随着CSA剂量增加,逆转作用逐渐增强(P＜0．01),当CSA剂量达8ug/mL以上时对细胞存活产生明显的影响;流式细胞仪分析细胞周期可见逆转耐药细胞系HL-60/ADM CSA较耐药细胞系HL-60/ADM的G2期细胞显著增多,而S期细胞明显减少(P＜0．01);免疫组化结果显示HL-60/ADM细胞膜上P-gp高表达,经CSA作用后其表达下降;在10-4mol/L鲁米诺及0．3%双氧水条件下HL-60/ADM细胞超微弱发光强度高于用CSA逆转后的细胞(P＜0．001)。结论:CSA能有效逆转HL-60/ADM的耐药性;逆转后细胞超微弱发光强度值的降低可能与其细胞增殖速度减慢,DNA复制减少,细胞内氧化代谢减弱以及自由基水平降低等因素有关。     

病理学专业学位研究生临床与科研能力培养模式初探

病理学是研究疾病的发病、病变机理及在疾病发展过程中各组织器官形态特征与功能变化的一门学科,被称作是联系基础与临床的桥梁和纽带。据统计我国现阶段临床病理医生的需求量很大,而高水平临床病理诊断医师尤为欠缺。近年来,病理学专业学位研究生的培养应运而生,旨在为国家培养高质量的病理学人才。然而由于我国传统的病理学研究生的培养仍存在种种弊端,毕业的研究生难以获得临床与科研二者综合能力的提升,因而限制了其自身在病理学事业方面的发展。本文依据我科室专业学位研究生的培养经验,探讨病理学专业学位研究生的培养模式以及如何培养高层次病理学人才,促进其科学研究与外科病理诊断的有机结合,为推动我国病理学事业的蓬勃发展打好坚实基础。     

蟹爪兰的组织培养与快速繁殖

1 植物名称 蟹爪兰（Zygocactustruncactus k Schum） 材料类别 幼嫩茎段、顶芽。     

日本迷你南瓜的组织培养及快速繁殖

1植物名称日本迷你南瓜(Cucurbitapepo),日文名为プツチィ一二,英文名为Puccini. 2材料类别带节茎段、子叶苗茎尖. 3培养条件基本培养基为改良MS(2倍FeSO4·7H2O和KH2PO3).芽诱导培养基:(1)改良MS 6-BA 1.0mg·L-1(单位下同),(2)改良MS 6-BA 1.0 NAA 0.1;增殖继代培养基:(3)改良MS 6-BA 0.8 IBA 0.05;壮苗培养基:(4)改良MS 6-BA 0.2;生根培养基:(5)1/2改良MS IBA0.6,(6)1/2改良MS NAA0.6.培养基中均添加绵白糖3%、琼脂粉0.6%,pH 6.0.培养温度为(25±2)℃,光照度2 500～3 000 lx,光照时间为14 h·d-1.     

人巨细胞病毒博弈宿主免疫进展

人巨细胞病毒(HCMV)感染在人群中极其普遍,病毒一旦侵入机体,将长期存在于体内,且具有潜伏-活化的生物学特性。在病毒与宿主共同进化的漫长过程中,病毒靶向性的产生了多种免疫逃避机制,通过编码病毒自身免疫调节分子,参与调控机体主要组织相容性复合体、细胞免疫、体液免疫、细胞因子及趋化因子等方面的功能,以躲避宿主的免疫杀伤作用。HCMV的免疫调节基因被认为在病毒的致病机制中扮演重要角色。本文将对近年来有关HCMV的免疫调控机制研究作一综述,从病毒编码的免疫调节分子功能的角度并结合本实验室的相关研究成果,探讨病毒与宿主免疫的相互作用过程,从病毒干预宿主免疫关键分子作用的角度映射机体对抗病毒的免疫机理。     

组蛋白H3甲基转移酶Ezh2与小鼠脂肪细胞分化关系研究

目的:探索组蛋白H3K27me3甲基转移酶Ezh2对小鼠白色、棕色和米色脂肪细胞分化的影响。方法:构建诱导型Ezh2全身敲除小鼠(Ezh2~(flox/flox) CAGcre)并于6周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导敲除,以同窝、同性别、相同基因型假诱导(腹腔注射玉米油)小鼠作为对照。诱导完成后在光镜下观察脂肪细胞形态,采用Western Blot法检测脂肪组织中H3K27me3、Ezh2和Ucp1的蛋白表达量。采用Realtime PCR法检测不同部位脂肪组织的脂肪分化相关基因(Pparγ、Adipoq和Fabp4)、棕色脂肪标志基因(Ucp1、Cidea和Prdm16)和米色脂肪标志基因(CD137、Tmem26和Tbx1)的表达。检测敲除组小鼠的冷耐受能力,并予以高脂饮食诱导肥胖,观察小鼠体重增长情况、诱导结束后小鼠的糖耐量和胰岛素敏感性指标。结果:Ezh2敲除小鼠Ezh2和H3K27me3的蛋白含量降低,背部棕色脂肪细胞脂滴明显小于对照组,Ucp1的基因和蛋白表达明显高于对照组(P0.05);敲除组小鼠白色脂肪细胞分化较差,米色脂肪分化增加,米色脂肪的Ucp1和Tbx1基因表达增加(P0.05)。敲除小鼠可以更好地耐受冷刺激,并抵抗高脂饮食诱导的肥胖和胰岛素抵抗。结论:Ezh2在体内促进白色脂肪细胞的分化,抑制棕色和米色脂肪细胞分化。     

AMPK与脂肪细胞分化的关系研究及其在人脂肪源性肿瘤组织中的表达特点

目的:探讨AMPK在脂肪细胞分化过程中的作用以及与脂滴相关表面蛋白Cidec的表达关系,为肥胖发生及其防治肥胖及肥胖相关性疾病提供重要的理论依据。方法:通过免疫组织化学、Real-time PCR和Western blot等方法分析AMPK和Cidec在脂肪细胞分化中的作用,明确二者的相关性。结果:在不同分化程度的脂肪源性肿瘤组织中,AMPK表达随着脂肪细胞分化程度的升高而表达降低,而Cidec的表达是逐渐增高的;在不同发育阶段的胎儿脂肪组织中,AMPK随着胎龄的增加表达逐渐降低(P0.01),而Cidec的表达则呈逐渐增高的趋势(P0.01);以上AMPKα的表达均与Cidec的表达水平呈负相关。结论:AMPK可能在脂肪细胞分化过程中扮演重要角色,研究其与Cidec的表达与作用关系可能为脂肪细胞发育及分化提供重要线索及依据。     

中国人群肤纹的主成分分析

近年来 ,我国学者多将中国人群分为南、北两大类群。作者对我国 5 9个人群的肤纹进行主成分分析。结果表明 ,根据肤纹特征 ,可将中国人分为 6个族群 ,除北方族群、南方族群外 ,存在着新疆族群与西藏族群。新疆族群与北方族群相比 ,斗型率低 ,尺箕、桡箕率高 ,小鱼际区与指间区Ⅱ、Ⅲ真实花纹率高。西藏族群斗型率高、尺箕率低。北方族群与南方族群相比 ,指纹嵴线总数、小鱼际区与指间区Ⅲ真实花纹率高。此外 ,还存在南北族群间的过渡族群与南北混合族群。 8个汉族人群未能聚集 ,分散于各族群中。这表明 ,汉族与少数民族间、南北方民族间存在着肤纹基因的交流。将中华民族分为南北两大类群的观点可能过于简单化了。     

蓝粒小麦花青素生物合成途径中的二氢黄酮醇4-还原酶基因的分子克隆

蓝色色素在蓝粒小麦种子糊粉层中的生物合成途径的分子生物学机制至今仍不清楚.应用RT-PCR和RACE方法从蓝粒小麦正在发育的种子中克隆到一个编码二氢黄酮醇4-还原酶的基因(DFR).推测其为花青素生物合成途径中的一个关键基因,且与蓝粒小麦中蓝色色素形成密切相关;其开放阅读框编码一个包含354个氨基酸残基的多肽,与一些从其他植物中已克隆到的DFR有很高的同源性:大麦(94%)、水稻(83%)、玉米(84%).从长穗偃麦草(2n=70)、蓝粒小麦、浅蓝粒小麦自交产生的白粒后代小麦以及中国春的基因组中分别分离到一个全长DFR序列.经聚类分析表明DFR cDNA核甘酸序列与从中国春基因组中克隆的DFR具有100%的同源性,且与长穗偃麦草、蓝粒小麦、白粒小麦基因组中分离的DFR均有很高的同源性.4个DFR基因组DNA均含有3个内含子,且它们之间的差异主要在内含子区,表明该基因在进化上很保守.经Southern杂交分析,DFR在小麦中至少有3～5个拷贝,不同小麦材料间未见明显差异,但与长穗偃麦草有明显差异,属于一个DFR超基因家族.Northern分析表明该DFR在蓝粒和白粒种子的不同发育时期的表达存在明显差异,都在开花后大约18 d表达最强,在同一时期的蓝白种子中,DFR在蓝粒种子中的表达量高于白粒.DFR转录本在小麦和长穗偃麦草的幼叶中积累多,但在芽鞘中的表达显著低于幼叶中;在小麦的根和长穗偃麦草的发育种子中均未检测到DFR的表达.推测蓝粒小麦中可能存在调控DFR在蓝粒小麦中表达的调控基因,类似于玉米花青素合成途径中的调节基因.     

泛素连接酶gp78促进体外肝细胞脂肪变性的作用研究

目的:研究泛素连接酶gp78在体外肝细胞脂肪变性发生过程中的作用。方法:在小鼠肝细胞内转染携带gp78的质粒DNA,400μM油酸刺激肝细胞,油红O染色观察细胞内脂滴形成的情况;测定肝细胞内甘油三酯含量;western blot和RT-PCR检测细胞内gp78的表达水平。结果:与对照组相比,过表达gp78肝细胞内脂滴数目增多,体积增大,甘油三酯含量(4.6±1.56)mol/L升高;而沉默gp78肝细胞内脂滴数目减少,体积减小,甘油三酯含量(0.3±1.37)mol/L明显降低(P0.05)。结论:在肝细胞发生脂肪变性过程中,gp78可能发挥了重要的作用;而其发挥作用的机制还有待进一步研究。